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应用LH-PCR研究党参、麻黄和独一味内生细菌多样性
药用植物 细菌多样性 免培养 LH-PCR
2013/9/17
通过直接提取药用植物样品的总DNA，采用长度多态片段PCR (length heterogeneity PCR, LH-PCR)技术研究四川省甘孜藏族自治州的党参、麻黄和独一味3种药用植物内生细菌多样性.结果表明： 同种植物根、茎、叶的LH-PCR图谱相似度很高，条带丰富度差别不大；但不同植物样品之间的差异较大.党参的植物样品条带丰富度最大，麻黄次之，独一味最低.3种药用植物中474 bp长度的细...
上海中医药大学分子生物学常用技术在中医药研究中的应用课件 RT-PCR。
目前在微生物学领域,研究各级分类单元的最有效手段是多相分类,该法能较客观地反映生物间自然系统进化的关系[1]。DNA-DNA同源性分析在多相分类中扮演重要的角色,常用于亲缘关系密切的微生物种内相似度描述.它在检测错分菌株以及新描述的菌株划归已有分类单元时非常有用。
Selection of Reliable Reference Genes for Real-time qRT-PCR Analysis of Zi Geese (Anser anser domestica) Gene Expression
Reference Genes Real-time qRT-PCR Zi Geese Gene Expression
2016/5/11
Zi geese (Anser anser domestica) belong to the white geese and are excellent layers with a superior feed-to-egg conversion ratio. Quantitative gene expression analysis, such as Real-time qRT-PCR, will...
DNA印迹法和实时定量PCR法在端粒长度测定中的应用比较
端粒 印迹法 DNA 实时定量聚合酶链反应 地高辛配基 衰老
2018/6/20
目的：分析并比较测量端粒长度的DNA印迹法和实时定量PCR法在细胞衰老实际研究中的性能。方法：从不同代数（population doublings,PDs）的正常人成纤维细胞（2BS）中提取基因组DNA作为测试样本；对测量端粒长度的DNA印迹法和实时定量PCR法进行优化，以点杂交的方式分析地高辛配基标记检测系统的特异性和灵敏度；分别用两种方法反复测定同一样本的平行样或不同样本并分析比较两种方法测量...
烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)是一个物种复合体， 包括31个以上形态上无法区分的隐种， 其中少数隐种是世界性入侵害虫。目前， 在中国境内分布有2个入侵隐种和13个土著隐种。快速、 高效的鉴别方法对掌握烟粉虱田间发生规律及制定相关防控策略具有重要意义。然而到目前为止， 除了mtCOI基因测序比对外， 尚未有一种简便的方法可以有效地区分多个烟粉虱隐种。本研究采用mtCOI ...
PCR-RFLP和多重PCR技术检测常见病原性丝状真菌的实验研究
丝状真菌 PCR-RFLP 多重PCR 分子鉴定
2012/8/10
目的 建立检测常见丝状真菌感染病原菌的PCR-RFLP和多重PCR方法。方法 建立以PCR技术为基础的限制片段长度多态性(RFLP)方法 ,首先用真菌通用引物扩增丝状真菌的ITS区,然后用限制性核酸内切酶对PCR产物进行酶切。用4种丝状真菌的特异性引物建立多重PCR体系,用该体系检测单模板、双模板和三模板的扩增情况,并测定该体系的特异性和敏感性。结果 用PCR-RFLP技术能够鉴别5种常见丝状真菌...
中国两种钩虫成虫的PCR虫种鉴定研究
钩虫 分子标记物 鉴别
2013/11/25
目的对中国流行的美洲钩虫和十二指肠钩虫进行PCR鉴别。方法通过对中国五省钩虫患者使用双羟萘酸噻嘧啶驱虫获得钩虫成虫，抽提单条美洲钩虫和十二指肠钩虫总DNA（各25条），用美洲钩虫和十二指肠钩虫线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基1（mitochondrial cytochrome oxidase 1, CO1）基因特异性引物（NaFNaR，AdFAdR）进行PCR扩增。对PCR产物进行电泳、测序。使...
荧光定量PCR精确检测人胚胎干细胞线粒体DNA拷贝数方法的建立
人胚胎干细胞 线粒体DNA DNA拷贝数
2012/7/31
建立一种精确定量人胚胎干细胞线粒体DNA拷贝数的方法。构建包含线粒体DNAND1和核单拷贝基因β-globin基因序列的重组质粒作为标准品; 收集无饲养层培养体系下人胚胎干细胞DNA样本， 结合2个单独的Taqman探针实时荧光定量PCR对待测样本中线粒体ND1和核β-globin基因分别进行定量， 从而对人胚胎干细胞线粒体DNA的含量进行了精确定量。结果提示，人胚胎干细胞线粒体DNA的平均拷贝数...
荧光定量PCR精确检测人胚胎干细胞线粒体DNA拷贝数方法的建立
人胚胎干细胞 线粒体DNA DNA拷贝数
2012/7/16
建立一种精确定量人胚胎干细胞线粒体DNA拷贝数的方法。构建包含线粒体DNAND1和核单拷贝基因β-globin基因序列的重组质粒作为标准品; 收集无饲养层培养体系下人胚胎干细胞DNA样本， 结合2个单独的Taqman探针实时荧光定量PCR对待测样本中线粒体ND1和核β-globin基因分别进行定量， 从而对人胚胎干细胞线粒体DNA的含量进行了精确定量。结果提示，人胚胎干细胞线粒体DNA的平均拷贝数...
罗氏沼虾诺达病毒（Macrobrachium rosenbergii nodavirus, MrNV）是世界动物卫生组织规定必需上报的罗氏沼虾白尾病（white tail disease, WTD）的主要病原体。为建立快速检测MrNV的套式RTPCR方法，根据GenBank上发表的MrNV衣壳蛋白基因序列设计2对特异性引物，对PCR条件进行优化后通过特异性试验和敏感性试验检测其特异性和敏感性。结...
中国明对虾卵黄蛋白原mRNA基因在卵巢和肝胰腺中都有表达。采用实时荧光定量PCR方法测定在卵巢不同发育时期卵巢和肝胰腺这两种组织的卵黄蛋白原mRNA的表达水平，提取组织总RNA，设计特异性引物进行荧光定量PCR扩增，对卵巢发育的各个阶段，卵原细胞增殖期、卵黄发生前期、初级卵黄发生期、次级卵黄发生期和消退期的卵黄蛋白原mRNA表达进行相对定量分析。结果表明：在卵巢中，卵黄蛋白原mRNA在前3个阶段随...
以采集自中国杭州和菲律宾的稻虱缨小蜂Anagrus nilaparvatae为研究对象， 采用巢式PCR扩增Wolbachia的16S rDNA和wsp基因片段， 并用DGGE分析稻虱缨小蜂体内Wolbachia的多样性。基于16S rDNA基因的分析结果准确地检测到稻虱缨小蜂体内细菌主要是Acinetobacter sp., Methylophilus sp., Acidovorax sp., ...
为了优选快速、 灵敏、 特异的家蚕微孢子虫Nosema bombycis分子检测方法和DNA抽提方法， 本文通过对家蚕微孢子虫TaqMan探针荧光定量PCR检测方法和SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立以及反应体系优化， 并与普通PCR方法进行比较； 再采用4种不同DNA抽提方法分别对PCR和实时荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫悬浮液的效果评价。结果显示: 不经过DNA抽提， 直接将...