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本发明涉及分子生物学领域,具体公开了用于基因转录激活的药物诱导型CRISPR/Cas9系统。所述药物诱导型CRISPR/Cas9系统包括靶向特定基因位点的16?22nt sgRNA和如下(一)~(三)中的任意一种载体/载体组合:(一)表达融合蛋白dCas9?(ERT2)n?ADs或dCas9?ADs?(ERT2)n的载体;(二)表达融合蛋白dCas9?(NLS)m或dCas9?(ERT2)n和MC...
本发明涉及分子生物学领域,具体公开了一种用于基因组编辑的药物诱导型CRISPR/Cas9系统,包括靶向特定基因位点的16?22nt的sgRNA和Cas9融合蛋白,所述Cas9融合蛋白由Cas9和与其C端串联的2?5个ERT2组成,所述Cas9和串联的ERT2之间插入1个或2?10个串联的NES。本发明经过一系列试验探究,开发并优化出了具有最高活性和最低背景活性的方案,将之应用于内源基因的编辑。此外...
大片段基因簇(尤其是高附加值生物分子的基因簇)的克隆是微生物功能基因组研究中最为基础和关键的步骤。传统基于PCR的克隆方法或者通过构建基因组文库筛选等方法存在着克隆片段长度的限制、易产生突变、步骤复杂、效率低下等缺点。因此开发一种快速简单的方法来获得大尺度的基因簇片段至关重要。

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