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中国科学院上海应用物理研究所专利：检测机械力对DNA与DNA聚合酶相互作用影响的方法
浙江大学微生物研究所张珂-吴雪昌实验室在PNAS和AEM发文合作揭示细胞DNA聚合酶功能分工新机制（图）
浙江大学微生物研究所 张珂 吴雪昌 PNAS AEM 细胞DNA 聚合酶 功能分工
2022/5/31
2022年3月15日，美国科学院院刊PNAS在线发表浙江大学生命科学学院微生物研究所特聘研究员张珂为第一作者的研究论文Global genomic instability caused by reduced expression of DNA polymerase ε in yeast。该研究揭示了DNA聚合酶epsion表达限制诱导的全局性基因组不稳定规律和遗传机制。
DNA聚合酶分子马达精确动态工作机理研究取得进展（图）
DNA聚合酶分子 马达 确动态工作机理
2023/1/6
从细胞最基本的各种功能原件开始，精确认识其动态工作机理，是认识生命、有效干预生命过程具备基本意义的第一步。伴随冷冻电镜技术的突破，蛋白质静态晶体结构目前能够高效获取，为突破生命科学认知局限提供了巨大便利。之后，解析蛋白质分子内部复杂部件的动态反应机理，是生命科学未来亟需突破的难题。其中，DNA/RNA聚合酶等马达分子精确动态工作机理的明晰，将为高效研发控制病毒复制的有效药物提供可行前提。遗憾的是，...
内源性和外源性因素会造成各种类型的DNA损伤，其中DNA双链断裂（DSB）是最为严重的一种DNA损伤类型，如不能及时修复将极大的影响基因组的稳定性，甚至导致细胞死亡。非同源末端连接（NHEJ）途径是DSB修复的主要方式之一[1]。X-家族DNA聚合酶（Pol λ、Pol μ、TdT）参与NHEJ过程并填补损伤DNA缺口[2]。在NHEJ过程中，Pol μ能够在一定程度上错误掺入dGTP，其错配产物...
华中科技大学生命学院朱斌教授课题组发现首个不需引物的DNA聚合酶
华中科技大学生命学院 朱斌教授课题组 不需引物 DNA 聚合酶 深海火山 噬菌体
2017/3/15
2017年3月7日，美国科学院院刊（PNAS）在线发表了生命学院朱斌课题组与哈佛大学和日本地球海洋科技局合作完成的最新成果，题目为《深海火山噬菌体DNA聚合酶无需引物起始DNA合成》（Deep-sea vent phage DNA polymerase specifically initiates DNA synthesis in the absence of primers）。这项研究发现了自然...
视频：河南师范大学生命科学学院分子生物学教学录像 DNA聚合酶
视频 河南师范大学生命科学学院 分子生物学 教学录像 DNA聚合酶
2016/12/12
视频：河南师范大学生命科学学院分子生物学教学录像 DNA聚合酶。
烟草、汽车尾气和燃煤排放所产生的苯并芘 (BP) 是一种常见的环境污染物,BP在体内经过代谢产生强致癌产物BPDE，BPDE与DNA上的鸟嘌呤结合形成的加合物（BPDE-dG）与肺癌发生密切相关。跨损伤 DNA 合成 (TLS)聚合酶可以直接在DNA 加合物对面掺入核苷酸，使由于DNA 损伤的存在而停滞的DNA复制得以延续。TLS 可分为无错旁路和易错旁路两种途径，无错旁路途径主要是在DNA加合物...
靶向山羊痘病毒DNA聚合酶基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选
RNAi 山羊痘病毒 BHK-21 抑制
2012/7/18
本研究针对山羊痘病毒基因组高度保守的DNA聚合酶区段， 选取了5个干扰靶位点。根据RNAi技术原理， 构建了包括对照在内的6个shRNA重组表达质粒， 转染细胞后接种病毒， 通过细胞毒液的TCID50测定和用实时荧光定量PCR检测siRNA重组质粒对羊痘病毒DNA聚合酶基因表达的抑制作用。结果显示， 重组表达质粒组的抑制率在63%以上， 其中以pSI-W2最为明显， 抑制率为93.8%。该研究应用...
细胞虽然拥有多种修复途径，但有些DNA损伤仍不可避免地会逃避修复而在基因组上保留下来，细胞跨损伤DNA合成的分子机制一直是DNA修复中主要的未解决问题之一.最近通过对一类结构相关性UmuC/DinB蛋白质超家族成员的研究发现它们具有DNA聚合酶功能.这类新发现的DNA聚合酶不同于经典的复制性DNA聚合酶，它们能以易误/突变(error-prone/mutagenic)或无误(error-free)...
摘要随着DNA聚合酶X家族成员数量的增加,特别是两个昆虫痘病毒（entomopoxvirus，EPV）成员的加入，家族内部的系统发育关系需要重新检查。总共37个来自不同物种的DNA聚合酶X家族成员的核心结构域序列被分析。结果显示:系统发育树呈现的家族内部系统发育关系基本上与家族成员的物种分布状态相吻合，其中，病毒成员与真核生物DNA聚合酶beta（polβ）亚群构成姐妹群，提示病毒成员可能起源于真...
摘要 测定了ＲＢ６９ ＤＮＡ 聚合酶以不正确的核苷酸（ｒＮＴＰ、ｄｄＮＴＰ以及碱基不配对的ｄＮＴＰ）为底物进行聚合反应的稳态动力学常数，并与Ｋｌｅｎｏｗ 酶进行了比较．结果表明，ＲＢ６９ ＤＮＡ 聚合酶在以不正确的核苷酸为底物进行聚合反应时，其Ｋｍ 值与正确底物参入时相比有大幅度提高，而ｋｃａｔ保持不变或下降幅度较小．而Ｋｌｅｎｏｗ 酶在利用不正确的核苷酸为底物时，与正确底物参入时相比，其ｋｃａｔ...
噬菌体RB69 DNA聚合酶的表达、分离纯化和其聚合反应的稳态动力学研究
RB69 DNA聚合酶 动力学常数 参入的
2007/12/24
摘要 噬菌体ＲＢ６９外切酶活性缺失的ＤＮＡ 聚合酶突变体（Ｄ２２２Ａ／Ｄ３２７Ａ）在大肠杆菌细胞中表达，表达量达细胞蛋白总量的６９％ ．表达后经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦａｓｔＦｌｏｗ ， Ｓｏｕｒｃｅ ３０Ｑ 和ＨＴＰ三步分离纯化，纯度可达９９％ 以上．随后测定了该酶利用５种ｄＮＴＰ为底物进行聚合反应的酶促动力学常数（Ｋｍ 和Ｋｃａｔ），结果表明该酶利用ｄＵＴＰ的能力与利用ｄＴＴＰ的能力相...
利用Taq DNA聚合酶对PCR产物直接进行顺序分析
非对称性PCR扩增 Taq DNA聚合酶 直接顺序分析
2007/12/21
摘要 Taq DNA聚合酶具有反应速度快、温度作用范围广及良好的续进性等特点,可视为一种理想的DNA顺序分析酶。本文首先对非对称性PCR扩增过程中单、双链DNA产物的积累情况进行了分析,然后采用标记延伸二步法,对Taq DNA聚合酶的性质及影响因素进行分析。为进一步改进Taq DNA聚合酶测序的方法,本反应建立了“Klenow-型”的直接掺入标记同位素测序法,即在反应液中加入与标记核苷酸相应的一定...