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运用链特异性RT-PCR法进行脊髓灰质炎灭活疫苗的灭活验证
脊髓灰质炎灭活疫苗 灭活验证 链特异性RT-PCR
2012/11/8
运用链特异性逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)建立了一种快速、灵敏、特异的脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)的灭活验证体系.以Sabin株脊髓灰质炎病毒悬液作为阳性对照,对脊髓灰质炎灭活疫苗进行检测.结果表明,链特异性RT-PCR法对具有活性的脊髓灰质炎病毒检测为阳性,而对脊髓灰质炎灭活疫苗的检测结果为阴性.链特异性RT-PCR法可作为一种简便、快速、灵敏的脊髓灰质炎灭活疫苗灭活验证方法,大大缩短了...
Genotyping of Polymorphisms in Alcohol and Aldehyde Dehydrogenase Genes by Direct Application of PCR-RFLP on Dried Blood without DNA Extraction
Genotyping Polymorphisms in Alcohol and Aldehyde Dehydrogenase Genes PCR-RFLP Dried Blood DNA Extraction
2010/9/20
We have developed a simple, labor-saving, inexpensive, and rapid single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping method that works directly on whole human blood. This single-tube genotyping method wa...
微卫星跨物种交叉PCR扩增的一个新问题：扩增非同源产物(英文）
微卫星 多态性 进化 非同源座位
2010/4/20
微卫星已被广泛应用于群体遗传学、生态学和进化生物学研究。然而，一些物种微卫星尚未克隆。为了节省时间和经费，研究人员往往使用一个物种已发表的微卫星引物扩增其近缘物种的微卫星。该研究对属于3个不同科(Clariidae、Heteropneustidae 和Pimelodidae)的7个鲶鱼物种的微卫星跨物种PCR扩增产物进行了序列分析，研究发现扩增非同源（non-orthologous）产物是微卫星跨...
珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立
珍稀濒危植物 大果木莲 基因组DNA ISSR-PCR反应体系
2009/12/2
［目的］ 建立高效稳定的大果木莲ISSRPCR 反应体系。［方法］ 以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料，在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上，通过ISSRPCR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验，优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的ISSRPCR反应体系和反应程序。［结果］ 试验建立的大果木莲的ISSRPCR反应体系为： 20.0 μl反应体系中含10×buffer 2.0 μ...
PCR检测转基因大豆
转基因大豆 定性检测 PCR
2009/10/28
［目的］定性检测转基因大豆。［方法］以非转基因大豆和CP4EPSPS转基因大豆为材料，以大豆内源基因Lectin和外源基因5莽草酸3磷酸合成酶基因（CP4EPSPS）为检测的目的片段，建立PCR反应体系。采用改进CTAB法提取大豆基因组DNA，并对所提DNA进行PCR扩增和电泳检测，确定转基因大豆的PCR检测限。［结果］改进CTAB法提取的大豆基因组DNA电泳条带清晰完整，转基因大豆和非...
寒兰基因组DNA ISSR-PCR反应条件的优化
寒兰 ISSR-PCR反应 遗传多样性
2009/10/28
以改良的CTAB法提取的寒兰（Cymbidium kanran Makino）基因组DNA为模板，通过单因子试验建立最适的寒兰的ISSRPCR反应体系。结果表明，适宜寒兰ISSRPCR反应体系的扩增条件为：25 μl PCR 反应体积中，1×PCR buffer，2.0 mmol/L MgCl2，300 ng 模板 DNA，200 μmol/L dNTP，1.40 U Taq DNA...
五节芒ISSR-PCR反应体系的优化
五节芒 基因组DNA ISSRPCR 优化
2009/10/28
［目的］保护五节芒的种质资源并为其开发利用奠定基础。［方法］以五节芒DNA为材料，分析DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶的含量以及退火温度对ISSRPCR扩增结果的影响。并通过单因子试验对ISSRPCR反应体系进行优化。［结果］建立了五节芒ISSRPCR的最佳体系：25 μl反应体系中10×PCR Buffer 2.5 μl、0.2 mmol/L 4×d...
运用PCR-RFLP方法研究三亚鹿回头岸礁造礁石珊瑚共生藻的组成
中国南海 造礁石珊瑚 共生藻 DNA多态性
2009/9/22
造礁石珊瑚共生藻的系统分类研究对于理解珊瑚礁生态系统对全球变化的响应具有十分重要的意义。本研究利用PCR技术扩增核糖体基因大亚基片段以及限制性片段长度多态性(RFLP)的方法, 对海南三亚鹿回头岸礁的8科14属22种造礁石珊瑚的共生藻组成进行了研究。结果表明鹿回头岸礁造礁石珊瑚共生藻以C系群为优势系群, 偶尔发现D系群与鹿角杯形珊瑚(Pocilolpora damicornis)和黄癣蜂巢珊瑚(F...
建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测传染性造血器官坏死病毒(IHNV)。选取IHNV病毒的N蛋白基因保守序列，利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针。以梯度稀释的含有IHNV目的扩增片段的质粒作为标准品，进行定量RT-PCR反应以确定检测灵敏度。病毒浓度在5×106 －5个拷贝，共7个数量级的范围内，定量RT-PCR反应有“S”型扩增曲线，检测灵敏度为5个拷贝。根据...
叶绿体PCR-SSCP标记发现华木莲两个截然不同的遗传类型
叶绿体基因组 遗传结构 PCR-SSCP 华木莲
2009/8/4
华木莲Sinomanglietia glauca是一种珍贵稀有的保护树种。该树种于上个世纪90年代在江西宜春发现, 近年来在湖南永顺发现两个群体。因为新居群的发现和前人研究所采用的分子标记不稳定, 本文用叶绿体PCR-SSCP标记对华木莲遗传结构进行了重新分析。结果表明, 江西群体和湖南群体表现为两种截然不同的叶绿体遗传类型, 地区内没有遗传变异。我们推测这种遗传结构可能是华木莲在第四纪冰期遭受强...
苦苣苔科大叶石上莲CYC类基因RT-PCR表达模式研究
CYCLOIDEA基因 表达模式 花对称性 苦苣苔科 大叶石上莲
2009/7/17
CYC 类基因的分子系统学研究已经在苦苣苔科Gesneriaceae中展开, 但是还缺乏对这些基因表达和功能的研究。因此, 我们选择苦苣苔科大叶石上莲Oreocharis benthamii作为实验材料, 分离出了CYC类基因的两个拷贝, 经过分子系统学分析这两个基因分别属于苦苣苔科GCYC1和GCYC2两个分支, 故命名为ObCYC1和ObCYC2。分区的RT-PCR实验结果显示这两个基因拥有不...
用PCR-SSP方法检测中国恒河猴Mamu-DRB*W101和Mamu-DRB*W201基因
PCR-SSP 恒河猴 MHC II Mamu-DRB*W101 Mamu-DRB*W201
2009/6/19
利用序列特异引物聚合酶链反应（polymerase chain reactionsequence-specific primers，PCR-SSP）方法扩增中国恒河猴的主要组织相容性复合体II类基因Mamu-DRB*W101、- DRB*W201，初步了解中国恒河猴中Mamu-DRB*W101、- DRB*W201基因的阳性率。采集中国恒河猴静脉血，用DNA提取试剂盒提取全血DNA，分别用Mamu...
本文采用免培养的16S rDNA梯度凝胶电泳技术(DGGE)对集约化海水网箱养殖川纹笛鲷Lutjanus sebae及圆
白鲳Ephipp orbis消化道壁优势菌群结构进行了比较分析。研究结果显示川纹笛鲷及圆白鲳消化道壁存在着大量
细菌群落，对DGGE指纹图谱聚类分析表明两种鱼肠道壁及胃壁菌群组成相似度高于50％ ，其中二者肠道壁细菌
组成相似性最高(67％)，这些可能与两种鱼养殖在同一水...
作者进行了较广泛的样品采集，通过实验分离纯化培养得到多个鞘藻目种类的株系，并采用PCR技术新获得
鞘藻目2属8个种类的部分28S rDNA序列，连同GenBank中的另两条序列，分析的物种涵盖了鞘藻目中的每个属。
通过比较分析绿藻纲中包括此1O条序列的共36个种类的同一基因序列，并选取Trebouxiophyeeae中的椭圆小球藻
(Chlorella ellipsoiden)和 0c pe...