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家蚕（B. mori）后部丝腺体丝心蛋白 mRNA及其基因克隆，前人已有报道[6,9,11,13]. 本文介绍我们以蓖麻蚕(Attacus ricini）后部丝腺体为材料分离出Poly(A)+RNA，通过反转录途径将mRNA-cDNA杂双链与质粒pBR 322重组，转化大肠杆菌C600，从转化菌中筛选出一株含有插人了外源cDNA片段的重组克隆，并对它进行了初步鉴定。
核内小RNA与反义RNA
核内小RNA 反义RNA
2008/1/18
长期以来，人们认为RNA 只是DNA性状表达过程中的中间环节，RNA的功能在于控制蛋白质的生物合成，因此，研究主要限于参与蛋白质生物合成的tRNA, rRNA和mRNA o然而，近年已经证明RNA具有生物催化活性，可以控制DNA的复制，还是染色体的结构成分。由于RNA分子的种类很多，可能具有多种生物功能。极为引人注目的是，它们对基因表达可能有重要的调节作用。目前这方面的研究仅属开始，现就以下几方面...
RNA的拼接（(splicing）作用是指一种新的RNA加工过程。自从1977年以来，几个实验室同时报道了一些病毒和真核细胞基因的编码序列是被非编码序列间隔开的。就是说，在真核细胞中存在着割裂基因（(splite gene).这样一个真核细胞基因割裂现象曾经引起了极大的震动。编码序列叫做外显子（exon)，作为其间隔的非编码区叫做内含子（intron)。整个 DNA，包括外显子和内含子全部被转录为...
制备高纯度、高产率总RNA的简易方法1)
RNA 异硫氰酸狐 氯仿 酚
2008/1/15
异硫氰酸呱和氯化物为最有效的蛋白质变性剂w10 Cox首先用肌盐氯化物提取RNA['10Chirgwin用强变性齐U和异硫氰酸呱从富含RNuse的组织细饱中提取完整RNA [410 Han等人证明异硫氰酸肌在低温下提取RNA是有效的，并省去了超速离心['1o Feramisco提出了结合呱盐与热酚来分离RNA的方法［[61。本文报道的是一种新的、快速有效的、结合了异硫氰酸狐、氯仿和酚提取RNA 的...
依赖于DNA的RNA聚合酶的研究
DNA
2008/1/15
真核细胞转录是一个极为复杂的过程，有很多迄今尚未研究清楚的因子参加。依赖于DNA的RNA 聚合酶(E. C. 2.7.7.6）直接或间接地和转录的调节过程有关。真核细胞有三种结构不同的RNA聚合酶5,6,8,10,11)，它们有不同的转录功能。因此，研究真核细胞RNA聚合酶的结构对弄清酶对转录和调节显得十分重要。
RNA 3`-末端32P标记及其核普酸简易测定
RNA 3`-末端
2008/1/15
近几年来，遗传的物质基础，即脱氧核糖核酸(DNA）序列分析技术，有了重大突破[5,7] 对核酸的结构与功能、基因表达、调控等研究起了巨大的推动作用。核糖核酸（RNA）序列分析工作，在经典方法的基础上，借鉴于DNA序列分析方法，也得到了迅速的发展[2,6]。简易直读技术也广泛应用于RNA序列研究中。DNA 或RNA序列分析，多采用体外放射性同位素标记示踪法，其中用放射性磷[32P l标记核酸的5‘一...
高等真核生物RNA聚合酶B免疫方法研究1)
RNA
2008/1/15
在真核生物中，关于依赖于DNA的RNA 聚合酶（依赖于DNA的RNA聚合酶A, B,C，以下统简称为A酶、B酶、C酶）免疫特性的研究对于了解酶的结构、功能、在细胞中的分布以及在生物进化过程中的变化都具有重要意义。在 A酶、C酶以及低等真核生物的B酶的研究中都有不少成功的报道[4-10]。然而，也有许多作者报道，用高等真核生物的B酶免疫兔子、豚鼠都未获得B酶的抗血清[4,7-10].
摘要RNA扩增是伴随着基因芯片技术的应用而发展起来的一项技术，但不仅仅应用于芯片杂交。本文对RNA扩增的技术方法进行了综述，重点介绍了mRNA的线性扩增、指数扩增以及两者相结合的扩增方法以及优缺点，对microRNA的扩增方法也作了介绍，并对将来的发展作了展望。
RNA链延伸中RNA聚合酶对信息的加工
转录延伸复合物 RNA聚合酶 信息加工
2008/1/7
本文在简述了转录循环和转录中间体、尤其是转录延伸复合物结构的基础上，就RNA聚合酶在转录延伸中的作用作了综述。RNA聚合酶对转录调节作出抉择依赖于对转录延伸复合物内在的或外来的信息输入，其功能在很大程度上都像是一个信息加工者。
RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复
RNA/DNA嵌合分子 基因治疗 基因修复
2008/1/7
本文介绍了RNA/DNA嵌合分子介导的高效基因修复技术。这一技术是1996年开始发展起来的全新技术，它通过人工合成的双链开环RNA/DNA嵌合分子转染细胞而使特定基因靶位点产生单碱基改变，从而修复突变基因。这一技术高效（目前最高可达50％以上）、特异性强、安全、无随机插入致变的危险、无免疫反应、无明显毒性，能够用于定点突变、基因敲除、动植物功能基因组学、药物遗传学等很多方面的研究，在不久的将来能够...
摘要 利用启动子的组织特异性和治疗基因组织特异表达的特点 ,设计出前列腺癌靶向基因治疗的新方案 .利用DNA重组技术将前列腺组织特异性启动子 (probasin基因启动子 )和在前列腺癌细胞中高表达成纤维细胞生长因子 (FGF) 8b反义cDNA克隆到逆转录病毒载体pSIR中构建成重组体PB 反义FGF8b pSIR .经转染包装细胞PT 6 7后将产生的复制缺陷型逆转录病毒体外感染前列腺癌细胞系...
RNA干涉与基因沉默
RNA干涉 双链RNA 基因沉默
2008/1/4
双链RNA介导的遗传干涉的机制是1998年发现的。它通过双链RNA的介导特异性地降解相应序列的mRNA，从而导致转录后水平的基因沉默。到目前为止在真菌、拟南芥、线虫、锥虫、水螅、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等真核生物中都发现存在这一基因沉默机制。目前的研究表明，RNA干涉与植物中的共抑制（cosuppression）、真菌中的基因压制（quelling）很可能具有共同的基本分子机制。这也说明，很可能在...