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在Sf9昆虫细胞-杆状病毒系统中表达毒蕈碱型M2及M5受体重组突变体
昆虫细胞 杆状病毒 基因克隆 基因表达
2012/5/21
为乙酰胆碱毒蕈碱(M)受体亚型特异性的变构调节剂及基因工程的研究提供实验平台。方法 用PCR及搭桥PCR法对乙酰胆碱M2及M5受体作以下突变：① 将N-糖基化位点Asp突变为Asn；② 删除对蛋白酶敏感的M受体的第三个细胞内环；③ 在C端添加凝血酶识别位点（CMV）和6-His标记。将PCR扩增出重组嵌合蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体，制备重组杆状病毒并感染昆虫细胞表达M2/M5受体蛋白。We...