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成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进展
成纤维细胞生长因子 受体 肝素 抑制剂
2008/9/27
成纤维细胞生长因子（FGF）有许多重要的生理功能，并与肿瘤的形成有关.为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)相互作用的机制，人们对FGF和FGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究，定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区，提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型，在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽...
人P68核蛋白在小鼠成纤维细胞中过量表达引起恶性转化的研究
P68核蛋白 RNA解旋酶 过量表达 恶性转化
2008/2/4
摘要P68核蛋白是一个依赖于ATP的RNA解旋酶,同时具有依赖于RNA的ATPase活性,它与SV40大T抗原有交叉免疫反应。随细胞周期不同,其含量和分布均有较大差异。以前的工作表明P68核蛋白在同一细胞系不同生长阶段的表型不同。它在肿瘤细胞(HeLa和TC3H10)与非肿瘤细胞(NIH3T3和NC3H10)之间表型亦有明显差异.因此,在细胞中过量表达P68核蛋白,可能会影响到细胞的生长特性。报道...
5-azaC对人体成纤维细胞失活X染色体DNA复制带型的影响
5一氮胞普 复制带 失活X染色体
2008/2/3
摘要本文用饱苔的类似物，一氮胞昔( 5-azaC）处理两种人体皮肤成纤维细咆— 46, XX和46.9 Xt(X; 1)0经过一定时间培养，观察用5-azaC处理人体成纤维细咆中失活X染色体复制带的变化。发现，一。zaC对迟复制X(LX）和t(X; 1)染色体上有一条或多条复制带的染色增深，表示复制提前，大约比对照组提前复制1小时左右。n时发现t(x; 1)染色体上，受X失活中心的失活扩散影响的I...
小鼠成纤维f胞早中期染色体标本制备及G带核型分析
小鼠 成纤维f胞 染色体标本制备 G带核型分析
2008/1/17
目前，由于染色休病、肿瘤及JtA Fq定位研究的精确度的提高，不仅要求识别染色体，而且需要明确其精细的带型结构。本工作介绍一种小鼠成纤维细胞经体外培养获得早中期G带染色体的方法，所得带烈与目前国际普遍采用的Nesbitt及Franke标准模式图一致，单倍休帝纹迟300条。本工作特点在于方法简便;带纹清晰，且可用于慢性动物实验。
用Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓PCE微核试验和小鼠致畸试验对基因重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF)进行研究。结果显示，rh-bFGF(0.1～500μg/皿）对TA97、TA98、TA100和TA102菌株在±S9mix条件下无致突变作用。各剂量组的微核细胞率与溶剂组比较，P>0.05。4个剂量组CHL细胞染色体畸变率均<5％。在妊娠母鼠6～15d P0给药，各剂量...
胸苷激酶基因在人二倍体成纤维细胞衰老过程中的表达调控
细胞衰老 人胸苷激酶基因 表达调控 Rb
2008/1/3
摘要 为研究人胸苷激酶 (humanthymidinekinase ,hTK)基因在复制衰老细胞及早衰细胞中表达下调的分子机制 ,构建了含hTK启动子的荧光素酶报告基因载体 .转染结果显示 ,复制衰老细胞与早衰细胞中hTK启动子的转录活性比年轻细胞中下降了近 3倍 ,表明转录水平的调控是hTK在衰老细胞中表达下降的主要调控机制 .定点突变的结果显示 ,转录因子Sp1、NF Y结合位点的突变可使hT...
矽肺成纤维细胞增生因子的纯化及分析
矽肺 巨噬细胞 成纤维细胞增生因子
2008/1/1
摘要 过去的研究资料充分证明,巨噬细胞和由巨噬细胞释放的可溶性因子在矽肺纤维化过程中起着重要的调节作用。然而,对这种调节矽肺纤维化过程的蛋白因子的理化特性迄今还知道得很少。本研究采用矽肺大鼠肺泡巨噬细胞体外培养的方法获得其培养上清液,实验证明,该上清液可以促进体外培养的成纤维细胞对~3H-TdR和~3H-脯氨酸的摄取。我们从巨噬细胞上清液中分离纯化出一种具有促进成纤维细胞增殖能力的蛋白质因子。该因...
脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化
脂质体 绿色荧光蛋白 牛胎儿成纤维细胞 转染
2007/12/29
通过脂质体（FuGENE-6）介导，将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞，探讨影响外源基因转染效率的参数，如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现，绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加，延长细胞暴露时间反而使转染效率下降，转染细胞数适当才...
神经鞘脂病的酶学诊断方法——用培养的人皮肤成纤维细胞检测
神经鞘脂病 脑脂质沉积症 酶学诊断
2007/12/24
摘要 神经鞘脂病是一类神经鞘脂分解代谢障碍的遗传性疾病,酶学检测是确诊的一种主要手段。在通常采用的标本中,培养的人皮肤成纤维细胞是最理想的酶源。本文改良七种用人工底物检测酶活性的方法,通过控制细胞传代和细胞生长时相的措施,用自己培养的34个正常人的皮肤成纤维细胞建立对GM_1-神经节苷脂累积症,GM_2-神经节苷脂累积症,异染质型脑白质营养不良症,krabbe氏病,Gaucher氏病,Nieman...
摘要 为寻找纤维化形成中调控人Ⅰ型前胶原基因高水平转录的启动序列及其DNA结合蛋白 ,以人皮肤成纤维细胞α1(Ⅰ )前胶原基因转录起始点上游 - 2 5kb至 + 4 2bp的片段为靶序列 ,采用PCR、基因重组、报告基因测活、细胞基因转染技术比较不同长短启动子活性 .凝胶滞留实验 (EM SA)研究高启动活性片段相应的DNA结合蛋白 .基因转染高活性转录因子识别序列至靶细胞 ,探讨前胶原基因激...
人胚肺二倍体成纤维细胞端区长度的代龄变化
端区 细胞衰老 生物学标志
2007/12/24
摘要 以体外培养的不同代龄的人胚肺二倍体成纤维细胞（2BS）为实验对象，HeLa细胞为对照，分别观察其端区长度随代龄的变化．结果显示年轻2BS细胞（24代）端区长度约9．13kb；衰老2BS细胞（64代）端区长度约7kb，丢失约2kb．2BS细胞端区长度随代龄的增长而缩短．密度扫描结果显示细胞每复制一代，端区平均丢失50bp，而HeLa细胞的端区长度未因代龄而变化．
...
人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达
αFGF 基因重组和表达
2007/12/24
摘要 用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及插入方向的正反,结果我们得到了haFGF正向插入在pBV220 PLPR启动子下游的重组质粒pBV-αFGF。42℃热诱导使重组...
人成纤维细胞转录因子Sp1Sp3对p16~(INK4a)基因的调控
人成纤维细胞转录因子Sp1Sp3 人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS) 电泳迁移率变动分析(EMSA) 细胞周期蛋白依赖激酶(cdk)
2007/12/24
摘要 p16 INK4a是一种细胞周期蛋白依赖激酶 (cdk)的抑制因子 ,它通过抑制cdk4与cdk6的活性 ,使视网膜母细胞瘤抑制蛋白Rb处于低磷酸化状态 ,从而使细胞阻滞于G1期 .对p16 INK4aATG上游 6 2 2bp片段进行序列分析发现 ,该区域富含GC ,其中有 5个GC盒 (分别命名为GC Ⅰ～GC Ⅴ ) .将上述片段插入到荧光素酶报告载体pGL3 Basic ,分别对 5...