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陕西省微生物研究所成果推荐磷脂酶D产业化生产技术开发。
江南大学生物工程学院产业成果—医疗生化诊断原料用酶研发生产关键技术。
为筛选具有工业应用价值的产蛋白酶新菌种,本研究采用酪素培养基进行新菌株筛选,利用生理生化试验和16S rDNA测序进行菌种鉴定,并结合生化方法测定其蛋白酶的酶活。结果表明,本研究筛选的一株产蛋白酶菌株HSU-2 (GenBank登录号:MN315516)为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。该菌种产蛋白酶的最适pH值和温度分别是7.0和60℃,为一种耐高温的中性蛋白酶。该蛋白酶可耐受5...
比较鲍曼不动杆菌噬菌体 AB3、裂解酶LysAB3及抗生素在降解鲍曼不动杆菌生物被膜效率的差异。方法 扩增LysAB3基因序列前端的354bp (118aa),以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌 BL21 (DE3)中表达,纯化后命名为裂解酶蛋白LysAB3。用结晶紫法及噻唑蓝 (MTT)法测定经噬菌体 AB3、LysAB3及各抗生素组处理后,鲍曼不动杆菌生物被膜及被膜菌的差异;并...
利用过水解酶催化合成过氧乙酸,过氧乙酸原位氧化活性艳蓝 KN⁃R 脱色.在单因子试验的基础上,通过正交优化试验确定活性艳蓝 KN⁃ R 的最佳脱色条件为:在 5 mL 反应体系中,最适 pH 5.0,加酶量为 20 U·反应-1 ,乙酸乙酯对过氧化氢的摩尔比率为 40∶1 和活性艳蓝 KN⁃R 的 浓度为 80 mg·L -1 .在此条件下反应 6 h...
【目的】探讨一种构建无抗生素选择标记链球菌透明质酸合成酶基因工程菌的方法。【方法】PCR 扩增链球菌透明质酸合成酶操纵子hasABC 基因,用温度敏感载体pJR700 构建携带hasABC 基因重组质粒pXL32;电转化pXL32 质粒到马链球菌兽疫亚种感受态细胞,卡那霉素(Kanamycin,kan)平板37℃培养筛选重组子,在不含kan 液体培养基中30℃传代,37℃平板分离挑取抗生素敏感菌落...
【目的】克隆和表达二糖核苷类抗生素友菌素生物合成基因簇中的核苷转移酶基因amiE,并研究AmiE的体外催化功能。【方法】采用PCR 技术将编码257 个氨基酸的葡萄糖-1-磷酸核苷转移酶基因amiE 克隆到表达载体pET28a 上,构建质粒pCSG4001,转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3) 中诱导表达;利用亲和层析分离纯化蛋白AmiE,以葡萄糖-1-磷酸和胸腺嘧啶三磷酸(TTP) 或...
【目的】通过比较不同碳氮营养及其消耗对产漆酶的影响,了解白腐菌模式种黄孢原毛平革菌解除营养阻遏产漆酶代谢的生理生态特性,揭示白腐菌合成漆酶的碳氮生理调控机理。【方法】分别利用限碳限氮(CL-NL)、限碳富氮(CL-NS)、富碳限氮(CS-NL) 与富碳富氮(CS-NS)4 种条件培养黄孢原毛平革菌野生型(WT) 与突变株,比较两者产漆酶动力学、菌体生长、葡萄糖与氨氮消耗差异及其相关性来揭示解除营养...
选择琼脂、明胶、琼脂-明胶3类固定化载体对具有降解纤维素能力的放线菌2235产生的纤维素酶进行固定化,在分别以以羧甲基纤维素钠(CMS-Na)和滤纸为底物条件下,通过测定不同方法固定化后的纤维素酶活性,确定用于固定化纤维素酶的优良载体。结果表明,明胶法固定化效果最差;琼脂-明胶协同法固定化效果最优,采用该方法测得的滤纸酶和CMC酶活性分别可以达到3317和8868nkat·mL-1。
用非致病性双核丝核菌(Nonpathogenic Binucleate Rhizoctonia species)菌株BNR-1接种处理小麦植株根际,测定一定生长期内小麦防御酶活性变化,结果表明经过BNR-1处理的小麦样品,其防御酶过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸转氨酶(PAL)、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性明显提高,而且经过BNR1处理的小麦样品纹枯病(wheat sh...
以猪粪和秸秆为主要试验材料,添加不同浓度重金属Zn,采取发酵罐处理方法,在好氧高温条件下,研究了重金属锌污染对猪粪堆肥过程中多酚氧化酶、脱氢酶活性的影响,以及对堆腐过程堆体温度、堆料pH值、胡敏酸E4/E6值的影响.结果表明:①CK以及低量重金属Zn污染的堆料升温快,高温期持续时间长,达到无害化处理.②Zn含量为600 mg·kg-1和900 mg·kg-1的堆料E4/E6平均值小,有利于腐殖质的...
目的 克隆孢子丝菌未知过氧化氢酶基因,命名为Sscat基因。方法 根据生物信息库中7种已知真菌过氧化氢酶氨基酸序列的高度保守区域设计简并引物,PCR扩增获得部分Sscat基因cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其3’端和5’端未知序列。结果 Sscat基因cDNA序列全长1746 bp,其中包括5’端121 bp的非编码区、1500 bp的编码区和109 bp的3’端非编码区。该基因编码49...
通过酶切法从重组质粒pUC18-chnB中得到编码环己酮单加氧酶的chnB基因序列,将其定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-chnB,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE电泳检测表达产物.测序结果表明chnB基因大小为1 623 bp,编码由540个氨基酸残基构成的多肽.SDS-PAGE结果显示,表达分子量约为60 kDa的带有6 × His标签的环...
[目的] 为解决我国北方冬季污水处理困难的问题提供技术支持。[方法] 运用TTC法分析了pH值、温度和时间对从低温生物膜中分离纯化鉴定得到8株耐冷菌中脱氢酶活性的影响。[结果] 菌株S1、S4、S5、S7和S8在最适温度和4 ℃下的最适pH值都是7.5,其他3株菌在2种温度下的最适pH值不同,但都在7.5~8.5的范围内。菌株S1、S3、S4、S5和S6的最适反应温度为30 ℃,菌株S2、S7和S...
测定了3株内生真菌分泌物对金钗石斛SOD、POD和PAL活性的影响。结果表明,随菌株37分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先减小后增加趋势,POD和PAL活性逐渐增加;随菌株117分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先增加后减少趋势,POD和PAL活性呈先下降后上升趋势;随着菌株120分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD和PAL活性逐渐增强,POD活性先降低后升高。

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