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用Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓PCE微核试验和小鼠致畸试验对基因重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF)进行研究。结果显示，rh-bFGF(0.1～500μg/皿）对TA97、TA98、TA100和TA102菌株在±S9mix条件下无致突变作用。各剂量组的微核细胞率与溶剂组比较，P>0.05。4个剂量组CHL细胞染色体畸变率均<5％。在妊娠母鼠6～15d P0给药，各剂量...
人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达
αFGF 基因重组和表达
2007/12/24
摘要 用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及插入方向的正反,结果我们得到了haFGF正向插入在pBV220 PLPR启动子下游的重组质粒pBV-αFGF。42℃热诱导使重组...
人肝细胞生长因子(hdHGF)基因在毕赤酵母中的分泌表达
肝细胞生长因子 巴斯德毕赤酵母 分泌表达
2007/12/24
摘要 研究了hdHGF基因在毕赤酵母中的表达 .以人胎盘mRNA为模板 ,经逆转录、重叠PCR获得hdHGF全长和成熟基因片段 .将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115,筛选mut+ 表型 ,经甲醇诱导可实现rhdHGF的分泌表达 .经摇瓶培养筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析和Western印...
血管内皮细胞生长因子受体(KDR)的分子克隆与原核表达
血管内皮细胞生长因子受体（ＫＤＲ） 克隆 表达
2007/12/18
摘要 血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）是特异的血管内皮细胞促分裂素，它主要通过相应受体（ＫＤＲ）刺激血管内皮细胞增殖．ＶＥＧＦ及其受体在肿瘤血管形成中起重要作用．通过逆转录及多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）成功地从人脐静脉内皮细胞扩增出编码ＫＤＲ胞外ＶＥＧＦ结合区的ＤＮＡ片段，将该片段克隆在谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ２Ｔ中，获得在大肠杆菌Ｊｍ１０９的稳定表达．表达的不溶性融合蛋...