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应用于胚胎干细胞（embryonic stem cells, ES细胞）培养的国产药物可以降低ES细胞的实验成本。研究中以浙江海正药业生产的丝裂霉素（mitomycin，国药准字H33020786）处理小鼠胎儿成纤维细胞，用于胚胎干细胞建系。并制备饲养层，将小鼠囊胚种植在该饲养层上。4—6天后，挑选形态良好的 内细胞团(inner cell mass)来源的克隆在胰酶中进行消化，将消化下来的细胞团...
利用显微和细胞化学方法, 对毛竹( Phyllostachys edulis) 茎秆纤维次生壁形成过程中超微结构变化以及ATP 酶、Ca2+ -ATPase 和酸性磷酸酶的超微细胞化学定位进行了研究。研究发现, 次生壁形成早期,细胞核具有双层核膜, 染色质凝聚, 可见大量的线粒体、粗面内质网和高尔基体等细胞器存在于纤维细胞中; 随后, 双层核膜消失, 细胞器将逐渐解体, 多泡体开始出现在纤维细胞的...
p21WAF1在丁酸钠诱导的人成纤维细胞凋亡中的表现
细胞凋亡 基因表达 p21WAF1 ]丁酸钠
2008/10/23
用丁酸钠（NaBu）诱导了人胚肺二倍体成纤维细胞凋亡（2BS），检测其诱导过程中凋亡相关基因的表达变化，结果表明，p21WAF1的表达在凋亡发生前即有明显下降，并持续至凋亡发生时, bcl-2的表达仅在凋亡发生时有所下降，c-myc和c-fos的表达有所上升，而p53和HER-2的表达无明显变化.用稳定转染了不同长度p21WAF1启动子片段和下游绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的2BS-WP系列细胞...
成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进展
成纤维细胞生长因子 受体 肝素 抑制剂
2008/9/27
成纤维细胞生长因子（FGF）有许多重要的生理功能，并与肿瘤的形成有关.为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)相互作用的机制，人们对FGF和FGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究，定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区，提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型，在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽...
人P68核蛋白在小鼠成纤维细胞中过量表达引起恶性转化的研究
P68核蛋白 RNA解旋酶 过量表达 恶性转化
2008/2/4
摘要P68核蛋白是一个依赖于ATP的RNA解旋酶,同时具有依赖于RNA的ATPase活性,它与SV40大T抗原有交叉免疫反应。随细胞周期不同,其含量和分布均有较大差异。以前的工作表明P68核蛋白在同一细胞系不同生长阶段的表型不同。它在肿瘤细胞(HeLa和TC3H10)与非肿瘤细胞(NIH3T3和NC3H10)之间表型亦有明显差异.因此,在细胞中过量表达P68核蛋白,可能会影响到细胞的生长特性。报道...
5-azaC对人体成纤维细胞失活X染色体DNA复制带型的影响
5一氮胞普 复制带 失活X染色体
2008/2/3
摘要本文用饱苔的类似物，一氮胞昔( 5-azaC）处理两种人体皮肤成纤维细咆— 46, XX和46.9 Xt(X; 1)0经过一定时间培养，观察用5-azaC处理人体成纤维细咆中失活X染色体复制带的变化。发现，一。zaC对迟复制X(LX）和t(X; 1)染色体上有一条或多条复制带的染色增深，表示复制提前，大约比对照组提前复制1小时左右。n时发现t(x; 1)染色体上，受X失活中心的失活扩散影响的I...
用Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓PCE微核试验和小鼠致畸试验对基因重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF)进行研究。结果显示，rh-bFGF(0.1～500μg/皿）对TA97、TA98、TA100和TA102菌株在±S9mix条件下无致突变作用。各剂量组的微核细胞率与溶剂组比较，P>0.05。4个剂量组CHL细胞染色体畸变率均<5％。在妊娠母鼠6～15d P0给药，各剂量...
胸苷激酶基因在人二倍体成纤维细胞衰老过程中的表达调控
细胞衰老 人胸苷激酶基因 表达调控 Rb
2008/1/3
摘要 为研究人胸苷激酶 (humanthymidinekinase ,hTK)基因在复制衰老细胞及早衰细胞中表达下调的分子机制 ,构建了含hTK启动子的荧光素酶报告基因载体 .转染结果显示 ,复制衰老细胞与早衰细胞中hTK启动子的转录活性比年轻细胞中下降了近 3倍 ,表明转录水平的调控是hTK在衰老细胞中表达下降的主要调控机制 .定点突变的结果显示 ,转录因子Sp1、NF Y结合位点的突变可使hT...
矽肺成纤维细胞增生因子的纯化及分析
矽肺 巨噬细胞 成纤维细胞增生因子
2008/1/1
摘要 过去的研究资料充分证明,巨噬细胞和由巨噬细胞释放的可溶性因子在矽肺纤维化过程中起着重要的调节作用。然而,对这种调节矽肺纤维化过程的蛋白因子的理化特性迄今还知道得很少。本研究采用矽肺大鼠肺泡巨噬细胞体外培养的方法获得其培养上清液,实验证明,该上清液可以促进体外培养的成纤维细胞对~3H-TdR和~3H-脯氨酸的摄取。我们从巨噬细胞上清液中分离纯化出一种具有促进成纤维细胞增殖能力的蛋白质因子。该因...
脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化
脂质体 绿色荧光蛋白 牛胎儿成纤维细胞 转染
2007/12/29
通过脂质体（FuGENE-6）介导，将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞，探讨影响外源基因转染效率的参数，如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现，绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加，延长细胞暴露时间反而使转染效率下降，转染细胞数适当才...
神经鞘脂病的酶学诊断方法——用培养的人皮肤成纤维细胞检测
神经鞘脂病 脑脂质沉积症 酶学诊断
2007/12/24
摘要 神经鞘脂病是一类神经鞘脂分解代谢障碍的遗传性疾病,酶学检测是确诊的一种主要手段。在通常采用的标本中,培养的人皮肤成纤维细胞是最理想的酶源。本文改良七种用人工底物检测酶活性的方法,通过控制细胞传代和细胞生长时相的措施,用自己培养的34个正常人的皮肤成纤维细胞建立对GM_1-神经节苷脂累积症,GM_2-神经节苷脂累积症,异染质型脑白质营养不良症,krabbe氏病,Gaucher氏病,Nieman...
摘要 为寻找纤维化形成中调控人Ⅰ型前胶原基因高水平转录的启动序列及其DNA结合蛋白 ,以人皮肤成纤维细胞α1(Ⅰ )前胶原基因转录起始点上游 - 2 5kb至 + 4 2bp的片段为靶序列 ,采用PCR、基因重组、报告基因测活、细胞基因转染技术比较不同长短启动子活性 .凝胶滞留实验 (EM SA)研究高启动活性片段相应的DNA结合蛋白 .基因转染高活性转录因子识别序列至靶细胞 ,探讨前胶原基因激...
人胚肺二倍体成纤维细胞端区长度的代龄变化
端区 细胞衰老 生物学标志
2007/12/24
摘要 以体外培养的不同代龄的人胚肺二倍体成纤维细胞（2BS）为实验对象，HeLa细胞为对照，分别观察其端区长度随代龄的变化．结果显示年轻2BS细胞（24代）端区长度约9．13kb；衰老2BS细胞（64代）端区长度约7kb，丢失约2kb．2BS细胞端区长度随代龄的增长而缩短．密度扫描结果显示细胞每复制一代，端区平均丢失50bp，而HeLa细胞的端区长度未因代龄而变化．
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