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PRRSV感染仔猪肾组织的超微病理变化分析
猪繁殖与呼吸综合征病毒 肾 超微结构 电镜
2021/5/8
猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是能引起仔猪高死亡率的疾病，给养猪业带来极大的经济损失。本研究对PRRSV感染仔猪肾组织的病毒定位及产生的超微病理变化进行观察，以期了解PRRSV对肾组织细胞以及血液循环的影响。主要采用透射电镜技术结合血清生化检测、免疫组织化学染色（IHC），对仔猪感染PRRSV后肾组织进行超微病理学观察及分析。结果发现，PRRSV感染后引起肾组织损伤，病毒主要分布于肾小球、坏...
基于网络药理学和分子对接分析苦参碱抗PRRSV的作用机制
苦参碱 网络药理学 抗炎 靶点
2021/3/30
本研究旨在利用网络药理学及分子对接技术从抗炎角度探讨苦参碱抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用机制。利用PharmMapper服务器和Genecards疾病数据库获得苦参碱发挥抗炎作用的潜在靶点；使用STRING在线分析平台结合Cytoscape软件构建靶蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络并进行拓扑学分析筛选关键靶点；利用DAVID数据库对靶...
为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）VR2332弱毒株经滴鼻和注射两种途径接种仔猪的病毒血症、抗PRRSV抗体以及抗PRRSV中和抗体的差异，选取20日龄健康仔猪9头，随机分3组，即滴鼻组、注射组和对照组。在感染后第0、3、7、11、15、19、23、27、31、35、39、43天前腔静脉采血，于第43天采血后摘取猪的脾、颌下淋巴结、腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结，并无菌收集猪肺泡巨噬细胞（PA...
利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞，建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆，并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术，将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组，获得表达骨架，重组后的表达载体在...
Restriction fragment length polymorphism of ORF6 and ORF7 genes of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) vaccine strains registered in the CzechRepublic
RT-PCR RFLP PRRSV ORF6 and ORF7 vaccine
2015/3/5
Restriction fragment length polymorphism (RFLP) of open reading frames 6 and 7 was applied to comparative genetic analysis of live attenuated vaccine strains (Amervac-PRRS/A3, Porcilis PRRS, Ingelvac ...
在细胞水平探讨新型脱氧核酶（ASON-Bulge-DNAzyme）对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的抑制效果。针对PRRSV JX株M基因设计了2个新型的脱氧核酶，经RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光试验（IFA）对新型脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对M基因M-1新型脱氧核酶表现良好的抑制效果，其抑制效果高达82.7%，M-2新型脱氧核酶抑制效率最高可达到83....
基于甲病毒复制子的PRRSV DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
甲病毒复制子 PRRSV 小鼠 免疫应答
2014/1/8
本研究旨在构建含PRRSV FZ06A株GP3、GP5、M蛋白修饰后基因的复制子疫苗pSCA-Km5、pSCA-VPm3、pSCA-VPm5、pSCA-VP6和pSCA-V56，研究其特异性表达目的蛋白的能力和在小鼠体内诱导免疫应答的能力。将构建的复制子质粒和空载体以100 μg·只－1的剂量免疫小鼠，免疫3次，监测血清中特异性抗体和中和抗体水平及淋巴细胞经特异性抗原刺激后的增殖情况和释放IFN-...
本研究旨在通过慢病毒载体系统将猪源CD163转染入永生化的猪肺泡巨噬细胞（PAM）系(CRL-2843)，建立稳定表达CD163的PAM细胞系（PAM-CD163）及验证该细胞系对PRRSV的易感性。用PCR方法从pJET1.2-CD163载体上扩增CD163基因编码区，通过酶切连接构建慢病毒表达载体pTrip-CMV-CD163-IRES-pur。将该质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2....
本试验旨在构建以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟双价基因工程亚单位疫苗候选株。利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5蛋白和猪瘟病毒（CSFV）E2蛋白的重组杆状病毒BacSCDualORF5E2。该重组病毒带有His6标签，且胞质区域（CTD）和跨膜区域（TM）均来源于杆状病毒囊膜蛋白gp64的CTD和TM。对重组病毒进行Western...
本文旨在研究饲粮添加L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamyl glutamate，NCG)对感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)妊娠母猪繁殖性能及免疫功能的影响。选用3~5胎感染PRRSV的母猪（长白×大约克）60头，随机分为3组，每组20头，单栏饲养。试验猪妊娠第30~90天分别...
CSFV和PRRSV二联RT-PCR检测方法的建立
猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 二联RT－PCR
2011/8/18
参照GenBank中猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)基因保守序列,设计2对特异引物,通过对最佳反应条件的优化,建立了CSFV和PRRSV的二联RT－PCR检测方法,该方法可同时扩增得到2条与试验设计相符的443 bp(CSFV)和246 bp(PRRSV)特异性条带。应用该二联RT－PCR方法检测猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV...
靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定
PRRSV 核蛋白N siRNA 表达载体
2009/10/21
［目的］ 研究靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定。［方法］ 设计并人工合成靶向PRRSV核蛋白N基因的3个siRNA靶序列，将其插入CMV启动子下游，克隆到真核表达载体pSilencer 4.1- CMV中，对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序。［结果］成功构建了靶向核蛋白基因表达的siRNA干扰重组质粒载体pSilencer-N。［结论］ 该研究为进一步运用RNA...
PRRSV Hn1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建
PRRSV GP5基因 RTPCR 表达载体
2009/6/22
［目的］ 克隆PRRSV Hn1/06株GP5蛋白基因并构建其原核表达载体。［方法］ 根据PRRSV 美洲株ATCCVR2332的ORF5基因序列设计特异性引物, 用RTPCR方法从Hn1/06株中扩增得到GP5蛋白基因的片段，与PTG19T载体连接获得其阳性克隆PTG19TORF5。以该基因片段为模板分别设计ORF5完整序列和删除信号肽的ORF5序列两条引物，进行PCR扩增，将...
M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究
PRRSV RNA 干扰 M 蛋白基因
2008/10/27
【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA（shRNA）的质粒，将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞，观察荧光或进行半定量PCR；或将其转染Marc145细胞，感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50％，使M真核质粒表达蛋白...
【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因免疫的效果，构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定，将重组质粒转染COS-7细胞，经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠，检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量（CD4+和CD8+）以及淋巴细胞增殖反应（MTT...