搜索结果: 1-15 共查到“知识库 农学 RT-PCR”相关记录114条 . 查询时间(0.034 秒)
为了明确引起杏衰退萎黄病的病毒种类，利用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）高通量测序技术，结合生物信息寻找杏衰退萎黄样品中的病毒序列，发现存在亚洲李属病毒1（Asian prunus virus 1，APV1）和亚洲李属病毒3（Asian prunus virus 3，APV3）。为了验证该结果，采用RT-PCR对10个待测杏样品进行APV1、APV2和APV3...
根据文献报道和GenBank 已登录序列设计引物建立了马铃薯Y 病毒（potato virus Y，PVY）实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系，相关系数R2 为0.991 2，可特异性检测PVY，灵敏度达常规RT-PCR 的1 000 倍，重复性好。利用建立的检测方法对山东省、青海省、贵州省、黑龙江省和河北省5 个地区马铃薯植株中的PVY 进行...
为了明确近期新西兰报道的侵染猕猴桃的新病毒——猕猴桃病毒1（Actinidia virus 1，AcV-1）在四川地区猕猴桃上的发生情况及其分子特性，采用RT-PCR对来自四川6个地区疑似感染病毒的90份猕猴桃主栽品种‘红阳’和‘金果’的叶片样品进行检测。结果表明，22份样品为AcV-1阳性，检出率为24.4%。将获得的5个AcV-1分离物和已报道的新西兰分离物K75的外壳蛋白（coat prot...
葡萄蚕豆萎蔫病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法及应用
葡萄 葡萄蚕豆萎蔫病毒 实时荧光定量RT-PCR RT-PCR
2020/2/10
建立了葡萄蚕豆萎蔫病毒（Grapevine fabavirus，GFabV）的实时荧光定量RT-PCR（RT-qPCR）检测技术。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系（扩增效率103.8%，相关系数0.998），灵敏度是常规RT-PCR的1 000倍，并具有特异性。采用RT-qPCR和常规RT-PCR方法对葡萄不同发育时期及不同部位的316个样品进行检测，结果表明RT-qPCR方法对G...
为了明确引起茄子斑驳紫花病的病毒种类，利用小干扰RNA（siRNA）高通量测序技术，结合生物信息学方法寻找茄子样本中的病毒序列，发现存在烟草轻型绿花叶病毒（Tobacco mild green mosaic virus，TMGMV）和番茄斑驳花叶病毒（Tomato mottle mosaic virus，ToMMV）。为了验证该结果，对待测样品中TMGMV和ToMMV的外壳蛋白（coat prot...
‘阳光玫瑰’葡萄病毒小RNA测序鉴定及RT-PCR检测
阳光玫瑰 小RNA测序 葡萄病毒 RT-PCR
2019/12/25
‘阳光玫瑰’是我国从日本引进的葡萄优良品种。为了明确我国‘阳光玫瑰’葡萄病毒病的病原,本研究采用小RNA测序技术对2株显症和无症状的‘阳光玫瑰’葡萄样品进行病毒鉴定结果显示:显症样品中测定到8种病毒,其中包含葡萄蚕豆萎蔫病毒(Grapevine fabavirus, GFabV)和灰比诺葡萄病毒(Grapevine Pinot gris virus, GPGV);无症状样品中测定到3种葡萄病毒。对...
葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用
葡萄 葡萄病毒A 检测 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
2018/12/24
根据文献报道和GenBank已登录序列设计引物建立了葡萄病毒A（Grapevine virus A，GVA）SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好线性关系，扩增效率为99.2%，决定系数为0.999，可特异性检测GVA，灵敏度高（达常规RT-PCR的100倍），重复性好。对不同季节、不同品种以及不同部位葡萄样品（嫩叶、嫩叶柄、老叶...
本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒（BCoV）的RT-PCR方法，并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物，通过反应条件和体系优化，建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示：所建方法特异性和重复性好，灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1；该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果，优于比较的两种以BCoV ...
应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B
葡萄 葡萄病毒B 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
2019/11/18
本研究建立了葡萄病毒B的 SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测技术。该技术标准曲线扩增效率102.4%,相关系数0.999,最低检测限达10-4倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍。重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00%~0.65%和0.02%~2.00%,表明检测稳定性好。该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条...
根据辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici Leonian）与致病疫霉菌（Phytophthora infestans）及其他8种常见土传病害病原菌Actin基因序列差异，设计并筛选出辣椒疫霉菌的特异性引物YM2F/YM2R，建立辣椒疫霉菌的实时荧光定量PCR检测体系，并利用该体系定量检测人工模拟带菌样品及田间发病土壤样品中的辣椒疫霉菌。试验结果表明，利用该引物建立的实时荧光定量PC...
3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及应用
Sweet potato virus multiplex RT-PCR Sweet potato feathery mottle virus Sweet potato latent virus Sweet potato virus 2
2020/2/12
To effectively monitor the occurrence of major sweet potato viruses, the multiplex RT-PCR assay was established for detection of Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV), Sweet potato latent virus (...
猪丁型冠状病毒（PDCoV）与猪流行性腹泻病毒（PEDV）均为致病性冠状病毒，可以引起猪呕吐、腹泻脱水和新生仔猪死亡。为了建立一种快速检测PDCoV和PEDV的双重SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法，根据GenBank登录的2种病毒基因的保守序列，设计了两对特异性引物，分别扩增其N、M基因保守区，并将其克隆至pMD19-T载体；将10倍梯度稀释的混合重组质粒作为标准品模板，建立了一种...
选用柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）和柑橘衰退病毒（Citrus
tristeza virus，CTV）两种病毒外壳蛋白保守序列及内参基因Ubiquitin 的特异性引物，优化影响二重RT-PCR
反应的Mg2+浓度、dNTPs 浓度、引物浓度和退火温度，建立了针对两种病毒的一步法二重RT-PCR 检测
体系。二重RT-PCR...
柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析
柑橘黄化脉明病毒 RACE 全长cDNA 长链RT-PCR
2018/5/21
为了建立柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）基因组长链RT-PCR扩增体系，构建其全长cDNA克隆，为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础。根据GenBank中CYVCV基因组序列和5′ RACE扩增结果设计引物。以感染CYVCV的代代酸橙（Citrus aurantium ‘Daidai’）植株总RNA为模板进行长链RT-P...