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小麦品种梭条花叶病抗性基因遗传分析及分子标记筛选
小麦 梭条花叶病 遗传 SSR
2008/1/29
摘要选用3个抗梭条花叶病的小麦品种 “仪宁小麦”、“徐87-633”和“西风”为抗病亲本、以感病品种“镇9523”为感病亲本配制了三个杂交组合，对四个亲本及其杂种后代（F1及F2代）单株的田间抗病鉴定表明，三个抗病亲本的抗性均由核基因控制，为显性遗传方式。“仪宁小麦”和“西风”的抗性受两对表现互补效应的显性基因控制；“徐87-633”的抗性受一对显性基因控制。选取涉及小麦21条染色体上的266对S...
摘要以抗白粉病品系"百农3217×Mardler" BC5F4为材料,构建了白粉病菌诱导的普通cDNA文库和抑制消减杂交(SSH) cDNA文库.分别对两文库进行了一定规模的测序,获得普通cDNA文库不重复ESTs 387条和SSH cDNA文库ESTs 760条.将获得的ESTs与GenBank序列进行了BLASTn、BLASTx同源性分析.结果表明:在普通文库中,一些参与光合作用与核糖体构成等...
应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因
结核分枝杆菌 体内诱导抗原技术 药物靶标 毒力
2008/1/26
摘要为寻找新型抗结核药物靶标，采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库，库容量为1.02×105CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清，通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库，共获得16个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析，发现该16个阳性克隆可能包含22个开放阅读框（ORF）。按照功能将其分为7类基因：脂类...
摘要利用抗黄矮病小麦-中间偃麦草易位系HW642的细胞核DNA构建了一个可转化人工染色体(transformation-competent artificial chromosome,TAC)文库,文库由2.3×106克隆构成,重组率为90.48%,平均插入片段大小为22kb左右,约覆盖普通小麦单倍体基因组2.5倍,在该文库中分离得到单拷贝DNA序列的几率约是95.77%.文库保存在24块96孔板...
人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选
人类胚胎干细胞（hESC） 抑制消减杂交 差异表达基因 未分化状态
2008/1/26
摘要 人类胚胎干细胞（Human Embryonic Stem Cell，hESC）在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一，已有的LIF通路、Oct-4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制，采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆（Differentiated hESC，dhESC），应用抑制消减杂交（S...
XNP基因内多态基因座筛选及其多态性分析
X连锁核蛋白基因 短串联重复序列 遗传多态 Hardy-Weinberg平衡
2008/1/26
摘要从XNP基因内部筛选多态性较强的多态基因座,为连锁分析和间接诊断奠定基础通过核酸同源性分析获得含有XNP基因的基因组克隆,并通过对比分析cDNA与基因组DNA的对应关系确定基因的非外显子序列,利用BCMSearch Launcher程序从中筛选短串联重复序列。采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对所筛选出的短串联重复序列进行多态性分析。结果从XNP基因内筛选出5个短串联重复序列。多态性...
勒氏笛鲷微卫星位点的筛选及特征分析
微卫星 勒氏笛鲷 PCR
2008/1/26
摘要采用PCR法快速筛选勒氏笛鲷(Lutjanus russelli)基因组文库, 以获得(CA)n微卫星位点。勒氏笛鲷基因组DNA经限制性内切酶HaeⅢ+ DraⅠ双酶切后, 连接T-载体克隆, 构建基因组文库。以通用引物M13+/-与重复序列引物(CA)15对基因组文库进行筛选, 二次筛选后得到121个可能含有微卫星位点的阳性克隆。进行序列测定, 共获得53个CA(n≥7)重复序列, 重复次数...
人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核
CEPH YAC库 PCR筛选体系 荧光原位杂交 FISH
2008/1/23
为了在知道某个区域、位点、基因或DNA片段的部分信息后,能从CEPH YA C库中筛选出与其对应的YAC克隆,为进一步研究奠定基础,需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后,用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作, 证明了这一体系的可用性,同时提出了以后筛选的途径, 即首先筛选YAC库的Mega YAC部分,并以5块板为一组进行筛选。另外,运用荧光原位杂交技术(FISH)...
利用细胞工程技术筛选小麦抗病新种质的研究
细胞工程技术 抗病突变株 抗病新种质
2008/1/23
在利用细胞工程技术筛选小麦抗根腐病和赤霉病突变体研究工作的基础上, 将已获得的突变株继续进行多年多点的抗病鉴定,对突变株后代的抗病性进行测定,并对农艺性状作详细的观察。结果表明,抗病突变株不论是同一年份在不同鉴定点上, 还是在同一鉴定点上多年重复鉴定,都表现有较强的抗根腐病菌和赤霉病菌侵染的能力,突变株的抗病性不因代数的增加而发生变化。已从中选出4个对根腐病和赤霉病抗性强而稳定、农艺性状亦较好的新...
摘要高效地筛选标记,是复合区间作图方法定位QTLs的基础。筛选出的主效标记和互作标记,除了用作控制背景遗传效应外,在定位具有上位性效应的QTLs时,还将用于构筑两维搜索区间。因而,标记筛选的效率将直接影响QTL定位的功效和精度。通过对不同方法筛选标记的效率进行模拟研究,发现回归方法明显优于随机效应预测方法,同归方法中又以前向选择法简单有效。普通遗传力和基因型×环境互作遗传力的增加都能提高标记筛选效...
Frankia 基因文库的构建及与根瘤菌结瘤基因区同源克隆的筛选
Frankia 基因文库 结瘤基因
2008/1/21
摘要应用无色肽酶(Achromopeptidase)加溶菌酶系统破壁，提取分别来自色赤杨、细技术麻黄和 沙棘的3株代表性Frankia菌株的总DNA。以可在很多革兰氏阴性细菌中稳定复制和诱动转移 的广谱寄主性质粒pLAFR1为载体，构建了其基因组文库。基于经EcoRI酶切后的Frankia总DN A中有与根瘤菌结瘤基因同源性的片段，以豌豆根瘤菌结瘤基因为探针，通过菌落原位杂交 对文库进行了筛选，较...
用酵母双杂交系统筛选与痢疾杆菌侵袭素IpaC相互作用的蛋白
痢疾杆菌 酵母双杂交系统 IpaC 胶原酶
2008/1/21
摘要
利用酵母双杂交技术筛选与IpaC相互作用的真核细胞蛋白。首先将IpaC全长基因克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中，然后以构建的pGBKT-IpaC为靶蛋白质粒，筛选人HeLa细胞cDNA文库。在2×106个克隆中得到22个阳性克隆。其中2个阳性克隆编码人胶原酶蛋白片段。并且进一步证明与胶原酶片段相互作用的IpaC结构域在62aa～170aa之间。从而提示IpaC可能在胶原酶参与的生物学过程...
筛选代表小鼠植入前胚胎紧密化相关基因的ESTIdentification of ESTs of Genes Related to Compaction in Preimplantation Embryos of Mouse
植入前 紧密化 抑制消减杂交 差异表达 小鼠
2008/1/10
摘要
分别收集181及241枚昆明白小鼠8细胞早期胚胎及8细胞紧密化胚胎，采用SMART PCR方法直接合成胚胎双链cDNA。进而运用抑制消减杂交技术（SSH）对8细胞早期胚胎及8细胞紧密化胚胎的基因表达进行研究，并将所获得的差异表达产物按片段大小分段分离纯化后克隆入pUCm-T载体中，经PCR鉴定后挑选阳性克隆进行测序，筛选出27个代表8细胞早期胚胎和紧密化8细胞胚胎差别表达基因的cDNA片段...
枸杞耐盐变异体的筛选及植株再生
枸杞 愈伤组织 耐盐变异体 再生植株
2008/1/10
枸杞(Lycium barbarum L.)无菌苗下胚轴于MS+2,4-D 0.25mg/L+LH 50 0mg/L的诱导培养基上产生胚性愈伤组织。经0.34%的EMS(半致死剂量)处理并恢复增殖2周后, 将存活组织转接到含有1.5%NaCl的诱导培养基上培养4周,再将少数存活的组织转移到含1.0%NaCl的同样培养基上继续培养,经不断选择,选出了耐1.0%NaCl的愈伤组织变异体。经耐盐性、耐盐...