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用绿色荧光蛋白（GFP）作为报告分子筛选有效的siRNA
RNA干扰 荧光定量PCR 绿色荧光蛋白 载体
2008/1/3
摘要 摘要 建立一种利用绿色荧光蛋白（GFP）作为报告分子筛选能有效抑制目的基因表达的siRNA的方法.以巨噬细胞移动抑制因子（MIF）基因为研究对象，筛选能有效沉默MIF表达的质粒载体介导的siRNA.构建拥有同一Kozak共有翻译启始序列、翻译启始密码子ATG的MIF-GFP融合表达载体pEGFP-MIF.分别将3个靶向MIF的siRNA表达质粒与pEGFP-MIF共转化HEK293细胞，在...
摘要 以HCVIRES为靶位 ,应用T7RNA多聚酶体外转录合成了 5条小干扰RNA(siRNA) .脂质体转染法将其导入HCVIRES介导萤光素酶表达的转基因细胞 (HepG2 .970 6 )中 ,通过测定萤光素酶的量 ,评价T7siRNA对HCV介导基因表达的抑制作用 .结果表明 ,所合成的 5条T7siRNAs ,均能特异性地抑制萤光素酶基因的表达 ,抑制率分别为 94 31%、80 ...
siRNA对SARS冠状病毒复制的抑制作用
SARS冠状病毒 RNAi siRNA
2007/12/19
摘要 为探讨siRNA在哺乳动物细胞中对SARS冠状病毒复制的抑制作用 ,针对BJ0 1株SARS冠状病毒复制酶基因 (Pol)和刺突蛋白基因 (S) ,设计 4个siRNA ,并构建相应的siRNA表达载体及克隆细胞系 .利用间接免疫荧光法及实时定量反转录PCR法 ,检测所设计的siRNA对SARS冠状病毒复制的抑制作用 .结果表明 ,针对Pol基因的siRNA(psOe)在Vero细胞中可阻断...