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2018年7月26日下午,微生物研究所E301学术报告厅座无虚席,上百名科研人员正在聚精会神地认真聆听着“非人灵长类体细胞克隆猴”团体负责人孙强研究员所做的“非人灵长类模式动物构建-从基因编辑到体细胞克隆”精彩报告及先进事迹介绍。 本次学术报告由微生物研究所刘双江所长主持,刘双江所长借由《西游记》中孙悟空拔出一根猴毛吹口气即可再变出一个孙悟空的神话,引人入胜地对孙强研究员及其取得的创新性成就进行了...
通过PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组DNA中扩增出编码信号肽除外的成熟SpaA蛋白基因spaA,将其克隆到表达载体pET32a的BamHⅠ和Hind Ⅲ位点上,构建重组表达质粒pET-spaA,转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达N端带有Trx标签的融合蛋白rSpaA,SDS-PAGE检测表达蛋白.DNA测序结果表明,spaA基因大小为1794 bp,编码由597个氨基酸残基组成的成...
【目的】克隆和表达二糖核苷类抗生素友菌素生物合成基因簇中的核苷转移酶基因amiE,并研究AmiE的体外催化功能。【方法】采用PCR 技术将编码257 个氨基酸的葡萄糖-1-磷酸核苷转移酶基因amiE 克隆到表达载体pET28a 上,构建质粒pCSG4001,转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3) 中诱导表达;利用亲和层析分离纯化蛋白AmiE,以葡萄糖-1-磷酸和胸腺嘧啶三磷酸(TTP) 或...
采用分子克隆技术构建睾丸酮丛毛单胞菌LysR基因表达载体,并通过与PAX1共转化 来 分析LysR基因对3αHSD/CR在E.coli HB101的表达调节。结果表明:酶切和DNA测序显 示,所 构建的表达质粒pKtac1LysR含有编码LysR的基因序列且稳定性较好;共转化结果显示,加入 重组质粒pKtac1LysR的3αHSD/CR的表达量显著高于加入pKtac1的3αHSD/C...
德国研究人员6月23日在英国《柳叶刀—传染病》期刊上报告说,本次德国肠出血性大肠杆菌疫情致病菌的菌株是10年前仅在德国现身过的一种大肠杆菌的克隆变种。这种病菌结合了肠出血性大肠杆菌和肠聚集性大肠杆菌的基因特性,因此具有更大危害性。
目的 克隆孢子丝菌未知过氧化氢酶基因,命名为Sscat基因。方法 根据生物信息库中7种已知真菌过氧化氢酶氨基酸序列的高度保守区域设计简并引物,PCR扩增获得部分Sscat基因cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其3’端和5’端未知序列。结果 Sscat基因cDNA序列全长1746 bp,其中包括5’端121 bp的非编码区、1500 bp的编码区和109 bp的3’端非编码区。该基因编码49...
用硫酸铵沉淀法从泡桐内生枯草芽孢杆菌JDB-1发酵液中粗提枯草菌素,采用纸片扩散法和琼脂糖扩散法分别检测枯草菌素对细菌和真菌的抑菌活性,采用PCR从菌株JDB-1基因组DNA中扩增出枯草菌素基因spaS,并克隆到pMD18-T载体,测定spaS基因的核苷酸序列.结果表明硫酸铵粗提的枯草菌素对大肠杆菌K12、恶臭假单胞杆菌AS1.1003、赤霉菌JSD-2、赤霉菌JSD-7和白色念珠菌ATCC101...
目的 构建可用于白念珠菌YPD1基因敲除的质粒。方法 克隆白念珠菌YPD1基因,构建YPD1载体质粒;通过酶切反应,将p5921中标记基因URA3插入载体质粒的YPD1中,形成同源重组质粒。结果 成功获得YPD1载体质粒pBluescript-YPD1和敲除质粒pBluescript-YPD1-URA3。结论 所获得的质粒pBluescript-YPD1-URA3可用于白念珠菌YPD1基因的同源重...
以禽多杀性巴氏杆菌国际标准株X-73基因组DNA为模板,采用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟外膜蛋白H的ompH基因,将ompH基因克隆至pMAL-p2X表达载体中,构建重组表达质粒pMAL-p2X-ompH,转化大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE电泳检测IPTG诱导后的表达蛋白.DNA测序结果表明ompH基因片段大小为1 002 bp,与已报道的ompH基因的核苷酸序列完全相同、而SDS-P...
目的 克隆、测序近平滑念珠菌ERG11基因的编码区序列并进行生物信息学分析。方法 运用生物信息学的方法 ,通过与白念珠菌ERG11基因碱基序列同源性比对,在近平滑念珠菌基因组(www.sanger.ac.uk/sequencing/Candida/pa-rapsilosis/)中寻找可能的ERG11基因序列(CpERG11),并据此序列设计引物,经PCR扩增近平滑念珠菌标准株(ATCC22019)...
摘要运用PCR方法克隆了大肠杆菌1-磷酸甘露醇脱氢酶(mtl-D)基因,序列分析表明与已发表序列相比,除第416位密码子由AAA代替CAT、相应的氨基酸由Lys代替His外,其他部分均相同。该基因插入植物双元载体中,经土壤农杆菌介导导入八里庄杨,经卡那霉素筛选后再经盐胁迫筛选获得一批较高耐盐性的转化植株,在附加0.6%NaCl的培养基中生长良好,而对照在附加0.4%NaCl的培养基中不能存活。对转...
摘要 灰色链霉菌(Streptornyees griseus) No.朽是链霉素产生菌,用于工业规模的链霉素生产,其启动子结构及基因表达的调控尚未揭示。本文报道了S. griseu‘启动子在大肠杆菌:(Escherichia coli)中的克隆和表达,证实了S. grise‘ 中也存在E. coli类型的启动子。我们已杯S. griseus DNA的Pst I, Bgl Ii酶切片段克隆到启动子探...
摘要单克隆C17细胞所分泌的抗炭疽保护性抗原的单克隆抗体,用固相放射免疫、放射性双扩散 及硝酸纤维膜印迹实验,鉴定为阳性,能与此抗原特异地结合。经Protein A-Sepharose CL -4B分离提纯此抗体,再用免抗鼠标准血清鉴定,其亚型为IgM。将此单克隆抗体偶联到Seph arose 4B上,将炭疽抗原过柱,然后把洗脱液进行电泳分析,证明C17分泌的抗体特异地针 对炭疽保护性抗原中分子量...
摘要用标记获救法克隆了整合状态的F′质粒的复制起点,证明了由这一复制起点构成的mini-F 质粒在不亲和性和对吖啶橙的敏感性方面和自主状态F′质粒都没有不同。对这一复制起点 和来自自主状态的F质粒的复制起点进行了亚克隆,并作限制性内切酶酶切分析比较,没有 发现两者在结构上有差异。本文的结果提示,F质粒和F′质粒在发动染色体复制中对recA基 因的依赖性的不同,可能与质粒整合在染色体上的位置不同有关...
摘要用DNA体外重组技术,以氧化硫硫杆菌(T.thiooxidans)染色体DNA的EcoRⅠ-HindⅢ片段取代 pBR322的相应片段,构建成一个重组质粒pSDR12,转化大肠杆菌C600受体菌株后,表现了较 强的抗四环素能力。表明了一个专性自养细菌的启动子功能片段在异养细菌中表达。

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