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对黄孢原毛平革菌孢子悬浮液进行了紫外和微波诱变,并将筛选出的优势菌PU-69和PM-57与未经诱变的菌作对比实验.结果显示紫外诱变的PU-69,Lip酶活力提高了1.29倍,Mnp1.27倍,Lac1.31倍.微波诱变的PM-57,Lip酶活力提高了1.34倍,Mnp1.33倍,Lac1.3倍.微波诱变菌株的产酶能力略高于紫外诱变,其操作也更为简单.
RNA结合蛋白是基因表达的重要调节因子.RNA-蛋白质印迹（Northwestern blot）是近年来国外建立的筛选这类因子的重要方法之一.应用这一方法从肝细胞株HepG2 cDNA文库中成功筛选到乙型肝炎病毒表面抗原转录后调节片段互相作用蛋白表达克隆.结果显示：该蛋白与探针结合特异性强，经三轮筛选后，100%克隆为阳性克隆；PCR和EcoRⅠ酶切初步鉴定, 编码该蛋白的cDNA长约1 kb. ...
从噬菌体文库中筛选与表皮生长因子结合的多肽(英)
噬菌体展示 多肽 表皮生长因子 药物靶分子
2008/9/26
与许多疾病相关的血管生成作用是由一些血管生成因子介导的，其中就包括表皮生长因子.在肿瘤生长、关节炎等疾病中，表皮生长因子参与了其中的血管生成作用，拮抗表皮生长因子介导的血管生成就有可能对与其相关的疾病起到治疗作用，因此，表皮生长因子的拮抗剂可能具有重要的临床价值.拮抗表皮生长因子的作用可以通过许多途径，其中之一就是找到能与表皮生长因子结合并能干预其与受体结合的分子，因而表皮生长因子可作为药物靶分子...
从人白细胞cDNA文库筛选凋亡素相互作用蛋白
凋亡素 酵母双杂交 ABP280 免疫共沉淀
2008/9/26
来源于鸡贫血病毒的小分子蛋白-凋亡素(apoptin)能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡，为研究其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制，利用酵母双杂交系统筛选从人白细胞cDNA文库筛选apoptin相互作用蛋白，核酸序列分析及同源性检索表明，其中一个与ABP280（actin-binding protein 280）有高度同源性.细胞免疫共沉淀实验结果显示：在哺乳动物细胞水平仍能够检测到apoptin与ABP...
基于复杂生物体系的噬菌体随机肽库筛选
噬菌体显示 随机肽库 生物淘筛 体内生物淘筛
2008/7/24
近年来，噬菌体肽库生物淘筛方法又取得了新的进展，出现了以活细胞、病毒及组织器官等复杂生物体系，代替纯化的抗原、抗体或受体分子等作为筛选靶标的方法，并取得了较好的应用效果. 其中，以肿瘤组织筛选噬菌体肽库获得的短肽能选择性富集于肿瘤组织，在肿瘤靶向性治疗中具有潜在的应用前景.
筛选差异表达基因和蛋白质的方法进展
筛选 差异表达基因 差异表达蛋白质
2008/7/2
分离和鉴定差异表达基因和蛋白质不仅有助于发现基因和蛋白质的功能,更有助于揭示某些疾病的发生机理.目前筛选差异表达基因的方法主要有差异显示PCR方法(differential display RT-PCR,DDRT-PCR)、消减杂交法(subtractive hybridization,SH)、基因芯片技术(DNA chip technique)和基因表达的系统分析(serial anal...
随机十肽库的构建及血管形成素结合肽的筛选
噬菌体表面呈现 随机短肽库 血管形成素
2008/6/29
将合成的含有随机序列（NNK）10的寡核苷酸片段，克隆入噬菌体呈现载体噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ，NotⅠ位点，即cpⅢ蛋白信号肽与成熟肽之间，电转化E.coli TG1，构建了噬菌体表面呈现的十肽库，实际库容为3.53×107，插入率为66.7%.经辅助噬菌体M13KO7超感染后，获得滴度为4.8 ×1011 pfu/ml的噬菌体上清.经过两轮panning筛选和富集，从构建的随...
紫杉属植物南方红豆杉和东北红豆杉化学成分的研究与活性筛选
化学成分 东北红豆杉 南方红豆杉 紫杉属植物
2008/6/19
该项课题对南方红豆杉和东北红豆杉的化学成分进行了研究，共得到78个单体化合物，已鉴定67个，其中15个为世界上首次发现。对南方红豆杉的种子进行化学成分研究，分离得到29个化合物，21个为首次从该植物中分离得到。对东北红豆杉的心材进行化学成分研究，分离得到23个化合物，目前鉴定了其中的13个化合物。从针叶中分离并鉴定了26个紫杉烷类化合物，其中12个为首次从该植物中分离得到。该课题丰富了紫杉烷类抗...
用改进的DDRT-PCR技术进行人胚差异基因筛选
人胚胎 发育 mRNA差异显示 PCR
2008/6/12
介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速高效mRNA差异显示技术，其特点是利用Ready-To-Go RT-PCR反应珠和Ready-To-Go RAPD分析珠进行mRNA差异显示分析，使取样步骤降至最低程度，减少了潜在的取样误差和外源DNA污染，并确保每次反应的高度重复性.通过银染测序胶分析差异显示的cDNA带,便于DNA回收和进一步克隆.用此方法分析人胚发育早期不同阶段...
用一个简单快速的RT-PCR技术筛选白细胞介素-6作用相关基因
白细胞介素-6 差异表达基因 骨髓瘤细胞
2008/6/11
为了研究白细胞介素-6(IL-6)作用相关基因以及一些可能受IL-6调控的基因，利用一个简单快速的以PCR为基础的方案，检测了IL-6处理和未处理的Sko007细胞中基因表达的差异，克隆并鉴定了差异表达基因的cDNA片段.首先用6-mer寡核苷酸引物进行反转录从而最大限度地将mRNA编码区序列生成cDNA；然后用2或3个较长的随机引物进行PCR扩增，并以不同引物组合重复PCR增扩；扩增产物在2%琼...
结合基因功能分类体系Gene Ontology筛选聚类特征基因
聚类特征基因 分类体系 基因功能
2008/5/21
使用两套基因表达谱数据，按各基因的表达值方差，选择表达变异基因对样本聚类，发现一般使用方差较大的前10%的基因作为特征基因，就可以较好地对疾病样本聚类；对不同的疾病，包含聚类信息的特征基因有不同的分布特点。在此基础上，我们提出结合基因功能分类体系Gene Ontology，进一步筛选聚类特征基因的方法。通过检验在Gene Ontology(GO)中的每个功能类中的表达变异基因是否非随机地聚集，寻找...
一种基于特征筛选的原核生物启动子判别分析方法
原核生物(Prokaryote) 启动子识别(Promoter identification) 复合模式(Composite motif) 特征筛选(feature selection) 二次判别分析(Quadratic discriminant analysis) 刀切法(Jackknife method)
2008/5/14
启动子识别是研究基因转录调控的重要环节，但目前方法的识别正确率偏低。在深入分析原核启动子特征的基础上，提出了一种基于特征筛选的原核启动子判别分析方法，首先在启动子序列的组成特征、信号特征和结构特征中选取备选特征，为每个特征建立适当的描述模型，并对主要的保守模式采用复合模式模型；再通过模型计算对备选特征进行逐步筛选，优化特征集，将序列表示为组合特征向量；最终利用二次判别分析实现识别。对大肠杆菌和枯草...
高产人参寡糖素培养细胞变异克隆系的筛选
人参 寡糖素 变异克隆系 过氧化物酶同工酶
2008/3/17
用2mmol/L的MNNG处理经过滤的人参悬浮培养细胞1小时后，细胞存活率下降显著，细胞克隆植板率只是对照组的10.12%。经细胞平板克隆共获得克隆系151株，其中很多克隆系在转移培养中生长缓慢，甚至不生长而死亡。经分析可供测定的克隆系生长和寡糖素含量的差异，对11株寡糖素含量较高克隆系经连续10代继代培养观察，选出一株稳定高产人参寡糖素优良克隆系PGMB－37，其平均生长速率是0.558gDWL...
紫茎泽兰根际土壤中优势细菌的筛选鉴定及拮抗性能评价。
斑马鱼VEGF基因的siRNA表达载体构建、有效序列筛选及其对基因表达的干预性研究
RNA干扰(RNA interference) 斑马鱼(Zebrafish) 血管生成(Vascular development) 血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor)
2008/3/5
为探索小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）表达质粒在研究斑马鱼血管内皮生长因子（vascu1ar endothelial growth factor, VEGF）基因调控网络中的应用，构建了4个以斑马鱼VEGF基因为靶点的siRNA表达载体pS1-VEGF、pS2-VEGF、pS3-VEGF及pS4-VEGF。通过显微注射的方法将载体导入1-2细胞期斑马鱼体内，...