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中国科学院深圳先进技术研究院专利：改性聚乙烯亚胺及其制备方法和基因转染试剂及其应用
2022年1月，中国科学院武汉病毒研究所/国家病毒资源库邓菲/沈姝团队与英国利物浦大学蜱细胞库合作，在Ticks and tick-borne diseases杂志发表题为“Differential characteristics of mammalian and tick-derived promoters to trigger protein expression in transfected...
国际权威期刊 Nature Communications（《自然•通讯》）在线发表化学与分子科学学院周翔教授团队和邓鹤翔教授团队在MOF(Metal-organic framework，金属有机框架材料)及DNA领域的合作研究成果。该工作报道了新型介孔MOF材料的设计合成及生物应用拓展，首次实现了单链DNA在非病毒载体中大量负载、精确保护及高效释放，并采用最具挑战的免疫细胞验...
肝细胞生长因子基因转染对人淋巴瘤细胞凋亡的影响
肝细胞生长因子 基因转染 凋亡
2012/7/17
探讨肝细胞生长因子(HGF)基因转染人淋巴瘤细胞系Raji细胞后， 拮抗足叶乙甙(VP-16)诱导细胞凋亡的研究。将三种细胞: 未转染Raji细胞、空载体pVITRO2-mcs转染细胞和HGF基因转染细胞， 分成正常对照组和经VP-16处理的药物组。采用Western blot法验证HGF蛋白的表达;CCK-8法检测诱导Raji细胞凋亡的药物浓度; 通过透射电镜、流式细胞术、吖啶橙(AO)染色、苏...
水压转染法在小鼠不同肝叶的表达效率
小鼠 肝脏 水压转染法 增强型绿色荧光蛋白
2012/7/20
为了解水压转染法(hydrodynamics-based transfection， HDT)在小鼠肝脏不同肝叶的转染效率， 将容量为小鼠体重的10%， 绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP-C1含量为35 μg/只的生理盐水溶液以0.4 mL/s的速度从小鼠尾静脉注射， 于注射后不同时间取小鼠各肝叶制备冰冻切片， 在荧光显微镜下观察， 计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果显示注射后12 h， 绿色荧...
复合环境离子强度对BDCP/DNA的粒径与转染效率的影响
聚乙烯亚胺 基因转染 非病毒载体
2009/11/2
为了探讨组装环境对基因载体/DN复合物的粒径和转染效果的影响，在三种不同离子浓度溶液体系(PBS, 5% 葡萄糖溶液, H2O)中测量BDCP（biodegradable cationic polymer，一种生物可降解的阳离子聚合物）/DNA复合物粒径和结合力，进行了体外转染试验和毒性试验.结果显示，PBS最适合组装转染复合物，可取得更好的稳定性、最高的转染效率和较低细胞毒性、低溶血率；在5%葡...
硅纳米颗粒作为基因转染载体的研究
硅纳米颗粒 氯化纳 基因转染 载体
2008/1/30
摘要 通过不同浓度的NaCl、NaI修饰硅纳米颗粒，用琼脂糖凝胶电泳分析硅纳米颗粒与DNA结合力及对DNA的保护作用，同时用绿色荧光蛋白基因作报告基因，以硅纳米颗粒作为基因转染的载体，转染HT1080细胞。 经电镜观察证实硅纳米颗粒进入细胞内；硅纳米颗粒与DNA结合后，能对DNA起保护作用；并且硅颗粒作为基因转染的载体，将绿色荧光蛋白基因导入HT1080细胞，用荧光显微镜观察到发绿色荧光的细胞。结...
摘要培养人高转移肺腺癌细胞系Anip973，构建其cDNA表达文库并转染小鼠成纤维细胞NIH3T3，将经药物筛选后的转染细胞克隆消化为单细胞，接种到软琼脂中培养2周，根据细胞明显的形态学变化挑选出有意义的细胞克隆，扩增再培养，提取DNA，PCR扩增插入片段并进行测序分析。结果表明：软琼脂中挑选出克隆100多个，PCR测序后，得到3个已知基因包括人类核糖体蛋白L23、人类假定蛋白FLJ22104和人...
人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤细胞的初步研究*1)
人鼠嵌合抗体 转染 骨髓瘤J558L
2008/1/16
本文介绍了通过人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤J558L的研究，叫详尽地阐述了用原生质体融合发将重组的人鼠嵌合抗体重链基因转染到J558L骨髓瘤细胞中，并用ELSA法检测转染子的过程和方法，同时简要地说明了影响转染率的一些因素。
外源基因转染导致小鼠体细胞过快衰老 及p16INK4a表达水平变化
外源基因
2008/1/11
摘要对小鼠胎儿成纤维细胞进行外源基因转染时发现, 外源基因转染后的小鼠体细胞染色体端粒的长度以每代47 bp碱基缩短; 在转染后的衰老细胞中, 或细胞随着增龄, p16INK4a 5′-调控区DNA甲基化程度逐渐降低; 利用RT-PCR与Northern blot证明, 衰老细胞与年轻细胞中的p16INK4a基因的表达水平存在显著差异, 传代45代的细胞和外源基因转染后的衰老细胞p16INK4a基...
脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化
脂质体 绿色荧光蛋白 牛胎儿成纤维细胞 转染
2007/12/29
通过脂质体（FuGENE-6）介导，将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞，探讨影响外源基因转染效率的参数，如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现，绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加，延长细胞暴露时间反而使转染效率下降，转染细胞数适当才...
人白细胞抗原G3在稳定转染细胞细胞膜上的表达
HLAG HLAG3 稳定转染 K562细胞
2007/12/24
摘要 人白细胞抗原G(HLA G)是一种在母婴耐受中起主要作用的非经典的HLA Ⅰ类分子 .其中HLA G3结构简单 ,仅具有α1结构域、穿膜区及胞浆区 ,其是否在细胞表面表达尚存在争议 .为了建立HLA G3稳定转染细胞株并确定其在细胞内的定位 ,采用RT PCR法从 9周人胎盘组织中获得了HLA G3的cDNA ,并构建到真核表达载体pcDNA3中 ,将所获得的真核表达质粒pcDNA G3转染...
全长及缺失VLDL受体基因转染的CHO细胞与β-VLDL的结合效应
VLDL受体 基因表达 β-VLDL CHO细胞
2007/12/24
摘要 为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ,转染全长 VLDLR重组体的 CHO细胞结合β- VLDL的能力明显高于转染 VLDLR缺失重组体的 CHO细胞 ,表明人...
摘要 半乳糖α 1,3 半乳糖抗原是引起异种器官移植超急性排斥反应 (hyperacuterejection ,HAR)的主要抗原 .α 半乳糖苷酶和α 1,2 岩藻糖转移酶基因可以以不同的方式降低半乳糖α 1,3 半乳糖抗原在内皮细胞表面的表达量 .将人α 半乳糖苷酶基因和α 1,2 岩藻糖转移酶基因单独或连接在一起导入猪血管内皮细胞PEDSV .15中 ,检测细胞表面的抗原及异种天...