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浙江大学生命科学研究院2022年7月18日浙江大学祝赛勇/刘建钊课题组合作在Nature Communications发文首次报道胰腺谱系分化过程中的mRNA m6A修饰动态图谱及ALKBH5对胰岛发育的关键调控作用（图）
祝赛勇 刘建钊 Nature Communications 胰腺谱系分化 mRNA m6A修饰 动态图谱 ALKBH5 胰岛发育
2022/10/25
器官发育是最重要的生物学问题之一。通过研究线虫、果蝇、斑马鱼、爪蟾、小鼠等经典模式生物，建立了发育学基本原理。人多能干细胞定向分化及类器官技术，基于人类自身遗传背景，是研究人类器官发育新体系，具有独特性、不可替代性。近年来，这一领域得到了快速发展，越来越受到重视、关注和应用。特别是利用干细胞定向分化结合CRISPR基因编辑技术，研究细胞分化和器官发育，已成为研究热点。其中胰岛类器官技术，不仅可以促...
Tissue Specific Splicing of Pre-mRNA Porcine Mitochondrial Transcription Factor A
pig mitochondrion mitochondrial biogenesis splicing forms expression
2018/3/5
Mitochondrial transcription factor A plays, due to its role in replication and transcription of the mitochondrial
DNA, an important role in mitochondrial biogenesis and regulation of its activity. In...
真核mRNA 3′非翻译区的肿瘤抑制功能和表达调控
肿瘤抑制 表达调控 3′非翻译区
2008/6/10
最近几年来,关于真核mRNA 3′UTR在肿瘤细胞恶性表型抑制中作用的研究, 取得了非常令人鼓舞的进展. 目前已经发现,3′UTR参与一些已知的癌基因和抗癌基因的功能调控; 一些抗癌基因的失活来源于其3′-UTR的结构变化;而且又发现了一些基因的3′UTR在转染恶性细胞后表现抗癌基因活性. 此外,3′UTR在mRNA表达调控中的作用也已研究得更加深入.现将最近几年来在这一领域的一部分研究进展情况,...
双抗体免疫技术分离豚鼠肝白蛋白mRNA及其翻译特性的研究
豚鼠肝白蛋 双抗体免疫
2008/2/5
摘要从真核经胞中分离特定的mRNA对于基因表达的调控、基因分离及结构功能的研究是重要的手段。至今从不同种属的动、植物组织中已分离出大约近三十种mRNA，所选用的材料大部分是只能或主要是合成单一蛋白的系统，从这些组织中抽提mRNA，所选用的材料大部分是只能或主要是合成单一蛋白 系统，从这些组织中抽提mRNA较为容易，即可以从组织中直接分离，又可在得到多核蛋白体后按常规提纯。然而，在分离组织中含量少的...
正常状态和搞病毒状态的HeLa细胞翻译小鼠干扰素mRNA能力的比较
细胞翻译小鼠 病毒状态
2008/2/5
摘要从NDV病毒诱导的Lpa细胞中分离的小鼠干扰素mRNA能在完整的HeLa细胞中翻译，而且翻译时小鼠干扰素在HeLa细胞中的生产有较好的重复性，平均产量为72单位/毫升。然而在用人的干扰素处理HeLa细胞后，处在抗病毒状态的HeLa细胞就不能再翻译小鼠的干扰素mRNA。这一现象可能与干扰素的抗病毒机制有关。
摘要分别用活化素(Activin)、卵泡抑素(FSP)及其组合(Activin+FSP)来处理培养的鸭未成熟卵泡颗粒细胞,发现在FSH存在与不存在的情况下,Activin均能促进FSH受体mRNA的表达,且随着Activin浓度的增大,其刺激作用增强。FSP自身对FSH受体产生无显著作用,但能中和Activin对该受体产生的促进作用。这说明FSP和Activin对颗粒细胞具有自分泌作用,二者通过调...
从短锯站分离和鉴定抗冻多肤mRNA
2008/2/3
摘要短锯鲸在冬季产生抗冻多肤，此多肤能降低血液的冻结温度。本实验用11月份捕获的短锯站f胜做标本，提取抗冻多肤梯度密度离心提纯。抗冻多肤mRNA
m RNA，经寡聚脱氧胸腺q,咤核葺酸纤维素亲合层析和蔗糖的长度经含经甲基汞的琼脂糖凝胶电泳测定为580硷基对，其在无细胞翻译系统中初级翻译产物的分子量经sns-PAGE估计为15000o
摘要诺加拉霉素能有效封锁盘其网柄菌转录，放线菌酮和嘌呤霉素对抑制该菌蛋白合成有相近效 力。盘基网柄菌分化发育后期积累的mRNAs，在细胞被分散（分化逆转）时，专一地被快速 降解。诺加拉霉素、放线菌素D和柔红霉素合用稳定某些快速降解的mRNA。放线菌酮稳定所 有mRNAs.嘌呤霉素不能稳定后期mRNAs，且有促进降解作用。表明后期mRNAs的快速降解不需 要新蛋白合成，分化逆转只增加了已有酶的作用。...
野生大豆未成熟种子总mRNA的分离及其cDNA的分子克隆
野生大豆 mRNA cDNA 克隆
2008/2/2
摘要用氯化锂沉淀法从野生大豆(G.sojα)未成熟种子中制备总RNA，经oligo(dT)-纤维素柱亲和 层析，获得总mRNA，在兔网织红细胞体系中表现出一定翻译活性。以总mRNA为模板，oligo( dT)12 18 为引物，反转录酶催化合成第一链cDNA，RNaseH-DNA聚合酶Ι协同合成第二链cDN A。双链cDNA的长度大约为200-5000bp，且不存在发夹结构。将双链cDNA修补后钝...
摘要卵泡抑素是与抑制素/活化素功能密切相关的一种糖蛋白激素,采用定量竞争RT-PCR技术对鸭各级卵泡及成熟与未成熟精巢中的卵泡抑素和抑制素/活化素βB亚基的mRNA表达丰度进行了研究,发现在上述组织中均有此两基因mRNA的表达,且只在小卵泡中表达较丰富。卵泡抑素在小黄卵泡(SYF)中表达量最高,以其mRNA的平均相对丰度为1.00,则F1(最大卵泡)、F2、F3、F4、F5、F6～8,LWF(大白...
牛泌乳素mRNA的分离及鉴定
牛泌乳素 mRNA 寡聚核苷酸探针 Northern 印迹杂交 体外翻译
2008/2/1
摘要本文报道了从牛脑垂体提取总RNA，经寡聚脱氧胸苷纤维素亲合层析分离获得牛脑垂体Poly( A)+RNA。牛泌乳素mRNA经含羟甲基汞琼脂糖凝胶电泳分析，估计其长度约为1200个核苷酸。 根据牛泌乳素的部分氨基酸序列推断并合成寡聚核苷酸探针，经Northern印迹杂交及放射自 显影分析，证实了该mRNA中含有牛泌乳素mRNA的序列。在兔网织红细胞体外翻译体系中，牛 泌乳素mRNA促进了35S-甲...
摘要X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良（spondyloepiphyseal dysplasia tarda, SEDL）是一种少见的由SEDL基因突变引起的骨软骨发育障碍性疾病，病变主要累及腰椎和近端承重大关节。为研究SEDL基因剪接受体突变(IVS2 -2A→C)对mRNA加工的影响，从该突变所致SEDL患者，以及健康对照者外周血中提取总RNA，逆转录合成cDNA, 以此为模板进行聚合酶链式反应（...
小鼠SmX5基因mRNA的选择性剪接
自免疫睾丸炎 差异剪接 内含子保留 snRNP相关蛋白
2008/1/24
摘要通过RT-PCR技术，发现小鼠SmX5基因的另外3种选择性剪接体，分别命名为SmX5a、b和c。小鼠SmX5a cDNA具有完整的内含子1，而SmX5b cDNA含有部分内含子2。SmX5c的保留片断和SmX5b在相同位置起始，但保留部分延伸经过余下的内含子2。余下的DNA序列在所有内含子-外显子边界处都符合剪接的“GTAG”规则。RT-PCR的表达分析显示这3种异构体都是稳定的转录产物，均...
mRNA选择性剪接的分子机制
mRNA 选择性剪接
2008/1/21
摘要真核细胞mRNA前体经过剪接成为成熟的mRNA，而mRNA前体的选择性剪接极大地增加了蛋白质的多样性和基因表达的复杂程度，剪接位点的识别可以以跨越内含子的机制（内含子限定）或跨越外显子的机制（外显子限定）进行。选择性剪接有多种剪接形式：选择不同的剪接位点，选择不同的剪接末端，外显子的不同组合及内含子的剪接与否等。选择性剪接过程受到许多顺式元件和反式因子的调控，并与基本剪接过程紧密联系，剪接体中...
摘要HCMV UL97基因编码一种蛋白激酶，该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成，且序列异常保守，可作为抗HCMV治疗的重要靶位。基于HCMV UL97 mRNA T3位点附近的序列，设计一段与该位点互补的引导序列（Guide Sequence，GS），并将其与大肠杆菌核酶P催化亚基（M1 RNA）的3’末端共价连接，构建了一种序列特异性的M1GS（M1-T3）。体外试验证实，所构建的M1-T...