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摘要 本文研究小牛胸腺DNA和组蛋白在体外低、高离子强度盐溶液中的动态缔合与解离。 实验结果是低离子溶液中荧光给体DANsyl-Cl-组蛋白在发射峰位上荧光强度降低,荧光受体吖啶橙-DNA在发射峰位上的荧光强度增高。此两峰位上荧光受体的荧光增量比值是2.7/1(大于1),有能量转移发生,DNA和组蛋白缔合。高离子溶液中两峰位上受体的荧光增量比值降到1.6/1,能量转移减少,DNA和组蛋白解离。 低...
摘要 用Southern DNA分析法,对正常人和胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)病人外周血白细胞DNA进行限制性片段长度多态性(RFLP)研究。HLA抗原与IDDM相关,我们用HLA-DQβcDNA探针和EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ内切酶,测得EcoR Ⅰ 2.2kb片段与正常人DR2抗原相关联(r=0.78,P=1×10~(-6),与IDDM DR2抗原无关联;此片段在DR2的正常组和IDDM组中...
摘要 本文采用离子交换层析,DNA亲和层析和硫酸铵盐析三步从人血清中分离纯化了一种肿瘤相关DNA结合蛋白质(64DP)。本方法较简便,产率提高。经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫电泳鉴定纯度符合要求。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量为64,000。等电聚焦电泳测得等电点在4.2左右。醋酸纤维膜电泳和转移电泳表明其为一种α_1球蛋白。过碘酸西夫氏糖蛋白染色呈阳性反应。氨基酸分析和酶抑制试验证实64D...
新生霉素抑制拓扑异构酶Ⅱ对多瘤病毒DNA合成的影响
病毒DNA合成 DNA拓扑异构酶 新生霉素抑制作用
2008/1/3
摘要 本文报告了Ⅱ型拓扑异构酶抑制剂——新生霉素对多瘤病毒DNA合成的抑制作用,发现新生霉素对细胞和病毒DNA的体外合成具有不同的抑制曲线。新生霉素在复制过程中抑制复制中间物转变成成熟的病毒DNA分子的过程,同时影响病毒DNA分子的负超螺旋密度。本文结果提示Ⅱ型拓扑异构酶是病毒DNA复制末期所必须的酶。
摘要 PCR SSCP是对未知单核苷酸多态性 (SNPs)进行检测最简便、最实用的方法之一 .该方法检测的灵敏度易受片段大小的影响 .以大小在 2 0 0bp左右的PCR扩增产物为检测对象 ,对该方法的影响因素进行了分析 .结果表明 ,在 4℃条件下 ,10V cm恒压电泳 10～ 16h ,在上样缓冲液中加入10 %甘油 ,在 12 %～ 15 %的非变性聚丙烯酰胺 (arc∶bis =2 9∶...
同尾酶技术在构建疟疾多价重组DNA疫苗中的应用
疟疾 多价重组疫苗 同尾酶 免疫
2008/1/1
摘要 同尾酶是一类识别不同核苷酸序列但能酶切产生相同粘性末端的限制性内切酶，依靠同尾酶的这种特性，可以根据需要将不同的ＤＮＡ 片段进行灵活组合，获得各种排列顺序的多价表位重组疫苗．将这种方法用于疟疾多价重组ＤＮＡ 疫苗的研制；ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠免疫实验对所得重组疫苗ＰＵ２８６的免疫原性进行了测定．
脱氧核糖核酸（DNA）的制备
2007/12/28
摘要在实验生物学的研究中，DNA的制备已
成为一种常用的方法。根据实验材料和研究目
的不同，所用的制备方法也不同。本文主要介
绍质粒DNA和其它（动物组织、细菌）DNA
常用的制备方法。
紫杉醇对柔红霉素与DNA作用影响的研究
紫杉醇 柔红霉素 DN 光谱电化学
2007/12/25
摘要 采用紫外-可见光谱、荧光光谱、微分脉冲伏安法以及紫外-可见光谱电化学法等多种手段, 从分子水平研究了紫杉醇对柔红霉素与DNA作用的影响. 紫杉醇可以和柔红霉素形成分子间氢键; 紫杉醇的长链对柔红霉素糖环以及柔红霉素和DNA所形成加合物的外围有一定程度的缠绕作用, 最终使柔红霉素的药效增加毒副作用减小.
用墨西哥帽小波研究DNA序列的分形特征
脱氧核糖核酸 序列分析 数学模型
2007/12/25
摘要 结合小波分析和分形理论，采用分数布朗运动(FBM)建立数学模型，研究脱氧 核糖核酸(DNA)序列的自相似性。用DNA walk的方式将DNA序列表达成为一个数字信 号，通过不同小波变换的尺度对应不同特征长度的碱基，选择墨西哥帽小波为母小 波，进行实验考察，结果发现小波系数的图形在许多尺度看上去很相似，大尺度对 应较多的碱基(小波变换尺度为2^7时，对应512个碱基)，能看到概貌；小尺度对应 ...
摘要 用DEAE-纤维素(二乙氨乙基纤维素)和聚乙二醇(PEG 6000)纯化的体外重组λ噬菌体, 经SDS(十二烷基磺酸钠)裂解和酚/氯仿抽提等处理, 得到了重组DNA. 该DNA纯度高, 适用于限制性内切酶分析.
一种含吲哚咪唑基Ru(II)配合物的酸碱性质和与DNA相互作用的研究
钌(II)配合物 DN 插入作用
2007/12/24
摘要 合成了一个新的Ru(II)配合物[Ru(bpy)2(H2iip)](ClO4)2•5H2O [bpy＝2,2'-联吡啶, H2iip＝2-吲哚基-咪唑并[4,5-ƒ][1,10]-邻菲罗啉]. 通过酸碱滴定发射光谱测定了该配合物的表观电离常数; 用紫外可见光谱、荧光光谱、稳态荧光淬灭、溴化乙锭竞争键合、粘度测量和DNA裂解实验研究了配合物与DNA的相互作用性质. 结果表...
夏家店等古人骨DNA的提取、扩增及序列分析
古人骨DNA 提取 测序 同源性
2007/12/24
摘要 古DNA从距今 2 0 0 0～ 50 0 0年的古代人骨 (编号为 :M89,ⅢM11,ⅢM12和AM4 )中提取出来 ,利用聚合酶链式反应分别对线粒体DNA中MTND4 基因中 112 10～ 11414(2 0 5bp)以及RegionV中 8196～ 83 16(12 1bP)进行了扩增 ,并被测序 .实验结果表明古代人骨中仍存在有大量的遗传信息 ,通过提取、扩增可以得到真实可靠的序...
摘要 测定了ＲＢ６９ ＤＮＡ 聚合酶以不正确的核苷酸（ｒＮＴＰ、ｄｄＮＴＰ以及碱基不配对的ｄＮＴＰ）为底物进行聚合反应的稳态动力学常数，并与Ｋｌｅｎｏｗ 酶进行了比较．结果表明，ＲＢ６９ ＤＮＡ 聚合酶在以不正确的核苷酸为底物进行聚合反应时，其Ｋｍ 值与正确底物参入时相比有大幅度提高，而ｋｃａｔ保持不变或下降幅度较小．而Ｋｌｅｎｏｗ 酶在利用不正确的核苷酸为底物时，与正确底物参入时相比，其ｋｃａｔ...
噬菌体RB69 DNA聚合酶的表达、分离纯化和其聚合反应的稳态动力学研究
RB69 DNA聚合酶 动力学常数 参入的
2007/12/24
摘要 噬菌体ＲＢ６９外切酶活性缺失的ＤＮＡ 聚合酶突变体（Ｄ２２２Ａ／Ｄ３２７Ａ）在大肠杆菌细胞中表达，表达量达细胞蛋白总量的６９％ ．表达后经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦａｓｔＦｌｏｗ ， Ｓｏｕｒｃｅ ３０Ｑ 和ＨＴＰ三步分离纯化，纯度可达９９％ 以上．随后测定了该酶利用５种ｄＮＴＰ为底物进行聚合反应的酶促动力学常数（Ｋｍ 和Ｋｃａｔ），结果表明该酶利用ｄＵＴＰ的能力与利用ｄＴＴＰ的能力相...