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探讨依托咪酯对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)传递及非小细胞肺癌A549细胞产生的影响。方法:设A549细胞组,5-氟尿嘧啶组,依托咪酯低剂量组,高剂量组; 5-氟尿嘧啶剂量组,依托咪酯低剂量组,高剂量组分别加入5-氟尿嘧啶剂量组,不同浓度的依托咪酯,最终浓度为100.0μg/ mL ,100.0μg/ mL,200.0μg/ mL,培养72h。细胞计数试剂盒-8评估细胞生长...
本研究旨在检测重组结核分枝杆菌10 ku培养滤液蛋白(culture filtrate protein 10,CFP10)对肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞Toll样受体(TLRs)信号途径及其介导的炎症反应的影响。PCR扩增cfp10目的基因片段,构建重组质粒载体pCzn1-CFP10。将重组质粒pCzn1-CFP10转入BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达重组蛋白CFP10(r...
二吲哚吡啶基噻唑烷对肺癌A549细胞增殖的影响
肺癌 二吲哚吡啶基噻唑烷 细胞增殖 细胞周期 PI3K/Akt/mTOR信号通路
2020/9/17
探讨二吲哚吡啶基噻唑烷(DIIT)对肺癌A549细胞增殖的影响。方法:通过CCK-8法测定DIIT对肺癌A549细胞活力的影响;EdU/DAPI双染法观察细胞增殖情况;Western blot法检测DIIT对Akt和mTOR磷酸化及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达水平的影响。
探讨微小RNA-486(miR-486)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡的影响和机制。方法:以LPS处理肺泡上皮细胞,RT-qPCR测定miR-486表达变化。在肺泡上皮细胞中转染miR-486模拟物(miR-486 mimics),RT-qPCR检测LPS条件下的转染效果。流式细胞术测定凋亡变化,Western blot检测细胞中cleaved caspase-3(C-caspa...
雷公藤红素通过miR-17-5p和miR-155-5p靶向抑制cyclin D1阻滞A549细胞周期的研究
雷公藤红素 肺癌 细胞周期 微小RNA-17-5p 微小RNA-155-5p
2020/9/17
研究雷公藤红素对人肺腺癌A549细胞周期的影响,并探讨其机制。方法:梯度浓度的雷公藤红素作用于人肺腺癌A549细胞后,MTT法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡,筛选出雷公藤红素的半数致死浓度;而后用半数致死浓度的雷公藤红素作用于A549细胞,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达水平;real-time PCR检测微小RNA...
探讨姜黄素对电离辐射诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化的影响。方法 用电离辐射诱导A549细胞发生上皮间质转化,将其命名为A549R。CCK8法检测细胞增殖;Western blot检测姜黄素对A549R上皮/间质标志物表达的影响;划痕实验及Transwell实验检测姜黄素对A549R细胞迁移能力的影响。
毛兰素通过ROS/p38 MAPK通路诱导人肺癌A549细胞凋亡
毛兰素 肺癌 活性氧 细胞凋亡 p38 MAPK信号通路
2020/9/17
研究毛兰素(erianin)对人肺癌A549细胞活力和凋亡的影响,并探讨可能的分子机制。方法:常规培养人肺癌A549细胞和人正常支气管上皮BEAS-2B细胞,给予不同浓度(0、10、20、40、80和160 nmol/L)毛兰素处理48 h后,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测活性氧(ROS)含量和细胞凋亡情况,WST-8法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MD...
从细胞生物学角度研究全氟化碳 (PFC)对脂多糖 (LPS)诱导 A549细胞损伤的保护作用,为临床应用PFC治疗急性呼吸窘迫综合征提供理论依据。方法 常规传代培养人肺泡上皮样细胞A549,将其分为4组。对照组:不作任何干预;PFC组:按10%体积比(PFC∶培养液)加入全氟辛烷;LPS组:干预时按100mg/L的浓度加入LPS;LPS+PFC组:按上述浓度同时加入LPS和PFC。各组A549细胞...
和厚朴酚通过mTOR信号通路诱导肺癌A549细胞自噬
肺癌 和厚朴酚 细胞自噬 mTOR信号通路
2020/9/16
探讨和厚朴酚(honokiol)对人肺腺癌A549细胞自噬的诱导作用及可能的作用机制。方法:体外培养A549细胞,加入不同浓度(0、10、20、40、60和80 μmol/L)的honokiol处理48 h,MTT法检测honokiol对细胞活力的影响;吖啶橙染色观察细胞酸性自噬泡情况;Western blot法检测honokiol及联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用后对自噬相关蛋白LC...
探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂耐药性的影响及其作用机制。方法:RT-qPCR检测非小细胞肺癌组织及其细胞株A549和A549/DDP中miR-125a-5p和LIM激酶1(LIMK1)的表达;在A549/DDP细胞中上调或下调miR-125a-5p或LIMK1表达,分别采用MTT法、流式细胞术和Western blot检测细胞活力、...
研究let-7a-3p对人肺癌细胞A549的肿瘤干细胞活性的影响及其相关机制。方法:RT-qPCR法比较肺癌细胞系A549、NCI-H1299、SPC-A1、H1650和HCC-827及人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B中let-7a-3p的水平。A549肺癌细胞株分别转染let-7a-3p模拟物(let-7a-3p mimics)和其阴性对照(negative control mimic),分...
探讨白介素-17受体A(interleukin-17 receptor A,IL-17RA)对人肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:构建IL-17RA基因过表达慢病毒载体并感染A549细胞,采用RT-qPCR法和Western blot方法检测IL-17RA、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达。MTT实验、划痕实验及Transwell侵袭实验检测IL-17R...
探讨伊曲康唑(itraconazole,Itra)抑制肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法 Itra处理肺癌A549细胞24、48、96 h,用MTT法检测细胞存活率,并计算半抑制浓度(IC50)。将实验分为对照组、Itra组、AMPK抑制剂(compound C,Comp C)+Itra组,内质网应激抑制剂(4-PBA)+Itra组,用AnnexinV/PI法检测细胞凋亡,Western b...
目的 探讨微小RNA-182-5p(miR-182-5p)靶向叉头蛋白O3a(FOXO3a)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖及凋亡的影响。方法 比较人正常肺上皮细胞BEAS-2B、NSCLC细胞A549中miR-182-5p的表达差异。选取A549细胞进行转染,分为miR-182-5p mimic组(转染miR-182-5p mimic)、miR-182-5p inhibitor组...
贝母素乙调控PI3K/Akt/mTOR通路减缓上皮-间质转化进程抑制人肺癌A549细胞侵袭及迁移的研究
贝母素乙 肺癌A549细胞 侵袭 迁移 上皮-间质转化进程 PI3K/Aktm/TOR通路
2020/1/9
目的 探讨贝母素乙对人肺癌A549细胞侵袭及迁移的影响。方法 采用终浓度为0、50、100、200 μmol/L贝母素乙处理A549细胞,通过细胞侵袭实验、细胞划痕实验、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法、ELISA法及Western blotting实验检测贝母素乙对A549细胞侵袭、迁移的影响及潜在机制。结果 与对照组比较,贝母素乙各浓度组的A549细胞穿膜数、细胞间划痕的愈合率及MMP-...