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脱氧核糖核酸（DNA）的制备
2007/12/28
摘要在实验生物学的研究中，DNA的制备已
成为一种常用的方法。根据实验材料和研究目
的不同，所用的制备方法也不同。本文主要介
绍质粒DNA和其它（动物组织、细菌）DNA
常用的制备方法。
水稻单核苷酸多态性及其应用现状
单核苷酸多态性 水稻 基因分型 遗传育种
2007/12/26
摘要单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）在水稻中数量多，分布密度高，遗传稳定性高。水稻SNPs的发现方法主要有对样本DNA的PCR产物直接测序、从SSR区段检测SNPs和从基因组序列直接搜索等。目前已有多种基因分型技术运用到了水稻SNPs检测，SNPs检测的高度自动化使水稻SNPs基因分型非常方便。单核苷酸多态性在水稻遗传图谱的构建、基因克隆...
盐酸表柔比星与核酸相互作用的共振瑞利散射光谱研究及其分析应用
共振瑞利散射 盐酸表柔比星 DN
2007/12/25
摘要 用共振瑞利散射光谱研究了盐酸表柔比星(EPI)与小牛胸腺DNA(ctDNA)、鲑鱼DNA(sDNA)、鲱鱼精DNA(hsDNA)和酵母RNA(yRNA)等核酸之间的相互作用. 实验表明在pH 2.0左右的酸性介质中, 表柔比星及核酸本身的共振瑞利散射(RRS)均十分微弱, 但是当它们相互作用形成结合产物时, 将导致RRS增强并出现新RRS光谱. 不同核酸与表柔比星结合产物的RRS 光谱特征略...
摘要 报道以2,4,6-三羟基苯乙酮(2,4,6-THAP)为基体用基体辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)测定核酸分子的研究。2,4,6-THAP解吸和电离DNA分子的效率很高,测定DNA分子d(T)~1~0的[M-H]^-分辨率可达1130.0,信噪比为366.0,检出限达5×10^-^1^4mol,可以测定相对分子质量高达14800以上混合碱基组成的DNA分子。为提高...
以核酸为作用靶的内源性活性物质的研究
腺嘌呤核苷 腺嘌呤核苷3'5'环化磷酸 异核苷 靶 寡核苷酸 内源 生物活性物质
2007/12/24
摘要 (Sp)-8-Cl-cAMP-辛酯通过调节细胞信号传导系统而抑制肿瘤细胞生长，其代谢产物8-Cl-腺苷也同样具有诱导分化和启动肿瘤细胞程序死亡的作用。从D(L)-木糖、D-葡萄糖和2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖出发合成了五种不同形式的异核苷，由异核苷组成的反义寡核苷酸能有效拮抗磷酸二酯酶的降解，它们对互补序列的杂交能力与异核苷的结构及磷酸二酯键的连接方式密切相关。
一种基于电洗脱的核酸纯化回收芯片的设计及优化
核酸 纯化 回收 数值模拟
2007/12/24
摘要 提出了一种基于电洗脱原理的核酸纯化回收芯片, 通过对芯片上电极进行适当的切换操作, 可一次完成核酸样品分离和纯化回收. 同时采用数值模拟的方法对纯化回收芯片管道的几何形状及电场分布进行了优化设计, 并进行了实验验证. 实验结果与模拟分析非常吻合, 证明优化设计达到了预期的效果.
脱氧核糖核酸一级序列特殊碱基组合及相关性研究
DNA一级序列 cg碱基 分子连接性指数 相似度比较
2007/12/24
摘要 在脱氧核糖核酸(DNA)一级序列中, 4种碱基可以有16种两两组合的方式(例如, ct, ag, cg, tc等), 不同的组合方式在DNA的该种序列中出现的次数也不一样, 其中, cg出现的频数甚少. 本文将cg所处位置及频率作为一种数学的量, 计算了各物种的分子连接性指数, 并以之为参数进行了物种间相似性分析. 在此基础上, 进一步对10种物种做了分组和归类.
双链RNA在基因沉默中的作用
基因沉默 双链RNA 小干涉RNA 甲基化
2007/12/24
摘要 介绍依赖于同源识别的基因沉默 .依赖于同源识别的基因沉默 ,是指向生物体内导入外源核酸时引起相应序列的内源基因的表达被特异性抑制的一种基因调控现象 .基因沉默分为转录基因沉默和转录后基因沉默 ,二者都通过双链RNA介导 .它们是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制 .这些机制具有巨大的应用前景 .
夏家店等古人骨DNA的提取、扩增及序列分析
古人骨DNA 提取 测序 同源性
2007/12/24
摘要 古DNA从距今 2 0 0 0～ 50 0 0年的古代人骨 (编号为 :M89,ⅢM11,ⅢM12和AM4 )中提取出来 ,利用聚合酶链式反应分别对线粒体DNA中MTND4 基因中 112 10～ 11414(2 0 5bp)以及RegionV中 8196～ 83 16(12 1bP)进行了扩增 ,并被测序 .实验结果表明古代人骨中仍存在有大量的遗传信息 ,通过提取、扩增可以得到真实可靠的序...
文库筛选与分子进化的核糖体展示新方法
核糖体展示 mRNA-核糖体-蛋白复合体 筛选 ScFv
2007/12/24
摘要 利用适当的文库筛选技术快速、简便地从DNA文库、随机肽库、抗体库或其它蛋白文库中筛选生物活性物质是目前分子生物学研究的一个热点.核糖体展示是一种完全离体进行的功能蛋白筛选和进化鉴定的新技术,避免了传统的活体筛选技术的缺陷,使得文库容量增大、分子多样性加强.本文系统地评述了核糖体展示技术在制备ScFv单链抗体方面的应用,包括ScFv单链抗体模板的构建、体外转录与体外翻译、亲和筛选及筛选效率的测...
豌豆核糖体小亚基蛋白S21的cDNA克隆、序列分析及在G2豌豆中的表达研究
豌豆cDNA文库 核糖体蛋白S21 序列分析 进化树
2007/12/24
摘要 以 G2豌豆幼苗为材料 ,构建了滴度为 6.5× 1 0 6 pfu的 c DNA文库 ,用同源序列筛选法从该文库中得到一个全长 4 65 bp的 c DNA。杂交分析认为它是一完整的 c DNA序列。DNA序列分析表明 ,它拥有一个 2 82 bp的开放读码框 ,编码 94个氨基酸。计算机同源序列比较发现 ,它可能编码豌豆核糖体小亚基蛋白 S2 1 ( RS2 1 - PEA) ,因为该序...
摘要 人与小鼠和牛在正常胚胎植入前发育过程中基因活化的研究已经取得了长足的进展 ,但是还没有对同期克隆胚胎相关研究的报道 .利用单个家兔植入前移核重构胚胎成功地构建了MⅡ卵母细胞及发育至 4 、8 细胞期的胚胎和囊胚的特异性cDNA文库 .并用 β肌动蛋白和LAPTM4α证实这类文库是可靠的 .以 8 细胞期移核重构胚cDNA文库为例 ,随机挑取克隆进行测序分析 :其中 2 3的基因EST片段...
衰老相关新基因CSIG的cDNA克隆和功能
细胞衰老 细胞衰老抑制基因(CSIG) 细胞转染
2007/12/24
摘要 为了获得 2BS细胞衰老过程中表达下降的差异基因片段Y6 2的编码序列 ,以cDNA末端快速扩增法获得细胞衰老相关新基因CSIG(cellularsenescenceinhibitedgene ,细胞衰老抑制基因 )的cDNA全长 .CSIGcDNA长 196 1bp ,编码 4 90个氨基酸 ,在多种重要组织中都有不同程度的表达 ;蛋白产物位于细胞核内特定位点 ,可能在核仁中聚集 .细胞转...
人血管生成素cDNA的克隆与表达
血管生成素 反转录-PCR 基因表达
2007/12/24
摘要 血管生成素 ( angiogenin,ANG)广泛存在于多种肿瘤组织中 ,在肿瘤发生的不同阶段刺激新生血管的形成 .利用 RT- PCR方法从培养的人肺癌细胞系 A549扩增得到了 ANG c DNA片段 ,测序正确后克隆入融合表达载体 p RSETB中 ,构建了原核表达菌株 .经 IPTG诱导 ,表达了 N端融合His6的 ANG融合蛋白 ,表达量占菌体总蛋白的 1 0 % ,纯化后的血管...
摘要 为了确知树鼩高重复顺序与灵长类动物的类α顺序有无相似处,我们再次把TSr(BglⅡ)-1片段克隆在质粒pWR33上,用“双链引物测序法”测得全部核苷酸顺序为353bp。并将此顺序与灵长类动物的类α顺序进行比较,发现其中有三个对应位置上与类α顺序的“冷点”保守区序列相似,其中还有一个有碱基变异的EcoRⅠ酶切点和四个潜在的HindⅢ酶切点,另外有两个与“凉点”区一致的小顺序,对这些相似性进行了...