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江苏省作物基因组学和分子育种重点实验室基因编辑团队在Plant Biotechnology Journal发布论文,系统评估了PAM松弛型CRISPR-Cas9植物基因组编辑工具的脱靶效应,提示ABE8e存在高比例脱靶
CRISPR-Cas9 基因编辑 水稻 脱靶效应
2023/8/9
CRISPR-Cas9基因编辑工具凭借其高效、易用、灵活特性极大的改变了传统育种手段,研究人员为了扩大其靶向范围,设计了一系列SpCas9变体,包xCas9(识别5′-NG-3′、5′-GAA-3′、5′-GAT-3′ PAM)、SpCas9-NGv1和SpCas9-NG(识别5′-NG-3′ PAM)以及PAM-less SpRY然而,这些PAM-relaxed Cas9核酸酶是否会造成向导RN...
中国科学院遗传与发育生物学研究所高彩霞研究组利用CRISPR/Cas系统(包括Cas9和Cpf1)的体外切割特性,在六倍体小麦和二倍体水稻中建立了一种简单、高效、廉价的PCR/RNP植物突变体筛选策略。该方法不受限制性内切酶位点的限制,比PCR/RE具有更强的广适性;比T7EI具有更高的准确度;比Sanger测序更廉价,而且灵敏度更高。基于SpCas9和FnCpf1 RNPs的PCR/RNP方法可...
中国遗传学会高彩霞研究组在植物基因组编辑方法研究中取得新进展(图)
植物基因组;编辑方法
2021/11/26
基因组编辑技术是最新发展起来的植物基因功能研究及定向育种的重要手段。在植物中实现基因组编辑的常规方法是将序列特异性核酸酶(如CRISPR/Cas9)的编码DNA转化植物细胞,稳定表达进而实现对目的基因的定点编辑。这种情况下,CRISPR载体整合在植物染色体中,需通过后代分离获得不含CRISPR/Cas9 DNA的植株。由于此过程涉及到转基因植物,因此生物安全性可能会受到一定的质疑;同时,CRISP...
中国科学院微生物研究所等发表植物基因组编辑研究综述(图)
中国科学院微生物研究所 植物 基因组编辑
2017/8/14
序列特异性核酸酶使得基因组编辑成为可能,快速推动了基础和应用生物学的发展。CRISPR-Cas9系统自出现以来,作为可转化植物的基因组编辑工具已得到广泛应用。CRISPR-Cas9对基因组靶位点进行定向切割,造成DNA双链断裂。DNA双链断裂主要通过两种高度保守的机制进行修复,即非同源末端连接(Non-homologous end joining, NHEJ)和同源重组(Homologous re...
序列特异性核酸酶使得基因组编辑成为可能,快速推动了基础和应用生物学的发展。CRISPR-Cas9系统自出现以来,作为可转化植物的基因组编辑工具已得到广泛应用。CRISPR-Cas9对基因组靶位点进行定向切割,造成DNA双链断裂。DNA双链断裂主要通过两种高度保守的机制进行修复,即非同源末端连接(Non-homologous end joining, NHEJ)和同源重组(Homologous re...
基因组编辑技术是最新发展起来的植物基因功能研究及定向育种的重要手段。在植物中实现基因组编辑的常规方法是将序列特异性核酸酶(如CRISPR/Cas9)的编码DNA转化植物细胞,稳定表达进而实现对目的基因的定点编辑。这种情况下,CRISPR载体整合在植物染色体中,需通过后代分离获得不含CRISPR/Cas9 DNA的植株。由于此过程涉及转基因植物,因此生物安全性可能会受到一定的质疑;同时,CRISPR...