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为建立一hLRH-1表达稳定抑制的细胞系，我们构建了hLRH-1基因靶向的稳定RNA干涉载体(pSineohLRH-1)并导入肝细胞癌细胞BEL-7402。通过半定量RT-PCR分析发现，携有pSineohLRH-1的BEL-7402细胞其hLRH-1基因mRNA的表达抑制率达60%。此外，微阵列法基因表达谱分析结果表明，与未干涉的对照细胞相比，包括一些肿瘤相关的基因如Gadd45β和PTEN在内...
几种不同细胞系之间P68 RNA解旋酶表型差异的研究
P68 RNA解旋酶 细胞系 表型差异
2008/1/22
对分别来自4种不同细胞系的细胞,在生长期间胞内P68 RNA解旋酶的动态变化进行了蛋白质和mRNA的比较研究。结果发现随着细胞培养时间的延长,各系细胞中P68 RNA解旋酶均呈现出有规律的改变,并且这种规律具有明显的细胞系特征: 肿瘤细胞系之间表现出P68 RNA解旋酶蛋白条带单一的一致性;非肿瘤细胞系P68 RNA解旋酶蛋白出现多条带变化,并表现出明显的适应性; 肿瘤细胞系与非肿瘤细胞系之间P6...
家蚕（B. mori）后部丝腺体丝心蛋白 mRNA及其基因克隆，前人已有报道[6,9,11,13]. 本文介绍我们以蓖麻蚕(Attacus ricini）后部丝腺体为材料分离出Poly(A)+RNA，通过反转录途径将mRNA-cDNA杂双链与质粒pBR 322重组，转化大肠杆菌C600，从转化菌中筛选出一株含有插人了外源cDNA片段的重组克隆，并对它进行了初步鉴定。
反转录酶合成cDNA常产生不完全的转录产物。为获得全长的cDNA拷贝并提高它在总cDNA中的比例，已有不少文献提出了一些措施，效果如何尚有争论[3]。我们以人胚肾培养细胞poly(A)+ RNA为模板，参照Maniatis 的方法[5]，建立了一个比较简单易行的反转录程序，合成了较长的cDNA拷贝。
60Cor-线对人血淋巴细胞DNA和RNA合成能力的影响1）
2008/1/20
摘要例人血在体外接受60Cor-线照射后进行培养，用3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）和14C-尿嘧啶核苷（14C-UR）作掺入实验，以反映DNA和RNA的合成能力。应用滤膜法收获细胞，液体闪烁计数器测定双标记样品，发现r-线对DNA和RNA合成的影响有一定规律，即随照射剂量的培加，3H和14C掺入的放射性呈指数下降。经统计处理分别得到照射剂量和3H-TdR、14C-UR掺入的放射性计数的对数值两...
60Co r一线对DNA、RNA、蛋白质合成代谢的效应
2008/1/20
摘要人血在体外受60Co r-线照射后，用3H-TdR、14C-UR、14C-缬氨酸和3H-亮氨酸作掺入实验，分别反映DNA、RNA和蛋白质的合成能力。结果说明r线对三种大分子合成的影响有一定规律性，即随剂量增加，掺入的放射性呈指数下降，10拉德导致3H-TdR和14C UR掺入放射性显著减少，四种标记化合物掺入下降的趋势基本一致。
双壳纲动物核糖体RNA 18S-ITS1序列及其在分子系统发育研究中的应用18S-ITS1 Sequence of rRNA in Bivalves and its Application in Phylogenetic Analysis
ITS1 18S RNA 遗传多样性 双壳纲
2008/1/20
摘要
测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明，该序列在种间存在很高的多态性，长度从558 bp到784 bp不等，碱基差异百分比在10.7%~61.7%之间， ITS1序列同源性很低，有片段的插入与缺失。种间18S部分序列碱基差异百分比在0.9%~23.7%之间，变化主要是碱基的转换。用邻接法（NJ）构建了8个种的18S部分序列（约240 bp...
叶绿体中低分子量核糖体RNA的制备
叶绿体 低分子量核糖体 RNA
2008/1/18
高等植物叶绿体中的70S核糖体，是由50 S大亚基和30S小亚基所组成的。前者含有23S RNA，后者含有16S RNA，两者均属高分子量 r RNA['1。此外，50S大亚基中还含有两个低分子量的RNA，即5S与4.5S RNA"','], 5S RNA 大约含有120个核昔酸[37，分子量约为4 X 10' 道尔顿，为真核与原核生物所共有，也为高等植物叶绿体核糖体和细胞质核糖体所同时共有。 4...
核内小RNA与反义RNA
核内小RNA 反义RNA
2008/1/18
长期以来，人们认为RNA 只是DNA性状表达过程中的中间环节，RNA的功能在于控制蛋白质的生物合成，因此，研究主要限于参与蛋白质生物合成的tRNA, rRNA和mRNA o然而，近年已经证明RNA具有生物催化活性，可以控制DNA的复制，还是染色体的结构成分。由于RNA分子的种类很多，可能具有多种生物功能。极为引人注目的是，它们对基因表达可能有重要的调节作用。目前这方面的研究仅属开始，现就以下几方面...
RNA的拼接（(splicing）作用是指一种新的RNA加工过程。自从1977年以来，几个实验室同时报道了一些病毒和真核细胞基因的编码序列是被非编码序列间隔开的。就是说，在真核细胞中存在着割裂基因（(splite gene).这样一个真核细胞基因割裂现象曾经引起了极大的震动。编码序列叫做外显子（exon)，作为其间隔的非编码区叫做内含子（intron)。整个 DNA，包括外显子和内含子全部被转录为...
分子遗传学泰斗J. D. Watson于1957年首先对核糖体进行系统的研究。其后0.许多科学家的共同努力，核糖体的结构已经基本研究清楚。然而对核糖体蛋白质的确切功能，却仍然一无所知。1979年以来，本实验室主要从事分离核糖体蛋白质突变体，研究核糖体蛋白质突变对基因表达的影响。发现在S12突变体中，碱性蛋白酶活性下降，而中性蛋白酶活性正常。到目前为止，我们分离鉴定了的枯草杆菌核糖体蛋白质突变体总数...
一种简单高效的食用真菌总RNA提取方法A Simple and Effective Method for Extracting Total RNA from Domestic Fungus
食用菌 RNA提取 金针菇
2008/1/16
摘要以金针菇为材料，建立了一种适合于富含RNase、多酚、多糖和糖蛋白的食用真菌RNA的提取方法，此方法在高浓度变性剂存在的条件下2次用苯酚-氯仿-异戊醇进行抽提去除DNA、蛋白质，并用异丙醇和乙酸钠选择性沉淀RNA、去除多糖，得到完整、均一的RNA样品。
Abstract:With Flammulina velutipes material,an improved method was dev...
制备高纯度、高产率总RNA的简易方法1)
RNA 异硫氰酸狐 氯仿 酚
2008/1/15
异硫氰酸呱和氯化物为最有效的蛋白质变性剂w10 Cox首先用肌盐氯化物提取RNA['10Chirgwin用强变性齐U和异硫氰酸呱从富含RNuse的组织细饱中提取完整RNA [410 Han等人证明异硫氰酸肌在低温下提取RNA是有效的，并省去了超速离心['1o Feramisco提出了结合呱盐与热酚来分离RNA的方法［[61。本文报道的是一种新的、快速有效的、结合了异硫氰酸狐、氯仿和酚提取RNA 的...
依赖于DNA的RNA聚合酶的研究
DNA
2008/1/15
真核细胞转录是一个极为复杂的过程，有很多迄今尚未研究清楚的因子参加。依赖于DNA的RNA 聚合酶(E. C. 2.7.7.6）直接或间接地和转录的调节过程有关。真核细胞有三种结构不同的RNA聚合酶5,6,8,10,11)，它们有不同的转录功能。因此，研究真核细胞RNA聚合酶的结构对弄清酶对转录和调节显得十分重要。
RNA 3`-末端32P标记及其核普酸简易测定
RNA 3`-末端
2008/1/15
近几年来，遗传的物质基础，即脱氧核糖核酸(DNA）序列分析技术，有了重大突破[5,7] 对核酸的结构与功能、基因表达、调控等研究起了巨大的推动作用。核糖核酸（RNA）序列分析工作，在经典方法的基础上，借鉴于DNA序列分析方法，也得到了迅速的发展[2,6]。简易直读技术也广泛应用于RNA序列研究中。DNA 或RNA序列分析，多采用体外放射性同位素标记示踪法，其中用放射性磷[32P l标记核酸的5‘一...