搜索结果: 151-165 共查到“理学 PCR”相关记录299条 . 查询时间(0.234 秒)
应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针
RD-PCR HIV DNA芯片
2008/1/5
摘要 利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质...
用两步PCR法克隆全长cDNA
全长cDNA 差别表达产物 克隆 PCR
2008/1/4
摘要 采用两步 PCR法成功地克隆了一个全长的 c DNA.首先 ,用差式分析法克隆得到差别表达的 c DNA片段 ,再分别用这些片段内部的特异序列及 c DNA两端不同接头的序列为引物进行第一步 PCR扩增 ,得到差别 c DNA片段的上游和下游序列 .然后 ,根据第一步 PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步 PCR,从而得到全长的 c DNA.
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摘要 为构建含较多大片段的高质量的老年性白内障消减cDNA文库 ,利用生物素标记、磁珠分离的改良消减杂交法获得差异cDNA .利用选择性PCR法扩增其中大片段差异cDNA ,将其与T 载体进行T A连接并转化入大肠杆菌 ,成功构建老年性白内障消减cDNA文库 .共获得 4 0 0 0余个克隆 ,随机挑取的 2 2个克隆中 ,≥ 10 0 0bp的片段有 7个 ,占 31 8% ,≥ 75 0bp有...
微量RNA的cDNA PCR文库的构建
PCR cDNAPCR文库 反转录反应
2008/1/4
使用PCR（polymerase chain reaction）技术，调制了mRNA的cDNAPCR文库，实验证明，cDNAPCR文库能使原cDNA的量放大数百倍。同时，使用人体K562培养细胞的总RNA，对cDNAPCR文库法和反转录中的β-Actin的cDNA量进行了比较，cDNAPCR文库法中的β-Actin的cDNA量大大高于反转录中的β-Actin的cDNA量。使用75pg的人体K562...
定量PCR的非同源对照模板的构建
竞争定量PCR 对照模板 异源双链
2008/1/4
建立了HCVRNA和hTERTmRNA的竞争定量PCR系统。对照模板的构建方法是：利用计算机辅助优选设计连接引物，低严紧型扩增大肠杆菌DNA，回收并克隆预期的DNA片段。该片段与靶序列除两端引物序列完全相同外，无同源性，因此可作为非同源对照模板。这种构建非同源对照模板的方法，简便易行，适应面广。
RAP-PCR技术及其应用
RAP-PCR 基因差异表达 基因克隆
2008/1/4
RAP-PCR是以PCR为基础构建RNA指纹图谱,研究基因差异表达的有效方法.所显示的种系特异性差异可用于对基因的遗传作图;所揭示的组织特异性差异可用于研究特异基因的表达.该法可检测各种情形下RNA群体间的差异.本文简介其基本原理及在基因差异表达研究领域的最新应用。
过量DMSO显著降低低模板浓度PCR扩增的特异性
DMSO PCR 特异性和效率
2008/1/4
DMSO通常经验性地用于提高PCR扩增的效率,但是过量的DMSO可以显著降低特异序列的扩增效率,尤其是导致非特异性扩增的现象却被忽视.在6%的DMSO存在时,开始出现非特异条带,同时特异扩增产物减少.本文首次报道DMSO对PCR产物特异性的影响并确定了克服上述现象产生的途径,即通过增加模板-引物的比例消除非特异条带.而通常提高复性温度只能部分减少非特异产物,不能避免非特异扩增.本文结果有助于提高常...
PCR扩增近交系大鼠微卫星位点DNA多态性的研究
近交系大鼠 微卫星 DNA多态性
2008/1/4
本实验选取大鼠7条染色体上的微卫星位点合成了10对引物,利用聚合酶链反应(PCR)扩增技术对国内北京和哈尔滨等4家单位提供的6个品系(SHR、SHRSP、LEW、RCS、WKY和F344)的8个近交系大鼠群体进行了DNA多态性分析的研究.结果表明:9个微卫星位点具有显著多态性;不同品系个体之间具有多态性;同一群体不同个体之间除SHR(哈)的SMST位点和WKY(哈)的AGT位点出现一定的差异外,其...
PCR扩增试验的动力学数学模型
数学模型 PCR动力学 定量PCR 动力学方程
2008/1/4
PCR技术已日趋成熟，但因为影响因素较多、反应过程比较复杂,直到目前PCR技术已创立近二十年，尚未能给出较好的描述PCR 反应的数学方法。我们根据它的基本原理提出了能够描述其反应过程的动力学方程：Wamp=［Ntarg×(1+P)n1+0.5×Cenz×U×P×Ceactiv×(n-n1)-Ntarg× (1+n×P)］×Cu×M，准确地描述了PCR反应的产物积累规律，建立了PCR反应的动力学数学...
PCR为基础的分子技术检测沃尔巴克氏体的研究进展
Wolbachia 共生细菌 分子检测技术
2008/1/3
沃尔巴克氏体（Wolbachia）是广泛分布于节肢动物生殖组织内的一类共生细菌。这些细菌通过卵的细胞质传播并参与多种调控其寄主生殖活动的机制。由于Wolbachia的重大科学意义和Wolbachia在生物防治和遗传工程领域的潜在用途，近年来迅速成为国际生物学研究的热点。其中，Wolbachia检测技术，尤其是以PCR为基础的分子检测技术的进步是Wolbachia研究蓬勃发展的重要技术基础。本文对W...
要根据已获得的辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA的部分序列，设计一条基因特异性引物,与通用引物并用，一步PCR成功地克隆了辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA 3′末端。与常规的3′RACE法相比，一步PCR法具有快速、简便、经济等优点，是一种非常快捷的扩增cDNA 3′末端序列的方法。
可直接克隆PCR产物的克隆载体的构建
PCR产物 克隆载体 pUC118 大肠杆菌JM109
2008/1/3
本文描述一种构建与PCR产物直接连接的克隆载体的方法。以高拷贝克隆载体pUC118为骨架载体，在pUC118质粒氨苄抗性基因的Eam1105 I 酶切位点上，以点突变的方式封闭Eam1105 I 酶切位点。经转化大肠杆菌JM109证实，该改造过的pUC118质粒，可使宿主细胞仍具有氨苄抗性。将一人工合成的具有两个Eam1105 I 酶切位点的互补寡聚核苷酸链（两端具有BamH I 接头）插入已封闭...
为研究D7S21基因座在河北汉族人群分布的多态性,应用MVR-PCR ( Minisatellite Variant Repeat-Polymerase Chain Reaction)方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对124名河北汉人无关个体D7S21基因座进行了快速检测，并进行数字编码。每一个体平均得到36个数字编码，未发现任何两个无关个体所有编码相同，两无关个体36个编码相同的概率为3.48...
采用PCR检测方法从饲料的主要原料豆粕、玉米蛋白粉中成功地检出启动子35S (35S-promoter,originated from cauliflower mosaic virus)、终止子NOS (nopaline synthase-terminator,derived from Agrobacterium tumefaciens)、耐除草剂基因EPSPS(5-enolpyruvylshik...