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蛋白泛素化在维持细胞稳定性和调控多种生物学过程（包括细胞周期）中起着至关重要的作用，其系统功能紊乱与多种肿瘤（如乳腺癌等）产生和发展关系密切。蛋白泛素化过程由三种酶依次催化完成，包括泛素激活酶（E1）、泛素连接酶（E2）和泛素连接酶（E3）。E3泛素连接酶决定了泛素化底物的特异性，大量研究表明其可能是肿瘤靶向治疗的有效靶标。但是，目前大量的E3泛素连接酶的功能还不清楚。鉴定E3泛素连接酶所修饰的底...
分子伴侣BiP结构域分析及对肝癌细胞增殖和凋亡的影响
BiP 缺失体 生物信息学 细胞增殖
2012/7/20
结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein， BiP)， 是Hsp70 (70 kilodalton heat shock proteins)蛋白家族的成员之一， 是内质网应激(endoplasmic reticulum stress， ERS)主要的调节器。为了研究BiP的分子结构与生物学功能的关系， 首先， 分析BiP的DNA序列和蛋白质空间构象， 接着利用重...
皮肤免疫调节的动态平衡可以确保皮肤在割伤或划伤后的正常愈合，因此它对于维持皮肤的完整性非常重要。但是，如果皮肤免疫调节的动态平衡失去控制，将会导致银屑病(psoriasis, 又称牛皮癣)和其他皮肤紊乱性疾病。在最新一期的《Immunity》(影响因子:24.221)上，我校生命科学学院上海市调控生物学重点实验室赖玉平研究员课题组揭示了在伤口愈合过程中促进细胞增殖的关键分子，这有可能为治疗银屑病和...
采用MTT法对姜黄素结构衍生物（CCM系列化合物）进行抗人肝癌细胞Bel-7402和SMMC-7721活性筛选；利用流式细胞技术和荧光显微镜检测SMMC-7721细胞凋亡及周期分布；采用Western-Blot方法检测SMMC-7721中蛋白caspase-3和剪切后p17的表达.结果表明，化合物CCM-5和CCM-14抗肿瘤活性较好，其对SMMC-7721细胞的凋亡作用呈剂量依赖性，且凋亡率与阴...
该研究首先通过Real-time RT-PCR检测发现， microRNA-133b在人横纹肌肉瘤细胞RD和A204中的表达量比正常肌肉组织中的表达量明显降低， 再通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-133b转染入横纹肌肉瘤细胞RD和A204细胞中， 并应用MTS法、Transwell法研究发现，microRNA-133b可明显抑制RD和A204细胞的增殖与迁移; 采用Western b...
Caveolin-1对乳腺癌细胞系MCF-7增殖和存活的影响
Caveolin-1 乳腺癌 增殖和存活
2012/7/18
该文研究窖蛋白(Caveolin-1)对乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖与存活的影响。运用蛋白质印迹方法(Western blot)检测发现， Caveolin-1在5株不同细胞系均只有低表达。运用电穿孔转染方法在乳腺癌细胞系中高表达Caveolin-1， 运用Western blot检测转染后Caveolin-1表达情况发现，转染后细胞内Caveolin-1表达上升， 并具有生物活性。运用单核细胞...
IL-13促进肝星状细胞增殖和胶原蛋白表达
IL-13 肝星状细胞 LX-2 胶原蛋白
2012/7/18
肝星状细胞(hepatic stellate cell， HSC)是肝纤维化发展过程中过量细胞外基质的主要来源。该研究首先利用MTT法检测IL-13实验剂量和时间条件下肝星状细胞增殖情况; 然后运用RT-PCR技术检测IL-13对人肝星状细胞LX-2细胞系IL-13Rα1、IL-4Rα、TGF-b和I型胶原蛋白转录水平的影响; 最后通过羟脯氨酸法定量分析各组细胞培养上清液中的胶原蛋白含量。结果发现...
该研究旨在探讨重组人S100A6蛋白对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。利用原核表达制备重组人S100A6蛋白(GST-hS100A6)， SDS-PAGE显示其大小为36 kDa， Western blot显示其可以被S100A6抗体特异识别， BCA法测定1 L菌液共收获约16.7 mg蛋白; 将其作用于人乳腺癌细胞MCF-7， MTT显示细胞培养48 h时， 浓度为1...
MicroRNA-34a抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究
MicroRNA-34a 葡萄膜黑色素瘤 增殖 细胞周期 阿霉素
2012/7/18
该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响， 发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.01); 并利用流式细胞技术检测转染microRNA-34a后细胞周期的变化， 发现细胞停滞于G1期; 同时检测转染mic...
为探讨apelin促进脂肪间充质干细胞增殖分化及其相关机制的分子影像研究方法，用酶消化法分离β-actin-luc FVB转基因小鼠的脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)，流式细胞术鉴定干细胞标志，生物发光成像确定细胞荧光素酶的表达。建立缺氧(H)6 h /复氧(R)2 h细胞模型，分3组：对照组、缺氧/复氧组(H/R)和H/R＋apelin干预组(10-10～10-5 mol/L)。MTT法和生物...
绿僵菌素A和B是生物活性分子，本研究用MTT法、相差显微观察、荧光倒置显微观察和流式细胞术比较了绿僵菌素A和B对斜纹夜蛾Spodoptera litura SL-1细胞的毒杀作用。结果表明：绿僵菌素A和B对SL-1细胞均具有明显的增殖抑制作用，且具有正比的时间-浓度-效应关系，绿僵菌素A和B处理细胞48 h后的IC50值分别为7.80和20.73 μg/mL。倒置相差显微观察发现，绿僵菌素A和B可...
该研究利用MTT和结晶紫的方法证明sIFNα对肺癌细胞A549增殖有很强的抑制作用，而同样剂量的普通干扰素IFNα2b抑制作用要小很多。与对照组相比， sIFNα处理后， 细胞形态发生改变， 细胞体积变大， 形态呈扁平状; Hoechst33258染色发现， 细胞核形态无变化并且未检测到凋亡;SA-β-gal染色发现大多数细胞呈现阳性， 同时， 衰老相关蛋白p53和p21表达量明显上调。而IFNα...
干细胞疗法为缺血性心血管病的组织再生带来希望，然而体内移植后干细胞的不良转归严重制约了其治疗效果。研究表明，血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）或可对干细胞产生保护作用；同时，分子影像可作为干细胞研究的有力手段，实现体内外干细胞生物学过程的可视化与实时定量监测。该研究首先培养了稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因的脂肪间充质干细胞，然后运...
体外培养的人喉癌细胞系Hep-2细胞用10 ng/ml干扰素-γ处理不同时间后， 利用细胞计数、细胞凋亡-DNA Ladder分析及半定量RT-PCR方法， 探讨干扰素-γ对Hep-2细胞增殖及凋亡的影响并初步分析其作用分子机制。结果显示， 与不处理对照细胞相比， 干扰素-γ处理后第2天起Hep-2细胞增殖明显变慢; 细胞凋亡分析显示， 干扰素-γ处理后Hep-2细胞基因组DNA电泳图谱呈梯状分布...