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构建包含RAc1 基因cDNA 片段的质粒, 作为水稻肌动蛋白基因RAc1 之mRNA 定量检测的标准品,建立检测方法, 为水稻其他基因的定量建立内参。从水稻叶总RNA 中逆转录扩增总cDNA, PCR 扩增RAc1基因中设计的目的片段, 将纯化的目的片段与pMD19-T Simple 载体进行连接, 转化宿主菌JM-109 , 提取重组质粒DNA, PCR 鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260...
南瓜属植物RAPD-PCR反应体系的建立与应用
南瓜属 RAPD-PCR 混合DNA样品池 聚类分析
2009/3/17
采用混合DNA样品池,利用正交法对南瓜属植物RAPD反应条件进行了探讨,并利用建立起来的优化体系,从35条引物中筛选出7条引物,对供试中国南瓜、印度南瓜和黑籽南瓜3个栽培种的7个品种进行了RAPD分析,结果均获得了较多的多态性位点.RAPD-PCR反应扩增结果还显示,日本南瓜兼有中国南瓜和印度南瓜的特征带,聚类分析的结果则表明,它与中国南瓜的亲缘关系更近.
利用SDS-PAGE 分析、PCR 扩增和序列测定与分析研究了长发带芒草(Taeniatherumcrinitum) 的高分子量谷蛋白亚基及其基因。结果显示, 长发带芒草中发现的高分子量谷蛋白亚基与普通小麦中的类似, 但迁移率存在较大差异。其中, x 型亚基均比Dx2 亚基迁移率小或接近, y 型亚基均比Dx12 亚基迁移率更快。本研究结果揭示了带芒草属具有与普通小麦类似的高分子量谷蛋白亚基, 这...
湖泊沉积物中DNA提取与PCR扩增
湖泊沉积物 微囊藻 DNA提取 PCR扩增
2009/1/20
对湖泊沉积物中保存的生物大分子—DNA进行研究分析，以探讨湖泊生态系统随环境改变而演变的过程。根据前人对土壤和海洋沉积物DNA的提取方法，针对湖泊沉积物的特点进行改进，在此基础上对太湖梅梁湾湖泊沉积岩芯进行DNA提取和扩增。结果表明：不同深度湖泊沉积物均能获得DNA，且纯度较高，OD260/ OD280均大于1.4、OD260/ OD230大于1.1，可直接用于PCR（polymerase cha...
植物转基因成分PCR检测内对照系统的建立
rbcL基因 内对照 PCR检测 转基因成分
2009/1/12
为了建立适用于多种植物的转基因成分PCR检测的内对照系统，本文针对植物叶绿体DNA rbcL基因的保守区域，设计了一对扩增片段为433bp的PCR引物，通过对23种植物的PCR扩增表明，该引物不但在4种单子叶植物(大米、玉米、小麦、洋葱)、10种原始花被亚纲的双子叶植物(甘蓝、白菜、大豆、豇豆、花生、胡萝卜、芹菜、菠菜、大麻、棉花)及7种合瓣花亚纲的双子叶植物(圣女果、番茄、辣椒、马铃薯、南瓜、黄...
金银花ISSR-PCR反应体系的建立与优化
金银花 ISSR 反应体系 优化
2009/1/6
以金银花叶片基因组DNA为模板，通过单因素试验，研究了退火温度、Taq DNA 聚合酶的用量及模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度等6种因素对ISSR－PCR扩增的影响，建立了适合于金银花ISSR-PCR反应体系和扩增程序，即在20 μL反应体系中，内含1×PCR反应缓冲液（Mg2＋free）、1.5 U Taq DNA 聚合酶、0.15 mmol·L-1 dNTPs、0.4 μmol·L-...
Synthesis and Cloning of a Small Bacillus Pheromone Gene (ComXRO-B-2) by Primer-Dimer Formation with PCR
Bacillus mojavensis RO-B-2 ComX pheromone gene TA cloning primer-dimer PCR
2010/4/16
ComX pheromone is the major extracellular signaling peptide stimulating transformation in response to high cell density in Bacillus species. In this study, Bacillus mojavensis ComX(RO-B-2) pheromone g...
本文给出了一个计算奇异方程组Ｒ（Ａｋ））的新的高度并行算法．通过该算法可以在时间步内，用ｐ＝２ｎ（ｎ－１）台处理机得到方程组的解ｘ＝Ａｄｂ．
PCR基因体外扩增仪
基因 体外扩增仪 计算机控制 生物学仪器
2008/11/13
聚合酶链式反应(Polymersae Chain Reaction，简称PCR)。PCR基因体外扩增仪是模拟PCR反应过程，完成这种反应的自动化仪器。采用水浴加热与机械臂的工作方式，所有的操作(包括控温与机械动作)均由单片微机控制完成，形成了可靠性高和集成度高的二个技术特点。该仪器在分子生物学、医学、生物工程、法医学、考古学等许多领域具有广泛的使用价值。合作方式：开发国内外市场。
PCR产物末端性质的分析研究
PCR产物末端 UT-PCR Taq DNA聚合酶 Pwo DNA聚合酶
2008/10/15
利用PCR、UT-PCR、克隆及测序等技术，对强直性肌营养不良基因（MT-PK）3′-非翻译区分别用Taq，Taq＋Pwo DNA聚合酶进行了扩增、克隆和测序，研究了PCR产物末端组成情况，并比较了上述两种DNA聚合酶对PCR产物末端的影响.结果在用Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物主要得到3′端突出1个A（占67.3％，35/52）；在Taq＋Pwo DNA聚合酶扩增的PCR产物末端中得到3′...
差异显示反转录PCR技术研究进展
mRNA 差异显示 聚合酶链反应
2008/9/27
分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异，已成为分子生物学研究领域的热点之一.近年来，用于识别差异表达基因的方法已发展起来多种.DDRT-PCR是近年来较为广泛应用的一种技术.理论上，DDRT-PCR技术比较简单，但实施起来却存在着假阳性率高，凝胶中单条cDNA带成分不均一, 所获cDNA仅代表着mRNA 3′UT区(约300 bp)以及一些低拷贝数mRNA不能有效被呈现等问题.对DDRT-P...
分子信标探针用于PCR检测对虾白斑杆状病毒
对虾白斑杆状病毒 PCR 分子信标探针
2008/9/4
将对虾白斑杆状病毒的一段特异性DNA设计成分子信标探针，用于该病毒的PCR检测.温度与荧光强度之间的关系表明，所设计探针的发夹既可以形成也可以打开，符合PCR对分子信标探针的要求.结果表明，在PCR同时加入分子信标探针不影响PCR扩增，分子信标探针只能与目的DNA杂交，具有较高的特异性.随着PCR循环数的增加以及含目的DNA的质粒拷贝数的增加，荧光强度都随之增强.
定量RT-PCR中人干细胞因子的RNA-CRS的构建
基因表达定量 定量RT-PCR 人干细胞因子基因
2008/9/3
一种适用于定量RT-PCR、用ExonucleaseⅢ部分酶切剔除技术，构建人干细胞因子(hSCF)基因的RNA竞争性参考标准(RNA-CRS)的新方法：用RT-PCR技术，从HepG2细胞中扩增出全长人hSCF cDNA，并克隆入质粒pGEM-T获重组的pGEMSCF载体，经ExonucleaseⅢ和S1核酸酶适当处理，以导致hSCF cDNA中一小片段缺失，由此获得重组pGEMSCF...
亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一.利用巨型引物PCR定点诱变方法，设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物，在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段，即巨型引物，将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯化后，作为3′和5′的两端引物应用于第二轮PCR反应中.通过改变标准PCR反应条件，调整引物与模板的浓度，扩增出特异性较强的目的DNA条带.PCR产物经回...
对3′-RACE方法进行了修改，采用一条特异性引物和一条通用Oligo dT引物成功地克隆了东亚钳蝎BmKIT3 3′cDNA末端，与常规3′-RACE方法相比，两步PCR方法具有节约成本、节省时间、增加反应特异性等优点，尤其适用于生物活性肽基因的快速克隆和鉴定.