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人Mn-SOD cDNA的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的表达人锰超氧化物歧化酶巴斯德毕赤酵母分泌表达 2007/12/10

以人肝细胞株(k02)总RNA为模板，用RT-PCR扩增出人锰超氧化物歧化酶(hMn—SOD)cDNA，将其插入含有AOX1基因启动子和a分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9k，构建重组质粒pPIC9k—MnSOD，转化毕赤酵母GS115，筛选出整合了多拷贝hMn—SOD基因的Mut 表型菌株，摇瓶培养，0．5％甲醇诱导表达。SDS—PAGE分析显示，诱导4d的培养上清中hMn—SOD 的表...