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一个推测的拟南芥漆酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达。
考察了不同搅拌转速、pH值和温度条件下,细胞生长、g-CGT酶产量与培养液中直链麦芽低聚糖积累的关系. 细胞的最大比生长速率为0.2 h-1是g-CGT酶产量从增长到下降的拐点. 发酵液中直链麦芽低聚糖的存在能促进细胞生长并引起胞内的FDP, ATP和G6P含量增加,而对产酶显示出分解代谢阻遏效应. 指数流加结果显示,通过限制细胞的比生长速率,可将阻遏作用控制在较低水平,酶产量得到了大幅度提高,是...
Candida sp.脂肪酶的纯化及其性质     脂肪酶  纯化  层析       2009/11/16
采用简单的两步法-离子交换层析和疏水层析法,对Candida sp. 99-125脂肪酶进行了纯化,比活提高了10.0倍,达到27200 U/mg,回收率为35.5%. SDS-PAGE电泳分析显示该酶的分子量约为38 kDa. 酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为40℃,最适反应pH值为8.5,在室温下具有良好的稳定性. 钙离子和Tween80能够促进提高脂肪酶的活性,而铁离子、铜离子和SDS对...
在摇瓶和4 L发酵罐上研究了营养和环境条件对重组菌E. coli M15 (pQTPL)分批发酵生产酪氨酸酚裂解酶(TPL)的影响. 在培养基中添加20 g/L葡萄糖和1.0 g/L玉米浆使TPL酶活提高到63.1 U/g(干重). 在此基础上,维持发酵液中溶氧水平为30%,可使菌体浓度在8 h达到4.78 g/L,酶活为54.6 U/g,比对照组(不控制溶氧)分别提高了21%和31.6%. 采用...
对Kitasatospora sp. MY 5-36中e-聚赖氨酸降解酶(PLD酶)进行了纯化和酶学性质研究. 通过DEAE-Sepharose, Source 15Q, Mono Q三步阴离子交换层析从细胞中得到纯酶,收率达40.7%,纯化倍数为500倍. 经SDS-PAGE电泳、凝胶过滤层析检测PLD酶由2个同聚亚基组成,亚基和全酶相对分子量分别为43.6和87.0 kDa. PLD酶的最适反...
实现了戊二酰基-7-氨基头孢烷酸(GL-7ACA)酰化酶的组成型表达,并通过替换重组质粒启动子的RBS序列,在摇瓶培养条件下,使新构建的重组质粒pGEMKT-HPRfACY在大肠杆菌JM105中表达GL-7ACA酰化酶酶活达到0.44 U/mL,是替换前的2倍. 使用廉价的玉米浆作为培养基中氮源主要来源,使JM105/pGEMKT-HPRfACY菌株酶活提高到2.98 U/mL. 采用补料批式培养...
大孔载体固定化脂肪酶     大孔载体  脂肪酶  固定化酶       2009/11/12
用自制大孔载体固定化脂肪酶,对固定化条件进行了优化,比较了固定化酶与游离酶的酶学参数. 结果表明,酶粉与载体质量比为1:1、固定化温度在20~25℃之间、固定化时间1.5 h的条件下,所得固定化酶的酶活最高. 固定化酶的最适pH为8.5,最适温度为40℃,其热稳定性、操作稳定性都比游离酶高,4℃下保存7 d后,酶活仍剩余94%.
应用双层平板牛津杯法对绿色木霉A10产生的纤维酶的水解产物抑制作用进行了初步研究,得出了透明圈直径和抑制浓度关系的数学模型,实验结果表明甘油,葡萄糖和纤维二糖的最低抑制浓度分别为3.35,2.57和1.81mmol/L;其抑制系数分别为2.64,4.00和6.70。
利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对四环素生产菌-金霉素链霉菌的酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶进行了测定。实验结果表明:(1)电泳条件不同对测定结果造成不同影响;(2)4个供试菌株的过氧化物酶同工酶说基本相同均有4条酶带,不能将各菌株区分开;(3)4个试菌株的酯酶同工酶谱不完全相同。
酶法转化谷氨酰胺     谷氨酰胺合成酶  ATP  正交实验       2009/11/10
高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌经酶解和超声波处理后,释放出高活性的谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,简称GS). GS的胞外催化反应受各种反应条件和因素的影响. 通过单因子实验、响应面实验和正交实验发现,反应混合物中最显著的影响是腺三膦(ATP),当ATP浓度在40~50 mmol/L时,催化作用达到最高;同时酶量对反应也有较大的影响. 研究了粗酶液在细胞外反应时各种因素对谷氨...
采用实验设计法研究了碳源、氮源和磷源等因素对桔青霉(Penicillium citrinum)M02发酵产核酸酶P1的影响. 实验结果表明,含有玉米浆的复合氮源可以明显地提高核酸酶P1的产量. 同时通过两轮实验建立了一个可以较好预测实际发酵的二次模型,并依据此模型优化了碳源、氮源以及磷源的组成,优化后的产核酸酶P1的发酵培养基组成为(g/L):葡萄糖38.73,蛋白胨1.91,玉米浆1.84, K...
研究了添加甲萘醌对嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)IFO9862合成过氧化氢酶(CAT)的影响. 结果表明,添加甲萘醌有助于促进CAT的合成. 在发酵的24或48 h分别添加1 mmol/L的甲萘醌,发酵终了CAT酶活比对照分别提高了11.0%和23.1%;而在发酵的36和48 h各添加1 mmol/L的甲萘醌,CAT酶活可提高32.5%. 在发酵0 h添加88 mmo...
研究了添加羟胺对Streptomyces hygroscopicus合成谷氨酰胺转胺酶的影响. 结果表明,添加羟胺可诱导谷氨酰胺转胺酶的合成. 摇瓶培养过程中,羟胺的最适添加量和最适添加时间分别为0.5 mmol/L和38 h,发酵结束时,谷氨酰胺转胺酶酶活最高达到5.3 U/mL,比对照提高了32.5%. 添加羟胺可诱导Streptomyces hygroscopicus产酶,羟胺与谷氨酰胺转胺...
比较了几种初步纯化超氧化物歧化酶(SOD)的方法,并进行了优化组合,研究了用软基质阴离子交换柱和凝胶柱分离纯化SOD的工艺条件,利用建立的方法纯化了来自牛血的超氧化物歧化酶,整个工艺过程总活性回收率为65%,比活为5429U/mg,纯化倍数提高至61倍。
研究了一株青霉菌P6 (Penicillium sp. P6)液体发酵产生木素过氧化物酶的工艺条件,考察了青霉菌P6在天然培养基稻米糠、玉米糠、麦糠和合成培养基GMY中的产酶情况,结果表明,麦糠是较理想的底物. 通过单因素方法研究了添加苯甲醇和MnSO4对酶活的影响;采用正交实验对MnSO4添加量、麦糠含量和培养基pH进行了研究,在实验范围内最佳酶活达到了2.69 U/mL. 进一步通过单双因素回...

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