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大肠杆菌抗药性质粒R144drd3温度敏感突变型的分离1)
大肠杆菌
2008/1/15
温度敏感突变型可用于研究DNA复制的控制机制，也可用于测定质粒的拷贝数，还可作为遗传分析研究的工具。抗药性质粒R144drd3是去阻遏、抗卡那霉素、Ej-质粒，转移频率在10-3-10-1之间，是国内外实验室在分子遗传学研究中常用的抗药性质粒。
我们用整体诱变的方法，获得了抗药性质粒R144drd3温度敏感突变型。对其中一菌株进行温度敏感效应侧定，42℃ 表现温度敏感。进行温度敏感部位测定，结果...
利用大肠杆菌(Escherichia Coli）的白动子探针质粒pGA46-4，从谷氨酸棒状杆菌(Corynebacrerium glutainicum）染色体DNA中筛选启动功能片段，并测定了重组质粒pGA46-4上的一个约0.4kb的启动功能片段的核营酸顺序。利用pGA46-4和棒状杆菌质粒pXZ10145的EcoRI大片段组建了在大肠杆菌和力士棒杆菌(Corvnebacierium herc...
发根农杆菌转化龙胆再生植株的研究
发根农杆菌 龙胆再生植株
2008/1/15
本文利用具Ri质粒的发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)通过叶盘法对药用植物龙胆（Genriana manshurics Kitagaua）进行了转化实验，发根农杆菌15834感染龙胆，诱发产生毛状根，并得到再生的龙胆植株。冠瘦碱检测实验表明，再生植株显示甘露碱(mannopine)带，说明发根农杆菌Ri质粒的T-DNA部分已整合到龙胆植物细胞中。再生的龙胆丛生苗可以在不...
将带有三叶草根瘤菌寄主范围基因的豌豆根瘤菌（转移接合子182和290）接种白三叶草，观察比较它们对白三叶草早期侵染特征和结瘤情况。转移接合子182虽然诱导白三叶草很毛细胞弯曲，但未观察到侵染，也无侵染线形成；而转移接合子290能诱导白三叶草根毛形成紧密的弯曲，溶解根毛细胞壁和侵染白三叶草。结瘤试验表明，白三叶草接种转移接合子290所诱导的结瘤情况与接种三叶草根瘤菌野生型菌株ANU843的情况很相似...
亚硝基呱对苏芸金杆菌晶体和芽抱的影响1)
亚硝基呱
2008/1/15
苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis）作为高效、无公害农药用于防治农、林、果、蔬害虫取得了良好的效果[1]。近年来，为了提高苏芸金杆菌对昆虫的致病力，国内外不少学者研究了苏芸金杆菌的伴袍晶体与杀虫毒力的密切关系[2]，并通过自然筛选或遗传育种方法不断获得了新的变种和高毒效菌株[3,4,10,11]。我国1975 年从美国引进B. thuringiensis var. kurst...
利用一步基因中断法构建克鲁氏乳酸酵母leu2突变体
一步基因中断法 ＬＥＵ2基因 克鲁氏乳酸酵母 突变
2008/1/15
将克鲁氏乳酸酵母ＬＥＵ2基因编码区的部分序列用酿酒酵母的ＵＲＡ３基因替换，然后用此段转化两株克鲁氏乳酸酵母。通过体内同源重组，部分缺失的外源leu2片段取代下了酵母染色体上的正常的ＬＥＵ2基因，由此得到leu2转化子。经过这些转化子在非选择条件下的稳定性测定，没有发现回复子。结果表明，用一步基因中断法成功地建立了稳定的ＬＥＵ2基因突变体。这为在克鲁氏乳酸酵母中构建有效的宿主-载体系统提供了一个有用...
遗传学实验— 微生物实验
微生物实验
2008/1/14
原理所谓转导是指以噬菌体作为媒介将某一细胞（供体）的基因导入另一细胞（受体）的过程。转导可以分为两大类：(1)普遍性转导；(2）局限性转导。两者主要区别是： 前者可转导供体细胞的任意一个基因，后者只能转导供体细胞的某些特定基因。
酿酒酵母转座标签插入突变体263-H9中高盐胁迫基因的确定
酿酒酵母转座标签
2008/1/11
摘要 突变体263-H9是利用mTn3转座标签对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W303-1A诱变、筛选得到的。该突变体表现出对多种逆境胁迫(1.5 mol/L山梨醇高渗透压胁迫、0.65 mol/L NaCl高盐胁迫和15℃低温胁迫)敏感的表型特征, 而且与其他突变体不同其转座标签的插入位点是GIP2和YER053C-A的基因间隔区域。本文通过基因敲除、基因组文库功...
质粒在大肠杆菌和链霉菌和FR-008之间的属间接合转移
接合转移 质粒 链霉菌
2008/1/10
tIJ8154是由链枪菌一大肠杆菌双功能穿梭载体pGM160衍生而来的．本文报道这个质粒从携带RP4的大肠杆菌细胞中向革兰氏阳性细菌一链霉菌FR-008中的转移．从两种宿主中分别提取质粒DNA，进行琼脂糖凝胶电泳，发现pIJ8154的结构在两种亲缘关系甚远的宿主中均是稳定的，这种接合转移的方法已经成为向链霉菌FR-008中转移基因的一种手段
利用农杆菌系统将超甜定基因导入烟草
超甜定 烟草 农杆菌 转化
2008/1/9
由pUR528构建中间载体pEHT9,再构建超甜定植物表达载体pBIT7。通过直接转化法将pBIT7导入农杆菌,然后利用农杆菌系统转化烟草。经PCR、PC R-S outhern和Southern杂交证实,超甜定基因已整合到烟草基因组中。
鉴定痢疾杆菌毒力基因的SW480细胞模型构建Construction of SW480 Cell Model Identifying Shigella Virulent Genes
SW480 细胞模型 痢疾杆菌 信号标签诱变技术 构建
2008/1/8
摘要
信号标签诱变技术（STM）是一种在体内高通量筛选病原体毒力基因的新方法，在应用时的一个先决条件是要建立合适的体内筛选系统。为将该技术应用于福氏痢疾杆菌，我们使用三个福氏痢疾杆菌菌株进行了预试验：通过同源重组构建而成的带有氯霉素抗性且aroA和virG基因失活的突变株RC426；因在侵袭质粒上自发缺失3个基因座(ipaBCDA, invA 和 virG)的另一减毒突变株T32，其曾被用作福氏...