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中国科学院动物研究所专利：使用脱毒工程菌高密度发酵生产解毒酶的方法
中国科学院动物研究所 专利 脱毒工程菌 发酵 解毒酶
2024/6/14
本发明涉及的使用脱毒工程菌高密度发酵生产解毒酶的方法：使用Escherichia coli pRL-B1脱毒工程菌，采用半合成或合成培养基，在搅拌式生物反应器内高密度发酵生产解毒酶，生产过程中，保持溶解氧浓度高于饱和浓度20％，流加氨水以补充氮源，流加葡萄糖为菌体生长提供碳源，保持葡萄糖浓度1.0g/L以下pH6.5～7.5，有生物活性的、可溶性解毒酶每升含量可达50毫克以上，解毒酶在细胞内形成的...
本发明涉及一种无需聚合酶链式反应的点突变方法及其试剂盒。该方法先将质粒模板变性，含点突变的引物与模板退火；然后加入DNA聚合酶和DNA连接酶，用来合成突变链，并封闭切口；接着进行第二步变性，加入选择引物并与突变链退火；用聚合酶聚合，合成另一条突变链；最后在产物中加入DpnI限制性内切酶，消化去除非突变模板。该方法由于无需PCR，使得该突变过程高保真，不会引入其它额外的突变；并且该方法价格低廉，省时...
本发明涉及一种可以降解农药残留的超级工程菌和其表达的解毒酶。该超级工程菌含有编码解毒酯酶和水解酶的基因，能诱导表达解毒酯酶和水解酶。其构建方法包括：分别克隆解毒酯酶和水解酶的基因；将此基因分别克隆到表达载体pETDuet-1上，构建融合表达载体pETDuet-bl-opd：最后转化得到重组菌株并进行诱导培养。本发明的解毒酶是由上述超级工程菌经诱导表达后而制备的。该超级工程菌和解毒酶可以同时降解马拉...
II型DNA拓扑异构酶是一种普遍存在的酶，在调控双链DNA的拓扑结构中起着关键作用，参与了一系列最基本的DNA代谢过程，包括DNA复制、转录及重组等，并在原核和真核生物中得到了广泛的研究--它们被分类为IIA型（包括gyrase，topo IV和topo II）和IIB型（topo VI），虽然两类的结构不同，催化机制却是相似的--通过切割"G-segment"DNA，使"T-segment"DN...
沈阳农业大学专利：一种枯草芽孢杆菌蛋白酶及其制备方法
沈阳农业大学 枯草芽孢杆菌 蛋白酶 制备方法
2024/5/31
本发明涉及功能微生物应用技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌蛋白酶及其制备方法。所述蛋白酶由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SNBS?3产生，在中性或偏碱性的环境下有良好的稳定性，对单增李斯特菌具有很强的抑制能力，体外溶栓效果和对乳蛋白的溶解效果显著，应用前景广阔。
中国科学院动物研究所专利：通过双酶水解昆虫干粉制备蛋白胨的方法
中国科学院动物研究所 专利 双酶水解 昆虫干粉 蛋白胨
2024/5/31
本发明提供一种通过双酶水解昆虫干粉制备蛋白胨的方法，适用于发酵、生物制药工业等所用蛋白胨的生产。本发明所提供方法的酶解条件如下：温度为10～85℃、时间为2～10小时、酶底比为100～1000u/g和pH1.0～11.0。本发明的方法将昆虫干粉脱脂后，按照不同的底物浓度、酶底比、不同种类的酶首先进行单因素实验，在单因素实验结果的基础上，选取两种酶进行正交试验，优化酶解工艺条件，得到高品质的昆虫蛋白...
本发明公开了辅助鉴定库蚊携带的羧酸酯酶等位基因的专用引物及其应用。本发明根据已出现的羧酸酯酶等位基因，设计了专用引物，由酯酶B特异引物对和酯酶A特异引物对组成；所述酯酶B特异引物对由序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成；所述酯酶A特异引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。采用专用引物，可以利用PCR-RFLP法对羧酸酯酶等位基因进行区分，通过将待测样本的...
本发明提供一种微小RNA及其前体和反义核酸在调节过氧化氢酶活性中的用途。本发明提供的微小RNA为包含以下序列的核苷酸或者其生物活性功能片段或变体：5′-AGGCAAGAUGUUGGCAUAGCUGA-3′。本发明通过实验表明，过表达微小RNA或其前体可降低过氧化氢酶活性，而通过微小RNA反义核酸抑制微小RNA或其前体表达，可增强过氧化氢酶活性。
中国科学院动物研究所专利：一种蛋白质原位酶切的处理方法
中国科学院动物研究所 专利 蛋白质 原位酶切
2024/5/31
本发明公开一种蛋白质原位酶切的处理方法，涉及分析化学技术领域。所述处理方法包括将带有组织切片的载玻片固定在生化样品原位处理装置上，所述生化样品原位处理装置包括有磁铁，磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片；将可键合蛋白的磁性微球喷洒到组织切片表面，室温孵育；利用70％乙醇清洗组织切片1？2次，然后利用96％乙醇清洗组织切片15s，真空干燥；将蛋白酶溶液喷洒到组织切片表面，充分原位酶切后真空干燥。该方法适用...
中国科学院动物研究所专利：一种RNA解旋酶3及其编码基因和应用
中国科学院动物研究所 专利 RNA解旋酶 编码基因
2024/5/30
本发明提供一种具有RNA解旋酶3生物学功能或活性的肽或蛋白，所述肽或蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO : 1所示的氨基酸序列的同源性为95％以上。本发明还涉及编码所述肽或蛋白的核苷酸序列。本发明还涉及含有所述核苷酸序列的重组载体，宿主细胞。本发明还提供了一种改善植物抗病毒性能的方法和制备转基因植物的方法。本发明提供了一种新型的具有RNA解旋酶3活性或功能的肽或蛋白及其编码序列，对RNA解旋酶3...
本发明涉及基因工程领域。具体而言，本发明涉及基于C2c1核酸酶的基因组编辑系统和方法。本发明还涉及可与不同C2c1核酸酶组合用于基因组编辑的人工向导RNA。
本发明公开了一种生产南极假丝酵母脂肪酶B的方法及其使用的特异DNA分子，特异DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO : 3所示。实验证明，采用重组质粒pET30a？CALB原核表达CALB包涵体，再经过复性，得到高纯度(95％以上)、高活性的CALB蛋白；1L培养液约获得CALB蛋白的酶活力为21252U，比活力约253U/mg；远远高于现有文献制备的CALB蛋白的比活力。由此可见，本发明显著...
本申请提供了一种工程化的Cas12i核酸酶；其包含一种、两种、三种或四种以下基于参比Cas12i核酸酶的突变：(1)将参比Cas12i核酸酶中与PAM相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸；和/或(2)将参比Cas12i核酸酶中参与打开DNA双链的一个或多个氨基酸替换为带芳香环的氨基酸；和/或(3)将参比Cas12i核酸酶中位于RuvC结构域并与单链DNA底物相互作用的一个或多个氨基酸替换...
中国科学院动物研究所专利：用于检测端粒酶活性的引物组及检测方法
中国科学院动物研究所 专利 端粒酶活性 引物组
2024/5/30
本发明公开了一种用于检测端粒酶活性的引物组，包括第一引物组或第二引物组；所述第一引物组包括：上游引物：引物MTS，下游引物：引物ACX？M4、引物Beacon ACX62？2C以及引物Beacon ACX62？10中的任意一种；所述第二引物组包括：上游引物：引物STS或引物CTS，下游引物：引物ACX、引物CXT、引物ACX？M4、引物Beacon ACX62？2C以及引物Beacon ACX62...
中国科学院动物研究所专利：工程化的CAS12I核酸酶及其效应蛋白以及用途