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中山大学生命科学学院张锐教授和中山大学附属第一医院李雯教授团队利用A-to-I RNA编辑揭示miRNA及其反义RNA的相互调控网络（图）
张锐 教授 李雯 A-to-I RNA编辑 miRNA 反义RNA 相互调控网络
2020/7/21
高通量测序技术的应用非常意外地揭示了哺乳动物基因组的绝大多数部分都能发生转录这一现象。研究发现大多数mRNA的反义链位置能够产生转录本。最初这些mRNA的反义RNA被认为是转录的“噪音”；但进一步的研究表明mRNA的反义RNA具有重要的生物学功能。反义RNA的转录过程本身或者反义RNA转录本可以在多个层面调控其配对的mRNA的表达和翻译。但是对于非编码RNA的反义链是否转录和其反义RNA是否有功能...
2014年9月18日，国际学术期刊International Journal of Biochemistry and Cell Biology 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所张学军研究组题为A natural antisense transcript regulates acetylcholinesterase gene expression via epigen...
2014年9月18日，国际学术期刊 International Journal of Biochemistry and Cell Biology 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所张学军研究组题为“A natural antisense transcript regulates acetylcholinesterase gene expression via epig...
核内小RNA与反义RNA
核内小RNA 反义RNA
2008/1/18
长期以来，人们认为RNA 只是DNA性状表达过程中的中间环节，RNA的功能在于控制蛋白质的生物合成，因此，研究主要限于参与蛋白质生物合成的tRNA, rRNA和mRNA o然而，近年已经证明RNA具有生物催化活性，可以控制DNA的复制，还是染色体的结构成分。由于RNA分子的种类很多，可能具有多种生物功能。极为引人注目的是，它们对基因表达可能有重要的调节作用。目前这方面的研究仅属开始，现就以下几方面...
根据番茄ACC合成酶基因(LE-ACC2)DNA序列，以番茄(Lycopersicon esculentumMill)果实的总DNA为模板，利用PCR技术扩增得到预期大小的该基因编码区内部分DNA序列，插入到质粒载体pGEM-3zf(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间后转化E. coliDH-5α，可选出重组子pRE，经酶切，PCR及DNA序列分析证明克隆成功；将pRE上的目的DNA序列以反义方...
尿激酶受体反义RNA抑制人乳腺癌细胞的侵袭作用
尿激酶型纤溶酶原激活剂受体 反义RNA 乳腺癌 肿瘤侵袭
2007/12/24
摘要 将尿激酶受体 u PAR反义 RNA表达质粒 p URAS以脂质体法转染高侵袭性人乳腺癌细胞株 MDA- MB- 2 31 ,G41 8筛选抗性克隆 .Northern印迹法检测 u PAR反义 RNA的表达 ,RT- PCR法检测 u PAR的表达 ,牛奶板法测定细胞培养上清中纤溶活性 .改良 Boyden小室模型和裸小鼠乳房脂肪垫接种试验分别检测肿瘤细胞体外和体内侵袭能力 .反义克隆细胞...
摘要 采用RT PCR方法扩增出 4 2 6bp着色性干皮病A(xerodermapigmentosumgroupA ,XPA)cDNA片段 (2～ 4 2 7bp) ,反向插入pcDNA3 1质粒构建XPA反义RNA表达载体 .经测序证实 ,该片段序列与XPAmRNA对应片段完全互补 .通过脂质体Lipofectamine 2 0 0 0将重组质粒转染肺癌A5 4 9细胞 ,RT PCR检测表明...
反义RNA对猪α-1,3-半乳糖苷转移酶活性的影响
α-1 3-半乳糖苷转移酶 反义RNA 异种移植
2007/12/21
摘要 α 1,3 半乳糖表位是猪 人异种移植超急性排斥反应的主要抗原 ,由α 1,3 半乳糖苷转移酶催化合成 .用RT PCR方法扩增中国实验用小型猪α 1,3 半乳糖苷转移酶cDNA的前 582bp ,测定碱基序列并构建其反义表达载体pLXRN ,将其转染入猪主动脉内皮细胞 .NorthernBlotting表明α 1,3 半乳糖苷转移酶mRNA减少 .检测α 1,3 半乳糖苷转移酶活性表明 ...
摘要 运用基因重组和基因转染技术 ,将 PKCα c DNA反向插入的重组质粒 p XJ41 - CKPα导入人肺癌 LTEPa- 2细胞 .经 Northern印迹 ,Western印迹等检验 ,表明成功地建立了稳定表达 PKCα反义 RNA的人肺癌细胞 (LT· AS4) .进一步研究了表达 PKCα反义 RNA对人肺癌细胞 LTEPa-2增殖的影响 .结果表明 ,表达 PKCα反义 RNA可...
MDR1反义RNA降低细胞KB_(v200)的耐药性
ＭＤＲ１基因 反义ＲＮＡ 多药耐药性
2007/12/18
摘要 由ＭＤＲ１基因过度表达所引起的肿瘤细胞对化疗药物的耐药性，是导致化疗失败的主要原因之一．针对ＭＤＲ１中一段包含转录启始位点、翻译启始位点和转录正调控区的序列，设计了反义ＲＮＡ并将其克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ上．用脂质体包裹载体导入ＭＤＲ１高表达的耐药细胞ＫＢｖ２００中，在反义ＲＮＡ转染的细胞中，ＭＤＲ１在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达都有下降，细胞内药物的浓度有所提高，对长春新碱、阿霉素的耐药...
可随HeLa细胞传代而传递的反义RNA真核表达系统
β地中海贫血 反义ＲＮＡ 剪接 基因治疗
2007/12/18
摘要 为研究反义ＲＮＡ表达载体在细胞内的稳定性，构建了一个特异性针对β地中海贫血基因ＩＶＳ－２－６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体ｐＣＭＶＡ．ｐＣＭＶＡ转染β６５４ＨｅＬａ细胞后，通过ＲＮＡ定量检测反义片段对β６５４ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用；再从转染后传代５次并冰冻保存１年的ＨｅＬａ细胞中回收反义表达载体，转染另外的β６５４ＨｅＬａ细胞，同样检测它对β６５４...
摘要 报道了逆转录病毒载体介导的反义ＲＮＡ对肿瘤细胞Ｏ６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）活性的调节作用．构建了三个表达ＭＧＭＴ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体并用它们转染ＨｅＬａＳ３肿瘤细胞，观察细胞在转染前后ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平、ＭＧＭＴ活性及其对ＡＣＮＵ抗药性的变化．发现针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ５’端的反义ＲＮＡ能够有效地降低ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并使细胞对ＡＣＮＵ的敏感性提高４．...
反义RNA抑制人黑色素瘤细胞表面粘附分子CD44的表达及抑瘤效应
ＣＤ４４ 反义ＲＮＡ 黑色素瘤 致瘤性
2007/12/17
摘要 将细胞表面粘附分子ＣＤ４４Ｓ的ｃＤＮＡ反向插入到真核细胞表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ－ＣＡＴ和ＭＭＴＶ－ＬＴＲ启动子下游，构成ＣＤ４４Ｓ的反义ＲＮＡ载体．将其用电击法导入ＣＤ４４＋的人黑色素瘤细胞系ＨＭＭ２３９，转录出的反义ＲＮＡ能不同程度地抑制ＨＭＭ２３９表面ＣＤ４４的表达．ＣＤ４４的表达被抑制后，瘤细胞与透明质酸的结合力下降，细胞的体外生长速率不受影响．将其接种裸鼠皮下，发现其致瘤性明显降低
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