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为了研究拟南芥半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYS6基因在植物生长发育过程中的作用与功能,从拟南芥中克隆了半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYS6基因,并对该基因进行生物信息学分析,亚细胞定位分析,蛋白质诱导、表达、纯化及功能研究。结果表明,AtCYS6蛋白等电点为5.85,化学式为C1179H1848N322O348S6,共含有3 703个原子数,为亲水性蛋白;AtCYS6与十字花科的荠菜、荠蓝的同源性较高,...
目前转基因常用的终止子大多为细菌或真菌来源, 有可能引起转基因食品安全性问题。本研究以水稻(Oryza sativa) ‘kitaake’为材料, 克隆了谷蛋白B-4基因(GluB-4)的终止子GluB-4-T (GenBank登记号: X14393), 分析了其在不同启动子驱动下替代根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)胭脂碱合酶终止子(nos-T)的可能性。β-d-葡...
NAC转录因子在植物信号转导及非生物损伤过程中起重要作用。本实验从烟草cDNA文库中克隆了Nt-NAC1基因, cDNA编码区全长861 bp, 编码286个氨基酸。进化树分析结果显示, NtNAC1基因编码的氨基酸序列与马铃薯同源性最高。农杆菌介导的遗传转化获得37株转基因烟草, 用20% PEG6000处理转基因和野生型植株7 d。结果显示, 转基因植株的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(...
本研究以AP2/ERF保守结构域序列为检索序列在甜菜(Beta vulgaris)基因组数据中搜索并鉴定BvERF转录因子家族成员。通过系统分析, 发现甜菜基因组中共有68个BvERF家族基因, 系统进化分析将它们分为10个组。BvERF家族中15个成员与甜菜块根转入快速生长阶段有关, 其中Bv_ammr可能与甜菜丰产性能有关, Bv_ignp、Bv_sqfr和Bv_khde与苗龄113 d时丰产...
胚胎发育晚期丰富(LEA)蛋白在植物抵抗非生物胁迫过程中起着重要作用。利用RACE技术从柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii)中克隆得到一个LEA_4家族基因CkLEA4-2, 其cDNA全长963 bp, 编码240个氨基酸。实时荧光定量PCR检测发现CkLEA4-2的表达受干旱、脱水、NaCl、冷、高pH、脱落酸(ABA)处理的诱导。通过构建35S启动子驱动的pCanG-Ck-...
拟南芥(Arabidopsis thaliana) AtTTG1作为WD40重复转录因子存在于细胞核中, 对表皮毛形成、花青素合成和储藏物质积累等具有重要调节作用。该研究从甘蓝型油菜(Brassica napus)品种秦优7号中克隆获得了BnTTG1-1基因的全长CDS序列, 对其进行了烟草(Nicotiana benthamiana)叶片细胞的亚细胞定位研究, 检测了BnTTG1-1在油菜(B....
从小桐子(Jatropha curcas)幼苗的叶片组织中分离出一个新的AP2/ERF类转录因子的编码基因, 命名为JcERF3。序列分析显示其完整编码区为729 bp, 编码蛋白由242个氨基酸组成。推测的蛋白质与其他物种的ERF3蛋白具有很高的序列相似性, 并含有一个保守的AP2结构域。对启动子元件的预测显示存在一个乙烯响应元件(ERE), 暗示JcERF3的表达可能受到乙烯的调节。核定位信号...
以转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana) Col-LUC为亲本材料, 把它的种子进行甲基磺酸乙酯(EMS)诱变, 在M2代幼苗中筛选出一株荧光降低的候选突变体, 命名为rll1 (reduced LUC luminescence 1), 此突变基因对应的野生型基因位点因此被命名为AtRLL1位点。该突变体在生长发育方面表现出明显矮化、角果较短、叶片较小的发育缺陷表型。遗传学分析表...
本实验室前期在拟南芥中发现了一个可以正向调控叶片衰老的LRR型丝/苏氨酸和酪氨酸双底物特异性类受体蛋白激酶AtSARK (Arabidopsis thaliana senescence-associated receptor-like kinase) , 并且经软件预测和质谱分析发现其有多个自磷酸化位点。本文把其中位于C末端的一个自磷酸化位点Tyr-350分别突变为谷氨酸(E)以模拟磷酸化状态或突...
物细胞内抗病蛋白特异性识别病原菌后激发强烈的抗病反应,这类抗病反应往往伴有局部的细胞死亡。但抗病蛋白介导的抗病与细胞死亡的因果关系多有争议、其亚细胞分区定位与死亡信号的关系也不是很清楚。
根据Southern 杂交结果, 选取KpnⅠ与EcoRⅠ双酶切番茄中蔬4 号基因组DNA, 3 kb 左右的酶切片段连入pBSⅡKS ( + ) 载体, 构建成含有线粒体小分子热激蛋白基因( LeMTshsp) 上游2 kb 左右调控区的质粒文库。通过巢式PCR 方法从构建的质粒文库中克隆出LeMTshsp 基因上游1915 bp 的调控区( GenBank登录号为AB239774) 。该序列含...
摘要 运用改进的减法杂交技术分离到胡萝卜Poly(A)结合蛋白基因DcPAB .其cDNA编码区长度为 1 977bp ,编码 6 5 8个氨基酸和 1个终止密码子 .基因组转录序列区长度为 4 6 1 6bp ,包含 9个外显子和 8个内含子 .DcPAB在胡萝卜基因组中为单拷贝基因 .该基因在胡萝卜体细胞胚中特异性表达 ,且其表达活性在调控 解调控前后有明显差异 .体外结合实验表明 ,在大肠...
摘要 叶片衰老是观叶植物观赏性降低的重要因素之一.为研究彩叶草叶片衰老变化的分子机理,在构建彩叶草衰老叶片cDNA文库及小型EST库的基础上,以1条新的具有胱硫醚β 合酶(cystathionine beta synthase, CBS)结构域的EST序列为探针,通过RACE与文库结合的 方法,克隆了1个具有1对完整CBS结构域的全长cDNA,Cbcbs.Cbcbs cDNA 全长859 b...
利用RACE方法, 从大蒜(Allium sativum)幼苗中克隆到一个MT基因家族的新成员, 命名为AsMT2b. AsMT2b全长520 bp, 编码80个氨基酸, 具有type 2 MT蛋白的结构特征, 但其Cys的位置和排列方式与其他type 2 MT蛋白具有明显差异. RT-PCR结果表明, 该基因与其他 type 2 MT的表达模式不同, 只有在CdCl2的胁迫强度增加到一定程度时才...

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