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采用PCR 技术克隆了玉米淀粉分支酶sbe2a基因的cDNA片段,将其克隆到pMD18T载体, 对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析, 并进行序列分析。结果表明:克隆片段长度为562 bp,将该基因的正义和反义片段插入到pCAMBIA1301改造过的载体p351301的35S启动子下游,构建高效RNAi表达载体,通过花粉管通道法将其导入玉米自交系“铁7922”,经过PCR检测获得了4株...
通过网上提供的生物信息学分析软件进行搜索和比对，初步筛选到3个较好的针对小鼠双尾-C（Bicc1）基因的RNA干扰（RNAi）序列。合成这三个干涉序列片段后克隆到pRS-Hush shRNA载体中。构建Bicc1基因的真核表达载体pEGFP-C3-Bicc1，将绿色荧光蛋白(GFP)标签标记在Bicc1蛋白上。利用细胞转染技术将pEGFP-C3-Bicc1与3个干涉序列载体共转染至体外培养的HEK...
RNAi及其在哺乳动物中的应用
应用 哺乳动物 RNAi
2008/5/30
RNA干扰(RNAi)是由特定双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默,广泛存在于真菌、植物和动物中,它是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在功能基因组的研究中有着广阔的应用前景。研究表明,断裂dsRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可抑制哺乳动物基因表达。从哺乳动物整体水平应用研究的角度,对RNAi的分子机制、生物学功能和特点,siRNA导入体内的方法以及应用等方面的研...
摘要RNAi是近两年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法。它通过导入一段与内源基因同源的双链RNA序列(dsRNA),使内源mRNA降解,从而达到阻抑基因表达的目的。目前已在线虫、果蝇、臭虫、真菌及植物等生物中建立RNAi技术,用于研究某些特定基因或已知基因在特定发育时期的功能。对于难于获得突变体的基因或生物体,RNAi技术尤其有效。虽然果蝇心脏发育基因wingless和tinman在果蝇心脏发育的...
摘要RNA干扰（RNA interference, RNAi）是指双链RNA（double-stranded RNA , dsRNA）分子导入细胞内后，促进与之同源的mRNA发生特异性的降解，从而高效并特异地阻断或抑制相应基因表达活性的现象。RNAi技术现已成为调控基因的表达，阐明细胞的信号通路和研究功能基因组学的有力工具，并迅速在临床医学上展现出基因药物的诱人前景。目前，人们已开始对RNAi技术...
RNA干涉（RNAi）技术应用于哺乳动物细胞的研究策略
RNA干扰 siRNA 基因功能分析 哺乳动物细胞
2008/2/1
摘要RNAi作为新近发展起来的基因功能分析技术，近年来在哺乳动物细胞中的研究已取得了长足进展，且有着广泛的应用前景。对RNAi作用机制及RNAi实验操作技术的探讨是目前研究的热点。研究表明，哺乳动物细胞中的RNAi作用模式与植物有所不同。文章对RNAi作用机制、哺乳动物细胞RNAi实验的一般策略（包括靶siRNA序列选择、siRNA获取方法、siRNA转染、RNAi效果检测等）以及最新研究进展进行...
花椰菜ACC氧化酶基因的克隆及其RNAi对内源基因表达的抑制作用
花椰菜 ACC氧化酶基因 RNAi 遗传转化
2008/1/29
摘要根据亲缘关系较近的几种作物ACC氧化酶氨基酸序列，设计一对简并引物，从花椰菜(Brassica oleracea Var.botrytis) 基因组中获得长1 202 bp的候选片段。序列分析表明该基因含有3个外显子（Exon）、2个内含子(Intron)，编码区序列长756 bp，编码252个氨基酸。同源性分析发现其与青花菜（Brassica oleracea Var.Italica）上已发...
JOURNAL OF RNAi AND Gene Silencing（图）
JOURNAL OF RNAi AND Gene Silencing RNA interference gene silencing gene targeting research 基因
2008/1/16
The Journal will publish high-quality peer-reviewed articles addressing the biology and application of RNA interference and gene silencing in all systems. The Journal aims at providing an efficient ro...
应用RNAi技术培育抗TMV病毒转基因烟草
RNAi 转基因烟草 TMV
2008/1/12
摘要利用烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白基因构建RNAi干涉载体, 通过叶盘法转化至烟草K326 和龙江911两个栽培品种。对转基因株系的荧光定量PCR分析表明, 不同转基因株系的病毒RNA靶序列都得到一定程度的降解, 抗病性鉴定结果证实, 转基因K326和龙江911两个栽培品种的转基因材料分别有83％和90％转基因株系对TMV呈现免疫级抗性。
双链RNA干涉技术(RNAi)在不同生物中应用的研究进展
双链RNA 基因干涉 基因功能
2008/1/3
双链RNA(double～stranded RNA dsRNA )干涉技术可通过降解靶基因的mRNA进行基因干涉，是研究多种生物基因功能的有效手段，目前已在拟南芥、秀丽新小杆线虫、黑腹果蝇、斑马鱼和小鼠等生物中应用，本文拟就其应用特点进行综述。
RNAi技术在转基因动物中的应用
RNAi 转基因小鼠 基因打靶 模式生物
2007/12/21
RNAi可以作为一种有效的工具用来产生转录后沉默的效果，从而抑制特定基因的表达，已经在线虫、果蝇、小鼠、大鼠等模式生物中得到成功应用。RNAi转基因小鼠的出现，使得在哺乳动物整体水平研究靶基因的敲低成为可能。文章以RNAi转基因小鼠为代表，就转基因载体的设计策略、基因敲除与基因敲低的比较、RNAi转基因动物的优势以及目前存在的缺陷等作一总结，并展望了RNAi转基因动物对功能基因组研究的贡献以及应用...
采用RNAi技术抑制PeroxiredoxinⅠ的表达
2007/12/20
Peroxiredoxin Ⅰ(PrxⅠ) is involved in many important cellular progresses such as cell proliferation and differentiation. To further elucidate its roles in ionizing radiation, eukaryotic expression vect...
摘要 P130Cas和paxillin分子是整合素家族下游重要的衔接分子 .为了探索这两个分子在肿瘤细胞抗失巢凋亡中的作用 ,应用RNAi技术分别抑制抗失巢凋亡的胃癌细胞BGC82 3中paxillin和p130cas基因的表达 ,观察它们对细胞失巢性生长的影响 .依据siRNA设计原则 ,分别设计针对p130cas和paxillin的两条序列 ;成功的构建了特异性封闭上述两分子的载体pWH1 p...
RNA干扰作用(RNAi)研究进展
RNA干扰作用 基因转录后沉默 干扰性小RNA RNA诱导的沉默复合体 反义药物
2007/12/19
摘要 RNA干扰作用 (RNAi)是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象 ,是基因转录后沉默作用 (PTGS)的重要机制之一 .RNAi主要通过dsRNA被核酸酶切割成 2 1～ 2 5nt的干扰性小RNA即siRNA ,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA分子而实现 .RNAi要有多种蛋白因子以及ATP参与 ,而且具有生物催化反应特征 .RNAi是新发现的一种通过dsRNA介导的特异...
用RNAi筛选Hedgehog基因
2007/10/9
用RNAi筛选Hedgehog基因
发布日期：[2003.4.4]
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出自：http://www.biosino.org
利用一种阻断特异RNA产生蛋白质的...