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人可溶性gp190在酵母Pichia pastoris中的表达
毕赤酵母 白血病抑制因子受体 可溶性受体 分泌表达
2008/1/29
摘要 人可溶性gp190（sgp190）是白血病抑制因子（LIF）的可溶性受体，可能在LIF行使众多生物学功能中扮演着重要的角色。为获得这一蛋白以研究它在人体内的生物学活性，在酵母Pichia pastoris中实现了重组sgp190分泌表达。利用基因重组技术，将编码人可溶性gp190（LIF受体α亚基gp190胞外区）cDNA克隆到毕赤酵母Pichia pastoris分泌表达载体pPIC9K...
猪IFNα基因在毕赤酵母中的高效分泌表达High Level Secretion Expression of PoIFNαin Pichia pastoris
猪IFNα 巴斯德毕赤酵母 基因重组 分泌表达
2008/1/10
摘要
巴斯德毕赤酵母载体质粒pPICZαA含有强启动子PAOX1和α-MF信号肽序列,构建猪IFNα基因的重组质粒pPICZαA-IFNα，并转入E.coli JM109中，得到转猪IFNα基因工程菌，经酶切鉴定克隆到载体pPICZαA上的外源基因即为猪IFNα基因。通过电击将经SacⅠ酶切后线性化的pPICZαA-IFNα质粒转化到巴斯德毕赤酵母KM71中。SDS-PAGE和Western b...
摘要 前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白 ,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关 ,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景 .从前列腺癌组织提取总RNA ,利用RT PCR技术获得PSMA基因的全长序列 ,构建了重组酵母表达载体pPIC3.5K PSMA .电击法转化Pichiapastoris酵母 ,通过表型筛选和PCR鉴定证实该基因已稳定整合入Pichia...
在甲醇酵母Pichia pastoris胞内表达有活性的辣根过氧化物酶
辣根过氧化物酶 毕赤酵母 基因表达
2007/12/19
摘要 为了开辟在甲醇酵母 Pichia pastoris中表达 HRP的新途径 ,将编码成熟 HRP同功酶 C基因克隆到表达载体 p PIK3.5K中 .p PIK3.5KHRP转化 GS1 1 5后 ,用 PCR筛选阳性 P.pastoris重组株 ,并用甲醇进行诱导 . Western印迹杂交分析表明目标蛋白 (约为 38k D)能被天然 HRP的多克隆抗体所识别 ,因此活性辣根过氧化物酶已在...