搜索结果: 1-9 共查到“家畜病毒学 shRNA”相关记录9条 . 查询时间(0.093 秒)
利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞，建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆，并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术，将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组，获得表达骨架，重组后的表达载体在...
水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选
水牛YY1基因 shRNA 慢病毒表达载体 基因表达
2014/3/18
本试验旨在克隆水牛阴阳因子1（YY1）基因，并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板，采用RT-PCR方法，扩增水牛YY1基因CDS序列，将其连接插入到pMD18-T载体中，进行序列测序并分析。采用Xho I和EcoR I双酶切，将水牛YY1基因编码区定向克隆至pEGFP-N1载体中，构建其真核表达载体pYY1-EGFP-N1。设计2条靶向水牛YY...
为研究视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4, RBP4)对猪前体脂肪细胞分化的影响，笔者构建了RBP4重组慢病毒干扰载体，包装并感染猪前体脂肪细胞，采用BODIPY和油红O染色以及real-time PCR等方法，从形态学和基因表达水平检测抑制RBP4表达对成脂分化的作用。研究结果显示，RBP4重组慢病毒干扰载体构建成功，病毒滴度达到 6.5×107 pfu·mL-...
慢病毒介导的shRNA对MFC细胞生长抑素的沉默及对细胞增殖的影响
慢病毒介导 shRNA MFC细胞生长抑素 细胞增殖
2011/10/25
SS能够抑制肿瘤细胞的增殖，其与肿瘤的关系已成为肿瘤学的研究热点。本研究将包装获得的靶向生长抑素的lv-shRNA病毒液感染肿瘤细胞MFC，同时，以pcDNA3.1-SS（pSS）转染细胞组作为SS过表达细胞对照，通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达，RIA检测发现49.55%（P<0.05）的SS受到了抑制。MTT法绘制细胞的生长曲线可知，pSS转染细胞的生长明显受到抑制，抑制效率为8.14%...
靶向狂犬病病毒N基因shRNA抑制狂犬病病毒复制的研究
狂犬病病毒 shRNA RNA干扰 实时荧光定量PCR
2013/12/6
为探讨小干扰RNA(siRNA)对狂犬病病毒（RV）复制的干扰作用，以RV N基因为靶向目标，设计合成4对编码siRNA的DNA序列，然后分别连接到载体pRNATU6.3Hygro上，转染BHK细胞，在潮霉素B抗性压力下筛选出4个阳性细胞株（BHKN1、BHKN2、BHKN3和BHKN4）。用100TCID50 CVS11毒分别感染24孔板内的上述细胞，利用Realtime RT...
靶向狂犬病病毒N基因shRNA抑制狂犬病病毒复制的研究
狂犬病病毒 shRNA RNA干扰 实时荧光定量PCR
2010/4/14
为探讨小干扰RNA(siRNA)对狂犬病病毒（RV）复制的干扰作用，以RV N基因为靶向目标，设计合成4对编码siRNA的DNA序列，然后分别连接到载体pRNATU6.3Hygro上，转染BHK细胞，在潮霉素B抗性压力下筛选出4个阳性细胞株（BHKN1、BHKN2、BHKN3和BHKN4）。用100TCID50 CVS11毒分别感染24孔板内的上述细胞，利用Realtime RT...
对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1（114~132位）、P-2（136~154位）和P-3（209~227位）分别接种猪瘟病毒（CSFV），在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CSFV NS3基因及β-actin基因，以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果；接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验（...
分别用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测了筛选的3株分别转录猪瘟病毒石门株3′-UTR 209～227位，136～154位和114～132位shRNA的PK-15细胞株P-1，P-2和P-3在接种猪瘟病毒石门株72 h，96 h 和72 h，96 h，148 h后对病毒增殖的干扰。结果表明，P-1，P-2和P-3细胞株均能在RNA和病毒蛋白水平上...