搜索结果: 121-135 共查到“知识库 核酸生物化学”相关记录324条 . 查询时间(4.799 秒)
摘要 采用 PCR技术和 DNA测序技术 ,发现了我国一级珍稀保护动物中华鲟 ( Acipensersinensis)线粒体 DNA( mt DNA)的控制区 ( D- loop)存在数目不等的串联重复序列 ,该重复序列造成了中华鲟广泛的异质性现象 .从分子水平进行了不同类型重复序列变化规律的研究 ,同时还初探了重复序列在我国其它几种鲟鱼类的存在情况 ,发现在白鲟 ( Psephurus glad...
摘要 大部分已克隆的植物抗病基因都包含有核苷酸结合位点区 (NBS)和富含亮氨酸的重复序列区 (LRR) .利用来自节节麦的抗禾谷孢囊线虫基因Cre3位点NBS区保守序列设计特异引物 ,从含有来自易变山羊草的抗禾谷孢囊线虫基因的小麦品系E 10的基因组中PCR扩增得到一条约 5 30bp的单一条带 .将扩增条带克隆和序列分析发现 ,该克隆 (Rccn4 )的编码区长 5 2 8bp ,含一个不完整...
摘要 用改进的LiCl沉淀法和寡聚(dT)-纤维素亲和层析法由猪垂体制得总mRNA。在兔网织红细胞无细胞翻译体系中进行体外翻译的结果表明,制得的总mRNA具有一定的翻译活力。翻译产物与兔抗猪生长激素抗血清发生免疫沉淀,沉淀物占总翻译产物的10％左右。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明翻译产物有一条很深的带,分子量约为24,000道尔顿,与猪前生长激素的分子量相近。以制备的mRNA为模板反转录合成了...
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)cDNA的克隆、表达和活性测定
TRAIL 克隆 表达 诱导凋亡
2008/1/5
摘要 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)能选择性诱导肿瘤细胞凋亡 .为利用基因工程技术获得重组TRAIL蛋白可溶性片段 (sTRAIL) ,设计 1对引物 .利用PCR技术特异性扩增出sTRAIL的cDNA ,克隆于质粒pGEM 3Zf( )的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后克隆于表达质粒pBV2 2 0的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,转化大肠杆菌DH5α .转化菌株经温...
植物4.5SrRNA的分离纯化和序列分析研究
2008/1/5
摘要 植物4.5S rRNA是近年来发现的高等植物叶绿体核糖体上独立的小分子RNA成份,大约由80—106个核苷酸组成,不含稀有碱基。在蛋白质的生物合成中具有重要功能。 研究表明,不同来源的4.5 SrRNA序列有相当大的保守性,而且保守性的大小与植物种类的亲缘远近有直接关系。因此研究不同植物4.5SrRNA序列,对在分子水平上研究植物的演化与分类有指导意义。 我们以多种植物叶为材料,对其4.5...
摘要 取临床确诊为早老性痴呆 (Alzheimer’sdisease ,AD)患者的大脑组织 ,应用磁珠法直接提取mRNA ,电泳检测其质量 .经逆转录合成双链cDNA后 ,用碱性凝胶电泳检测其大小在 0 .2～ 9.0kb范围 ,主要集中在 1.0～ 2 .0kb之间 .层析除去多余的adaptors ,收集大于 4 0 0bp的cDNA片段 ,与载体pYESTrp2连接 ,经电转化后 ,得到克...
幼龄小白鼠全脑5SrRNA的全核苷酸序列测定
2008/1/5
摘要 5S rRNA是一种稳定的独立小分子,在原核和真核细胞中都牢固地结合在核糖体的大亚基上。它在蛋白质生物合成过程中具有重要作用。微生物、大鼠肝细胞及某些植物细胞5S rRNA的一级结构都已经测定,脑细胞5SrRNA的一级结构尚未见报道。因此,我们对幼龄小鼠全脑5S rRNA的序列进行了分析。我们用辜祥荣等人的方法分离和纯化5S rRNA,5S rRNA3′-末端标记参照Peattie的方法(...
抑瘤素McDNA的克隆及表达研究
抑瘤素M 逆转录-PCR技术 基因表达 活性测定
2008/1/5
摘要 抑瘤素M（onecostatinM，OSM）是一种多功能的细胞生长调节因子．从PMA刺激后的U937细胞系提取总RNA，采用逆转录-PCR方法分离到了抑瘤素M的cDNA；将抑瘤素M的cDNA克隆到质粒pUC19中，筛选三个阳性克隆进行序列分析，与国外报导序列完全一致；将抑癌素M的cDNA克隆到质粒pBV220后再转化DH5a进行模拟表达，SDS-PAGE分析表明有OSM表达，表达量约占细菌总...
摘要 克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,再设计引物进行 c DNA末端快速扩增(RACE技术 ) .采用 Northern印迹方法进行组织表达分析 .以高通量基因组序列 (HT...
用两步PCR法克隆全长cDNA
全长cDNA 差别表达产物 克隆 PCR
2008/1/4
摘要 采用两步 PCR法成功地克隆了一个全长的 c DNA.首先 ,用差式分析法克隆得到差别表达的 c DNA片段 ,再分别用这些片段内部的特异序列及 c DNA两端不同接头的序列为引物进行第一步 PCR扩增 ,得到差别 c DNA片段的上游和下游序列 .然后 ,根据第一步 PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步 PCR,从而得到全长的 c DNA.
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摘要 为构建含较多大片段的高质量的老年性白内障消减cDNA文库 ,利用生物素标记、磁珠分离的改良消减杂交法获得差异cDNA .利用选择性PCR法扩增其中大片段差异cDNA ,将其与T 载体进行T A连接并转化入大肠杆菌 ,成功构建老年性白内障消减cDNA文库 .共获得 4 0 0 0余个克隆 ,随机挑取的 2 2个克隆中 ,≥ 10 0 0bp的片段有 7个 ,占 31 8% ,≥ 75 0bp有...
摘要 本文给出了一个利用已知能量数据构成具有最小自由能的单链RNA分子二级结构的计算机算法,并给出了此算法的可行性证明和应用实例。
一种新发现的基因表达调控机制——核糖开关
代谢物结合mRNA 适体 核糖开关 基因表达调控
2008/1/4
摘要 最近发现 ,某些依赖代谢物调节的基因转录产物的 5′UTR存在特征性结构———核糖开关(riboswitch) .核糖开关可以特异性结合代谢物 ,通过构象变化 ,在转录或翻译水平上调节基因表达 .核糖开关广泛存在于G+ 及G-细菌的代谢相关基因中 ,在真菌、植物中也有发现 .核糖开关调节维生素、氨基酸、核苷酸等基础代谢过程 ,其调节基因表达不需要任何蛋白因子作为中介 ,在进化上可能是RNA世...
单核苷酸多态性的研究技术
单核苷酸多态性 研究技术
2008/1/4
本文在对人类基因组单核苷酸多态性(SNP)的概念做简要说明的基础上,系统地介绍14种检测分析SNP的技术和方法的原理、操作要点及其优缺点。