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共培养体系中高红色荧光蛋白(RFP)标记结肠癌细胞的检测技术
红色荧光蛋白(RFP) 共培养 细胞增殖 结肠癌
2014/10/30
提高mCherry红色荧光蛋白(red fluorescence protein,RFP)在结肠癌细胞中的表达,从而可以通过检测共培养体系中细胞的荧光值来分析结肠癌细胞的增殖,以利于结肠癌肿瘤微环境的研究。方法 用293FT细胞制备pBMN-mCherry病毒液。利用多次感染(1~4次)的方法提高RFP在结肠癌细胞系HT29、LoVo、SW620及HCT116中的表达,经流式细胞仪检测得到不同感...
Colo205来源的大肠癌始动细胞锌指蛋白表达谱变化分析
大肠癌始动细胞 锌指蛋白 基因差异表达分析
2014/9/1
分析大肠癌始动细胞群锌指蛋白表达谱变化信息。 方法 采用无血清悬浮培养结合CD133抗体标记磁珠分选获得Colo205来源大肠癌始动细胞,高通量测序分析180个锌指蛋白基因mRNA表达谱变化,并筛选差异表达基因,利用荧光定量PCR技术对部分差异表达基因进行表达变化验证。 结果 与CD133-细胞群相比,CD133+细胞群有56个锌指蛋白基因表达下调,42个锌...
2型糖尿病基础研究中的难题与突破
β-细胞质量 胰岛素抵抗 肥胖 2型糖尿病
2014/9/1
In recent years, tremendous progress has been made on beta cell dysfunction and insulin resistance, 2 fundamental pathological mechanisms of type 2 diabetes mellitus (T2DM). Reduced beta-cell mass ha...
探讨人硫酸酯酶-1(human sulfatase 1,hSulf-1)基因过表达是否提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性。方法:采用不同浓度AZD2281处理细胞,并筛选AZD2281处理的最佳浓度。将携hSulf-1基因的重组腺病毒Ad5-hSulf1感染MCF-7细胞,以Ad-hSulf1和AZD2281单独或联合处理MCF-7细胞,以Ad5-EGFP处理为对照。采...
平面力推拿揉法与腰椎间盘生物力学关系的有限元分析
推拿揉法 腰椎间盘 生物力学 有限元方法
2014/8/13
通过腰椎三维有限元建模方法,研究平面力推拿揉法对腰椎间盘生物力学的影响。 方法选取1例女性健康受试者,采用Somatom Sensation16型螺旋CT扫描机采集数据,进行精确三维分割与模型重建,生成正常人体L3~S1节段独立的三维实体模型,结合解剖知识构建肌肉实体模型后,采用专用生物力学软件建立L3~S1节段腰椎三维有限元,根据推拿揉法的作用规律,按循环旋转方向在L4和L5棘突的外部肌肉处施加...
HCV感染实验探讨人胎盘滋养层细胞分子生物性及侵袭力
分子生物学 金属蛋白酶2 金属蛋白酶9 体外实验
2014/7/11
探讨持续感染丙型肝炎病毒(HCV)对体外培养人胎盘合体滋养层细胞分子生物学性状及其金属蛋白酶(MMP)2、MMP9合成及分泌的影响。方法 分别采用Matrigel人工重建基底膜侵袭实验、MTT法细胞黏附实验、细胞移动实验,研究HCV RNA阳性患者血清感染的体外培养人胎盘滋养层细胞(感染组)侵袭能力以及侵袭相关的黏附、移动能力的改变;检测培养上清中人绒毛膜促性腺激素(HCG)浓度以评估感染对细...
基因家庭Pax7与Ubc9基因编码蛋白相互作用研究
Pax7 Ubc9 小泛素相关修饰蛋白(SUMO)
2014/10/29
了解Pax7的重要生物学功能,筛选并验证与其相互作用的Ubc9基因编码蛋白,并明确Pax7与小泛素相关修饰蛋白(SUMO)的关系,为进一步研究Pax7的作用机制奠定基础。方法 酵母双杂交系统筛选出与Pax7相互作用的基因Ubc9;GST-pull down方法验证Pax7与Ubc9在体外相互作用;Western blot方法检测Pax7的SUMO化状态;免疫共沉淀方法验证Pax7与SUMO的关系。...
乌灵菌粉对实验性动脉粥样硬化兔的抗氧化系统及炎症因子的影响
乌灵菌粉 兔动脉粥样硬化 抗氧化系统 炎症因子
2014/7/10
探讨乌灵菌粉对实验性动脉粥样硬化兔的抗氧化系统及炎症因子的影响。方法 建立兔的动脉粥样硬化模型,同时连续给予乌灵菌粉(100 mg·kg-1·d-1)12周,测定兔血浆中总胆固醇、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP),白介素6,肿瘤坏死因子含量及超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,...
探讨全反式维甲酸(all-transretinoic acid,ATRA)和钝顶螺旋藻藻蓝蛋白(C-phycocyanin,C-PC)联合用药对人宫颈癌HeLa细胞繁殖和凋亡的影响及其诱导细胞凋亡可能的分子机制。 方法: 实验分4组:对照组,C-PC组,ATRA组,C-PC+ATRA联合用药组。MTT法检测ATRA和C-PC单独及联合用药对HeLa细胞增殖的影响并计算它们的IC50,TUNEL法...
研究替罗非班对兔心肌缺血再灌注后无复流及血清缺氧诱导因子(HIF-1α)浓度、一氧化氮合成酶(NOS)活性的影响。方法 新西兰大白兔随机分为假手术组,缺血再灌注组和替罗非班组,观察兔心肌无复流,心肌缺血及梗死范围;测定术前、术后HIF-1α的浓度及缺血区心肌诱导型NOS(iNOS)和内皮型NOS(eNOS)的活性。结果 替罗非班组无复流范围及梗死范围小于再灌注组,差异有统计学意义(P<0.05);...
白细胞介素-27促进CIK细胞的增殖及其对淋巴瘤细胞的杀伤能力
细胞因子诱导的杀伤细胞 细胞增殖 杀伤能力 淋巴瘤 K562细胞
2014/4/28
初步探讨重组人白介素-27(interleukin-27, IL-27)体外对人外周血来源的细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞增殖及其对肿瘤细胞的杀伤能力的影响。 方法:无菌条件下分离健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),第0天加入IFN-γ、CD3单抗,之后根据加入不同细胞因子剂量...
长链非编码RNA H19促进人胃癌MGC-803细胞增殖的实验研究
H19 胃癌 细胞增殖 克隆形成
2014/11/6
探讨长链非编码RNA H19在胃癌组织及细胞株中的表达情况及其对人胃癌细胞增殖的影响。方法 采用实时定量PCR检测30例胃癌组织及其对应癌旁组织,以及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901和胃黏膜上皮正常GES-1细胞中H19的表达情况;分析胃癌组织H19表达与临床病理特征(年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期)的关系。将胃癌MGC-803细胞分别转染H19特异性小干扰R...
桦木酸抗炎作用与机制
抗炎 作用机制 信号通路 协同作用
2014/10/27
对桦木酸的抗炎作用与机制进行综述。方法 检索归纳有关桦木酸抗炎作用的文献,对其作用途径及机制进行了分析。结果 桦木酸对实验性炎症模型及其他模型有显著的抗炎作用,桦木酸抗炎作用机制涉及糖皮质激素受体、一氧化氮、氧化应激、免疫调节、细胞因子和黏附分子、炎性信号通路等。此外,桦木酸与其他天然产物还有协同的抗炎作用。结论 桦木酸通过多途径发挥抗炎作用,抗炎活性研究对于探讨桦木酸治疗疾病的作用机制有着重要意...
青藤碱对梗阻性黄疸大鼠急性肾损伤的保护作用
梗阻性黄疸 急性肾损伤 青藤碱 大鼠
2014/10/31
探讨青藤碱对梗阻性黄疸(OJ)大鼠急性肾损伤的保护作用及机制。 方法:将24只大鼠随机分均为假手术组、模型组与青藤碱干预组,后两组大鼠行胆总管结扎切断制作OJ模型。青藤碱干预组大鼠于术后第1天起给予青藤碱(80 mg/kg)灌胃,每天1次,而假手术组与模型组大鼠以同样方式给予等量生理盐水代替。术后第8天处死各组大鼠,取血检测血清尿素氮(SUN)、血清肌酐(Scr)含量,取肾组织行病理学检查,检测肾...