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人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选
人类胚胎干细胞（hESC） 抑制消减杂交 差异表达基因 未分化状态
2008/1/26
摘要 人类胚胎干细胞（Human Embryonic Stem Cell，hESC）在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一，已有的LIF通路、Oct-4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制，采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆（Differentiated hESC，dhESC），应用抑制消减杂交（S...
人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核
CEPH YAC库 PCR筛选体系 荧光原位杂交 FISH
2008/1/23
为了在知道某个区域、位点、基因或DNA片段的部分信息后,能从CEPH YA C库中筛选出与其对应的YAC克隆,为进一步研究奠定基础,需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后,用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作, 证明了这一体系的可用性,同时提出了以后筛选的途径, 即首先筛选YAC库的Mega YAC部分,并以5块板为一组进行筛选。另外,运用荧光原位杂交技术(FISH)...
中国海南岛人恶性疟原虫基因文库的构建及环子孢子蛋白基因的筛选
人恶性疟原虫 基因文库 环子孢子蛋白基因
2008/1/5
摘要 本文介绍了以噬菌体λEMBL3为载体的中国海南岛人恶性疟原虫FCC1/HN分离株基因文库的构建。所得重组体的数目为3.3×10~4pfu,其相当于构建完整基因库理论计算值的6倍。作者以人工合成的巴西株恶性疟环子孢子蛋白基因重复序列区的24-mer寡核苷酸ATGCAAACCCAAATGCAAACCCA)作探针,进行噬斑原位杂交,筛得三株阳性克隆。对其一重组体进行酶谱分析和Southern印迹实...
应用三元递减法筛选特异性心脏生长相关基因
心脏生长相关基因 递减杂交 心脏发育
2008/1/3
摘要 心脏是由胚胎干细胞特异性分化而来的 ,但其分化的分子生物学机制尚不十分了解 .为建立一种新的筛选特异性心脏相关基因的方法 ,克隆特异性心脏生长相关基因 .从胚胎心、成年心和去胎心的胚胎中提取 m RNA,建立胎心 /成年心和胎心 /胎身两个递减性 c DNA文库 ,通过 DNA芯片和微阵列杂交筛选和克隆 ,建立了三元递减克隆的新方法 .获得了一个全长为 1 0 0 6 bp可编码1 94个氨...
摘要
此文介绍了一种非同位素简单快速的反向Northern 筛选方法。采用非同位素法标记探针，操作简便，不涉及污染环境。在杂交过程中采用三次校正，结果可靠，重复性好。该方法能有效地，高通量地验证差异表达基因。Abstract: In this paper, a simple, rapid and safe method of Reverse Northern was introduced. A...